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流式細(xì)胞多色分析23-13536-00Rev.01第1頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一MulticolorAnalysisStrategiesPlottypesHierarchicalgatingPopulationhierarchiesBackgating223-13536-00Rev.01第2頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一UseDifferentPlotTypesHistograms—usinghistogramscanhelpdiscriminatebetweentwopopulations.DotPlot:hard

todiscriminatepopulationsDotPlot:displayingfewereventsimprovesdiscriminationHistogram:populationboundaryisevident323-13536-00Rev.01第3頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一UseDifferentPlotTypesContourPlots—usingcontourplotscan:Helplocatepopulationmeans.Indicateaneedforbiexponentialscaling.DotPlot:hardtoseepopulationsbunchedonaxisContourPlot:

showsthatbiexponentialdisplaymightbeneededBiexponentialContourPlot:givesbestdisplayofpopulations423-13536-00Rev.01第4頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一HierarchicalGating523-13536-00Rev.01第5頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一HierarchicalGatingWhatwentwronghere?CorrectHierarchy623-13536-00Rev.01第6頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一BackGatingResearcherwantstodiscriminateTregsbasedonCD25andCD127expression.NeedtoensureagateincludestheentireFOXP3+population.723-13536-00Rev.01第7頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一AdditionalAnalysisStrategiesBiexponentialscalingEventstodisplayHingedandoffsetquadrantgatesDerived(boolean)gatesSnap-togatesStatisticsAnalysistemplates823-13536-00Rev.01第8頁，共10頁，2023年，2月20日，星期一ICSDataAnalysisResultsInformationthatcanberetrieved:Numberofcollectedevents,numberofliveCD3+cells%ofmainpopulations:%CD3+,CD4+,CD8+%ofna?ve(CD45RA+)andmemory(CD45RA–)

CD4+andCD8+cells%CD25+CD4+cells(Tregs)Forthecytokines:%ofCD4+andCD8+

making1or2cytokinesAnalysisExercise923-13536-00Rev.0

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