貧血其他檢查

第二節(jié)貧血的其它檢查內(nèi)容網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞比積及相關(guān)數(shù)值測(cè)定

●

紅細(xì)胞比積（Hct）●平均紅細(xì)胞體積（MCV）

●

平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）

●

平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）溶血性貧血

●

紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)

●酸溶血試驗(yàn)(Hma,stest)

●抗人球蛋白試驗(yàn)(Coomb,stest)

●尿內(nèi)含鐵血黃素檢查(Roustest)

一、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

（reticulocytecount）(一)原理

網(wǎng)織紅細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞

成熟的紅細(xì)胞,

網(wǎng)織紅細(xì)胞

（reticulocytecount）

(二)方法

活體染色法.近年來(lái)還可通過(guò)某些血液自動(dòng)分析儀及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)法進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。

★(三)參考值(活體染色法)成人0.5%~1.5%新生兒2%~6%網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(24~84)×109/L

★

（四）臨床意義

直接反應(yīng)骨髓造血功能

療效觀(guān)察的指標(biāo)

反映骨髓增生或重建情況增高●

溶血性貧血●缺鐵性貧血●巨幼細(xì)胞性貧血減低

●

再生障礙性貧血二、紅細(xì)胞比積

（hemotocrit，HT，Hct）(一)原理

將定量的經(jīng)雙草酸鹽抗凝全血灌注于

Wintrobe

分血管中，以一定的速度和時(shí)間離心沉淀后，讀取紅細(xì)胞層在全血中所占體積的百分比。(二)方法

溫氏法

二、紅細(xì)胞比積

（三）參考值

成人男性40~

50％成人女性37~

48％（四）臨床意義增加

■相對(duì)：血液濃縮

■絕對(duì)：真性紅細(xì)胞增多癥減少各種貧血

■Hct改變與RBC數(shù)不一定完全平行

■計(jì)算RBC各項(xiàng)平均值才有意義三、紅細(xì)胞平均數(shù)值計(jì)算(一)原理

根據(jù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞比積，通過(guò)公式可分別計(jì)算出下列紅細(xì)胞平均數(shù)值，多參數(shù)血液自動(dòng)分析儀可直接獲得此類(lèi)參數(shù)。

(二)計(jì)算方法及參考值

平均紅細(xì)胞體積（MCV：80~100

fL）指每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積，以飛升(fl)為單位。

Hct（L/L）MCV=×1015fLRBC（×1012/L）平均紅細(xì)胞Hb含量（MCH：26~34pg）指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含有的血紅蛋白的平均量，以皮克(pg)為單位。

Hb（g/L）MCH=pgRBC（×1012/L）

平均紅細(xì)胞Hb濃度（MCHC：310~70g/L）指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度，以克/升(g/L)表示。

Hb（g/L）

MCHC=g/L

Hct（L/L）

臨床意義

根據(jù)MCV、MCH、MCHC測(cè)定可對(duì)貧血進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類(lèi)，并對(duì)其鑒別診斷也有一定意義。既：有助于貧血形態(tài)學(xué)分類(lèi)選擇合理治療方案貧血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒別表

細(xì)胞形態(tài)學(xué)MCVMCHMCHC病因

參考值

80-100fL26-34pg310-370g/L大細(xì)胞性貧血↑↑-巨幼細(xì)胞性貧血正常細(xì)胞性貧血---急性失血、溶貧再障、白血病小細(xì)胞性貧血↓↓-感染、中毒惡性腫瘤小細(xì)胞低色素↓↓↓缺鐵性貧血慢性失血四、溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)室檢查(一)溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷步驟HA的診斷一般分為四個(gè)步驟：確定有無(wú)貧血明確溶血的存在判定溶血部位查明溶血原因★(一)溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)診斷步驟1.確定有無(wú)貧血若紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積低于參考值的下限則為貧血。

2.明確溶血的存在（1）紅細(xì)胞破壞增加

血液中網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著增多血漿游離血紅蛋白含量增高肝珠蛋白含量減低血清間接膽紅素增高尿膽原含量增高

2.明確溶血的存在（2）骨髓紅系細(xì)胞高度代償性增生骨髓有核細(xì)胞增生明顯活躍,粒紅比值明顯減低或倒置，紅系以中、晚幼紅細(xì)胞增生為主，原紅和早幼紅細(xì)胞亦增多，可見(jiàn)染色質(zhì)小體(Howell-jolly小體)、Cabot環(huán)及核分裂幼紅細(xì)胞增多。血涂片中紅細(xì)胞形態(tài)異常，出現(xiàn)嗜多色性紅細(xì)胞和幼紅細(xì)胞等。

3.判定溶血部位

血管內(nèi)溶血血管外溶血

4.查明溶血的原因HA的原因較復(fù)雜一般先做常用的篩選試驗(yàn)，如紅細(xì)胞形態(tài)觀(guān)察紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)抗人球蛋白試驗(yàn)蔗糖水溶血試驗(yàn)血紅蛋白電泳根據(jù)篩選試驗(yàn)結(jié)果再選擇適當(dāng)?shù)拇_診試驗(yàn),絕大部分患者的HA原因可以查明。（二）溶血性貧血的分類(lèi)遺傳性紅細(xì)胞膜異常紅細(xì)胞酶異常珠蛋白合成異常獲得性機(jī)械性理化及生物因素免疫性單核-巨噬系統(tǒng)破壞按病因和發(fā)病機(jī)制分：（二）溶血性貧血的分類(lèi)血管內(nèi)血管外按溶血的部位分：血管內(nèi)溶血與血管外溶血的鑒別檢查項(xiàng)目血管內(nèi)溶血血管外溶血紅細(xì)胞形態(tài)異常-～+++～+++血漿游離血紅蛋白+～+++-～+高鐵血紅素白蛋白+-尿Rous試驗(yàn)+～++-血紅蛋白尿-～+++-紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)-++(三)溶血性貧血確診的實(shí)驗(yàn)室檢查1.顯示紅細(xì)胞破壞增加的依據(jù)(1)紅細(xì)胞壽命縮短、破壞增加的實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞壽命測(cè)定紅細(xì)胞形態(tài)改變血漿乳酸脫氫酶測(cè)定(2)血漿游離血紅蛋白增高的檢查血漿游離血紅蛋白測(cè)定血清珠蛋白測(cè)定血漿高鐵血紅素白蛋白測(cè)定血紅蛋白尿檢驗(yàn)含鐵血黃素尿試驗(yàn)(Rous試驗(yàn))（3）膽紅素代謝異常的表現(xiàn)(1)紅細(xì)胞壽命縮短、破壞增加的實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞壽命測(cè)定：用51Cr標(biāo)記紅細(xì)胞測(cè)定其半衰期（T1/2）正常25～32天溶貧﹤15天(1)紅細(xì)胞壽命縮短、破壞增加的實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞形態(tài)改變可見(jiàn)紅細(xì)胞破壞的征象(1)紅細(xì)胞壽命縮短、破壞增加的實(shí)驗(yàn)血漿乳酸脫氫酶測(cè)定

紅細(xì)胞破壞乳酸脫氫酶(三)溶血性貧血確診的實(shí)驗(yàn)室檢查(2).血漿游離血紅蛋白增高的檢查血漿游離血紅蛋白測(cè)定血清珠蛋白測(cè)定血漿高鐵血紅素白蛋白測(cè)定血紅蛋白尿檢驗(yàn)含鐵血黃素尿試驗(yàn)(Rous試驗(yàn))血漿游離血紅蛋白測(cè)定原理：游離血紅蛋白中血紅素部分有類(lèi)似過(guò)氧化物酶的作用，能使鄰甲苯胺氧化顯色，與已知血紅蛋白濃度的標(biāo)準(zhǔn)液比較而求得其含量。

標(biāo)本采集：用肝素或EDTA抗凝血均可。

參考值：<40mg/L。

血漿游離血紅蛋白測(cè)定臨床意義

(1)增高血管內(nèi)溶血如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)、陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿癥、冷凝集素綜合征、溫抗體型自身免疫性溶血性貧血、行軍性血紅蛋白尿癥、微血管病性溶血性貧血等。

(2)血管外溶血正常

如遺傳性球形細(xì)胞增多癥等。

血清珠蛋白測(cè)定

原理：珠蛋白(haptoglobin，Hp)是肝臟合成的一種a2巨球蛋白，能與血紅蛋白(Hb)結(jié)合成一穩(wěn)定的Hb-Hp復(fù)合物，后者在pH4的酸性條件下，具有過(guò)氧化物酶活性，可催化H2O2分解，使愈創(chuàng)木酚氧化顯色，其顏色的深淺與Hp含量成正比。血清中Hp的含量是以Hb的結(jié)合量來(lái)表示的，即以mgHb/L表示。

參考值：200～1900mgHb/L。

血清珠蛋白測(cè)定

臨床意義（血管內(nèi)、血管外）各種HAHp明顯減低但肝細(xì)胞損傷性病變、傳染性單核細(xì)胞增多癥，先天性無(wú)Hp血癥等Hp亦見(jiàn)降低。感染、創(chuàng)傷、腫瘤、紅斑狼瘡、類(lèi)固酵治療、肝外阻塞性黃疸時(shí)可增高。故在此種情況下，如Hp不減低，并不能排除溶血。

血漿高鐵血紅素白蛋白測(cè)定

原理：當(dāng)溶血較重使Hp耗盡時(shí)，可出現(xiàn)高鐵血紅素白蛋白，電泳時(shí)出現(xiàn)在Hb-Hp區(qū)帶之前。

標(biāo)本采集：靜脈血凝固后分離血清。

參考值：正常人為陰性。

臨床意義：陽(yáng)性表示嚴(yán)重血管內(nèi)溶血血紅蛋白尿檢驗(yàn)

臨床意義：陽(yáng)性表示血管內(nèi)溶血★含鐵血黃素尿試驗(yàn)(Rous試驗(yàn))

原理：尿中含鐵血黃素在酸性條件下與亞鐵氰化鉀形成亞鐵氰化鐵而呈藍(lán)色。

標(biāo)本采集：將尿液離心后取沉渣染色。

參考值：正常人為陰性。

★含鐵血黃素尿試驗(yàn)(Rous試驗(yàn))

臨床意義陽(yáng)性血管內(nèi)溶血特別是慢性血管內(nèi)溶血時(shí)易出現(xiàn)，并可持續(xù)數(shù)周。

陰性并不能除外血管內(nèi)溶血。因溶血初期，腎小管上皮細(xì)胞尚未充分將吸收的Hb轉(zhuǎn)變?yōu)楹F血黃素，未形成足夠大的顆粒(直徑>1mm才能在光鏡下檢出)，含有含鐵血黃素的上皮細(xì)胞的未完成其衰老脫落的過(guò)程等均可呈陰性反應(yīng)，必要時(shí)反復(fù)檢查或取晨尿、午睡后的尿液進(jìn)行檢查。

（3）膽紅素代謝異常的表現(xiàn)血非結(jié)合膽紅素尿中的尿膽原

尿膽紅素（—）(三)溶血性貧血確診的實(shí)驗(yàn)室檢查2.顯示紅細(xì)胞代償增加的依據(jù)(1)外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增高(2)外周血涂片紅細(xì)胞形態(tài)改變(3)增生性貧血骨髓象(四)溶血性貧血的病因診斷

1.紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)紅細(xì)胞膜缺陷主要是指膜成分或膜支架結(jié)構(gòu)異常,導(dǎo)致紅細(xì)胞表面積與體積比、可塑性及脆性等改變，有的還伴有紅細(xì)胞形態(tài)異常而易于破裂導(dǎo)致溶血性貧血。膜成分異常主要是指脂質(zhì)和膜支架結(jié)構(gòu)的異常，常見(jiàn)的是收縮蛋白(區(qū)帶Ⅰ、Ⅱ)、肌動(dòng)蛋白(區(qū)帶Ⅴ)及區(qū)帶Ⅳ-1蛋白的磷酸化或相互結(jié)合障礙,不能形成牢固的膜骨骼。針對(duì)紅細(xì)胞膜缺陷常用的篩選試驗(yàn)是測(cè)定紅細(xì)胞在各種實(shí)驗(yàn)條件下抗溶解的能力，若通過(guò)生化方法直接測(cè)定膜成分的異常,則更為準(zhǔn)確而特異。

（1）.紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)（2）.溫孵育后滲透脆性試驗(yàn)（3）.自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)（4）.酸溶血試驗(yàn)（5）.蔗糖水溶血試驗(yàn)★1.紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)（1）紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)(red-cellosmoticfragilitytest,ROFT)原理：正常紅細(xì)胞為雙凹圓盤(pán)狀,在低滲鹽水中吸水膨脹的適應(yīng)性較大(可增加70%的體積而不破裂)。遺傳性球形細(xì)胞增多癥(HS)等紅細(xì)胞的表面積/體積(S/V)的比值小,對(duì)低滲鹽水的適應(yīng)性小(脆性增大)。本試驗(yàn)是測(cè)定紅細(xì)胞在一系列不同濃度低滲氯化鈉鹽水內(nèi)開(kāi)始溶血和完全溶血的氯化鈉濃度。標(biāo)本采集：用肝素抗凝血,也可取靜脈血立即測(cè)定。參考值：開(kāi)始溶血4.2~4.6g/LNaCl

完全溶血2.8~3.4g/LNaCl意義

↑：遺傳性球形RBC增多癥自身免疫性溶血性貧血

↓：低色素性貧血(IDA，地中海貧血)（2）溫孵育后滲透脆性試驗(yàn)

原理略意義：正常人輕度增加輕癥遺傳性球形RBC增多癥丙酮酸激酶缺陷癥（3）.自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)原理參考值：孵育48h,<4.0%;+葡萄糖orATP<0.6%意義：用于鑒別診斷遺傳性球形RBC增多癥和先天性非球形細(xì)胞性HA★（4）.酸化溶血試驗(yàn)(Ham’stest)原理:RBC膜在酸性條件下對(duì)補(bǔ)體敏感參考值：正常人陰性意義：陣發(fā)性睡眠性Hb尿癥(PNH)確診（5）蔗糖水溶血試驗(yàn)原理同酸溶血試驗(yàn)參考值：正常人陰性意義：陣發(fā)性睡眠性Hb尿癥(PNH)篩選2.自身免疫性溶血性貧血★（1）.抗人球蛋白試驗(yàn)Coombstest原理檢測(cè)不完全抗體意義：陽(yáng)性見(jiàn)于新生兒溶血自身免疫性溶血

SLE

類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎惡性淋巴瘤及藥物性溶血等直接凝集－檢測(cè)新生兒RBC

間接凝集－檢測(cè)母親血清多數(shù)為溫抗體型(37℃,IgG)

少數(shù)為冷抗體型(4℃,IgM