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文檔簡介
第一頁,共17頁。一、動物(dòngwù)細胞融合〔細胞雜交〕1、過程(guòchéng):第二頁,共17頁。一、動物細胞(xìbāo)融合〔細胞(xìbāo)雜交〕2、概念(gàiniàn):指兩個或多個(duōɡè)動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。3、結(jié)果:形成單核的雜交細胞4、原理:細胞膜的流動性5、誘導(dǎo)方式物理法:離心、振動、電激化學(xué)法:聚乙二醇〔PEG)生物法:滅活的病毒第三頁,共17頁。動物(dòngwù)細胞融合過程:動物細胞A動物細胞B誘導(dǎo)(yòudǎo),融合篩選(shāixuǎn)雜交細胞AB有絲分裂〔膜融合、質(zhì)融合、核融合〕注意:動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起,讓它們隨機融合后,再從中篩選雜交細胞第四頁,共17頁。7、意義:突破(tūpò)了有性雜交方法的局限,使遠緣雜交〔種間、屬間、科間、動植物之間〕成為可能。8、應(yīng)用:成為研究細胞遺傳(yíchuán)、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段
特別是利用細胞融合技術(shù)而開展起來的雜交瘤技術(shù),為制造(zhìzào)單克隆抗體開辟了新途徑。第五頁,共17頁。1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法(fāngfǎ)及缺陷是什么?2、抗體(kàngtǐ)由什么細胞產(chǎn)生?B淋巴細胞每個B細胞只分泌一種(yīzhǒnɡ)特異性抗體要想獲得大量的單一抗體,必須克隆單一的B淋巴細胞,形成細胞群第六頁,共17頁。二、單克隆抗體(kàngtǐ)設(shè)計方案:一種(yīzhǒnɡ)B淋巴細胞--只分泌一種(yīzhǒnɡ)特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞--能在體外大量增殖雜交(zájiāo)細胞第七頁,共17頁。1、注射抗原的目的(mùdì)是什么2、誘導(dǎo)(yòudǎo)其融合的方法有哪些?3、融合后培養(yǎng)液中有幾種(jǐzhǒnɡ)細胞4、第一次篩選的方法和目的5、第二次篩選的方法和目的6、雜交瘤細胞獲得單一抗的方法第八頁,共17頁。1、原理:雜交瘤細胞具有兩個(liǎnɡɡè)親本的特性,即能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。2、過程(guòchéng)B淋巴細胞(xìbāo)骨髓瘤細胞(xìbāo)誘導(dǎo)融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞〔B-瘤細胞〕克隆化培養(yǎng)專一抗體檢測能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體第九頁,共17頁。3.單克隆抗體(kàngtǐ)的應(yīng)用:單克隆抗體(kàngtǐ)的優(yōu)點:特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大①作為診斷試劑(shìjì):準確識別各種抗原物質(zhì),并與特異性結(jié)合優(yōu)點:準確、高效、簡易、快速②用于運載藥物:制成“生物導(dǎo)彈〞治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損傷正常細胞,又減少了用藥劑量。第十頁,共17頁。除通過雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體(kàngtǐ)外,還有什么方法?第十一頁,共17頁。1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是〔〕A.經(jīng)過(jīngguò)免疫的B淋巴細胞B.沒經(jīng)過(jīngguò)免疫的T淋巴細胞
C.經(jīng)過(jīngguò)免疫的T淋巴細胞A第十二頁,共17頁。3.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中,正確的選項是〔〕誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段根本(gēnběn)相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細胞D4.單克隆抗體制備過程(guòchéng)中培育的雜交細胞是------A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合B.由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成D第十三頁,共17頁。(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細胞雜交(zájiāo)過程示意圖第十四頁,共17頁。動物細胞與植物(zhíwù)細胞的差異:無細胞壁全能性受限制,不能發(fā)育成雜種(záz
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