體外受精和早期胚胎培養(yǎng)課件

3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。2.簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物胚胎的早期培養(yǎng)方法。3.認(rèn)同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。國(guó)產(chǎn)奶牛：年均產(chǎn)奶量3000公斤左右國(guó)際良種奶牛：年均產(chǎn)奶量10000公斤左右引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬(wàn)－5萬(wàn)元

牛的生育率低，一頭牛一胎只一個(gè)，一生只能生育四五次

牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?，其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右，公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了偉大設(shè)想誕生了試管動(dòng)物技術(shù)過(guò)程：第一步：體外受精第二步：早期胚胎的培養(yǎng)第三步：胚胎移植1982年世界首例試管牛犢問(wèn)世試管動(dòng)物技術(shù)

是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖借腹懷胎

主要包括

、

和

等幾個(gè)主要步驟。概念：采取雌性動(dòng)物的

和雄性動(dòng)物的

，使其在

中受精。卵細(xì)胞精子試管卵細(xì)胞的采集精子的獲取受精一、體外受精(書(shū)P69)

大家畜或大型動(dòng)物，如牛，卵細(xì)胞的采集：

從屠宰場(chǎng)已屠宰母畜的

中采集卵母細(xì)胞.也可以借助

、

或

等工具確定卵泡位置，直接從活體動(dòng)物中吸取泡卵液（連同卵母細(xì)胞）取出，在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)，使其成熟。卵巢超聲波(B超)探測(cè)儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡牛卵巢一）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)B超活采儀超聲波引導(dǎo)法：借助超聲波探頭和屏幕的引導(dǎo)，從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和采卵針的采卵器通過(guò)陰道插入子宮，同時(shí)通過(guò)將卵巢貼在探頭上。根據(jù)B超屏幕所顯示的卵泡位置，利用采卵針穿刺卵泡并同時(shí)抽吸卵母細(xì)胞?；铙w采集的牛卵母細(xì)胞CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)

收集精子的方法有：假陰道法手握法電刺激法二）精子的收集和獲能書(shū)P70~71獲能處理:

培養(yǎng)法：嚙齒動(dòng)物、家兔和豬將取自附睪的精子，放入人工配制的獲能液中培養(yǎng)一段時(shí)間?；瘜W(xué)法：牛、羊?qū)⒕臃旁谝欢舛鹊母嗡鼗蜮}離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)，使精子獲能。二）精子的收集和獲能

在體外受精前，要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理。通常采用的體外獲能方法有

和

兩種。對(duì)于

、

和

的精子，一般采用培養(yǎng)法；

對(duì)于

、

等家畜的精子常用化學(xué)法。培養(yǎng)法：精子在獲能液中獲能?；瘜W(xué)誘導(dǎo)法：精子一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能。培養(yǎng)法化學(xué)誘導(dǎo)法嚙齒動(dòng)物家兔豬牛羊復(fù)習(xí)3.受精在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程離心的目的是什么？卵母細(xì)胞的培養(yǎng)的目的是什么？保存剩余的卵子和精子的方法是什么？二、胚胎的早期培養(yǎng)2、培養(yǎng)液成分：鹽類：無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、核苷酸調(diào)節(jié)物質(zhì)：維生素、激素特有物質(zhì)：動(dòng)物血清不同動(dòng)物胚胎移植時(shí)間不同牛、羊：桑椹胚或囊胚階段小鼠、家兔：卵裂期或囊胚階段試管嬰兒：8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段

胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時(shí)，可將其取出向受體移植或冷凍保存。1978年7月25日世界首例試管嬰兒1988年3月10日我國(guó)首例試管嬰兒1992年我國(guó)首例三胞胎試管嬰兒根據(jù)資料回答下列問(wèn)題：1.資料上用到了什么生物技術(shù)？試管嬰兒技術(shù)包括體外受精、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)2.試管嬰兒和母親正常懷孕的過(guò)程有何異同？相同之處：都通過(guò)有性生殖產(chǎn)生，在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處：體外受精，并在體外發(fā)育成早期胚胎，然后胚胎移植。胚胎移植采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)（時(shí)期：）

1）超數(shù)排卵（試劑）

2）活體取卵（儀器）

3）從屠宰的卵巢取卵方法①②③（方法，試劑）（試劑）（培養(yǎng)條件、目的階段）成熟的卵子獲能的精子MII中期方法有性生殖

無(wú)性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵循

不遵循體外受精胚胎移植試管動(dòng)物克隆動(dòng)物生殖方式技術(shù)手段遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律比較試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物來(lái)自2個(gè)個(gè)體

主要來(lái)自核供體

1、關(guān)于牛體外受精及胚胎的工廠化生產(chǎn)的敘述，正確的是A.精子和卵細(xì)胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宮B.采集的卵母細(xì)胞應(yīng)立即與精子共同放入培養(yǎng)液才能形成受精卵C.成熟的卵細(xì)胞與收集來(lái)的精子相遇形成受精卵，需培養(yǎng)到一定階段才可移植D.體外受精胚胎的工廠化生產(chǎn)即胚胎發(fā)育和受精過(guò)程只需在體外進(jìn)行2、下列現(xiàn)代生物技術(shù)成果獲得必須通過(guò)胚胎移植的是 A.轉(zhuǎn)基因良種雞B.重組酵母乙肝疫苗 C.單克隆抗體D.試管嬰兒C

D

鞏固練習(xí)3、采集的卵母細(xì)胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精，以下原因不正確的是A.卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能的過(guò)程B.動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同C.體外人工培養(yǎng)至減數(shù)分裂第二次分裂中期時(shí)才成熟D.沖出的卵子還需要培養(yǎng)一段時(shí)間由小變大D

4、下列關(guān)于滋養(yǎng)層細(xì)胞的敘述，不正確的是 A.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎盤和胎膜B.可以用滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定C.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞就是將來(lái)原腸胚的外胚層D.滋養(yǎng)層細(xì)胞沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列C

5、下列有關(guān)胚胎工程的敘述，正確的是 A.“試管動(dòng)物”的生殖方式屬于無(wú)性生殖 B.卵裂球時(shí)期每一個(gè)細(xì)胞的體積比受精卵大 C.通過(guò)胚胎移植技術(shù)可充分發(fā)揮良種母畜的繁殖潛力 D.對(duì)某一胚胎的干細(xì)胞移植，產(chǎn)生的動(dòng)物中雄性和雌性的概率各占1/2C

6、下列關(guān)于胚胎工程的敘述，正確的是（ ） A.通過(guò)胚胎體外培養(yǎng)可直接獲得新生兒 B.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素 C.胚胎移植中的受體與供體必須都為優(yōu)良品種 D.受體母畜需要遺傳性狀優(yōu)良的品種，供體母畜可用遺傳性狀一般的品種B

7、“試管嬰兒”技術(shù)是通過(guò)將不孕夫婦的精子和卵細(xì)胞取出在試管中完成受精，并在試管中培養(yǎng)受精卵使其發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，再將胚胎移入女性子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。它不僅使一部分不能生育的男女重新獲得了生育的機(jī)會(huì)，也為人類的優(yōu)生開(kāi)辟了新的途徑。據(jù)此回答：（1）“試管嬰兒”技術(shù)在生物學(xué)上所依據(jù)的原理是 A.有性生殖 B.組織培養(yǎng)C.克隆技術(shù) D.基因工程（2）“試管嬰兒”的形成用到下列哪些技術(shù)？

（填序號(hào)）①體外培養(yǎng)②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植A①②③8、下圖是培育能產(chǎn)生凝血因子牛的過(guò)程示意圖，回答相關(guān)問(wèn)題：（1）為能從良種母牛體內(nèi)一次取得多枚卵子，可以采用

的方法。據(jù)報(bào)道，這種技術(shù)已經(jīng)被濫用于人類生育中，從而出現(xiàn)許多人工“多胞胎”，這種技術(shù)帶來(lái)的危害之一是

。（2）在過(guò)程③中，當(dāng)一個(gè)精子進(jìn)入卵細(xì)胞后會(huì)激發(fā)卵子發(fā)生反應(yīng)，如透明帶反應(yīng)等，其意義是

。過(guò)程⑥涉及的技術(shù)是

。注射促性腺激素影響胎兒的健康發(fā)育、對(duì)孕婦的身體不利等防止多精入卵胚胎移植1999年4月23日晚9時(shí)，在廣州中山醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院出生一健康女?huà)?，她是我?guó)首例第三代試管嬰兒，父母身體健康、嬰兒的母親7年前生下一男嬰，孩子一歲后發(fā)病，最后死于腦出血，5年后，她第二次懷孕6個(gè)月時(shí)，到醫(yī)院抽羊水及臍帶血診斷，發(fā)現(xiàn)胎兒是男孩，而且是血友病患者，遂引產(chǎn)。夫婦二人最后來(lái)到中山醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院做試管嬰兒。醫(yī)生培養(yǎng)了7個(gè)可做活體檢查的胚胎，并抽取每個(gè)胚胎1－2個(gè)細(xì)胞進(jìn)行檢查后，選擇了兩個(gè)胚胎進(jìn)行移植。最后一個(gè)移植成功。根據(jù)資料回答下列問(wèn)題：（1）試管嬰兒技術(shù)作為現(xiàn)代生物技術(shù)和母親正常懷孕，生產(chǎn)的過(guò)程相同之處是：

。不同之處是：

。（2）血友病的遺傳方式為

，如果用B、b分別表示血友病基因和正?；?，則父親、母親的基因型分別是

和

，如果該夫婦再生一男孩，患血友病的概率是

。（3）醫(yī)生抽取活體胚胎的1或2個(gè)細(xì)胞后，可通過(guò)觀察

，判斷胎兒的