Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動(dòng)分析儀操作說明與注意事項(xiàng)

Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動(dòng)分析儀操作說明與注意事項(xiàng)Eppendorf蛋白質(zhì)核酸自動(dòng)分析儀操作說明與注意事項(xiàng)操作說明：準(zhǔn)備：開始測(cè)定前只需開啟儀器背后的電源開關(guān)即可開始測(cè)定。一、核酸濃度測(cè)定（包括dsDNA、ssDNA、RNA、Oligo）1.例如待測(cè)定樣品為dsDNA（eg：PCR產(chǎn)物），按下鍵“7/dsDNA”（若待測(cè)樣品為ssDNA，eg：反轉(zhuǎn)錄合成的第一鏈cDNA產(chǎn)物，則相應(yīng)按下鍵“8/ssDNA若待測(cè)樣品為RNA，則按下鍵“9/RNA”；若待測(cè)樣品為Oligo（寡聚核苷酸），eg：PCR引物，則相應(yīng)按下鍵“6/Oligo”。）2.若測(cè)定樣品需要稀釋后測(cè)定，則需先設(shè)定樣品的稀釋度：（1）按下鍵“Dilution”；（2）輸入樣品體積和稀釋液體積，按Enter鍵確認(rèn)。將空白對(duì)照置入樣品孔。注意：空白對(duì)照是空白液，并非所有情況都是水。（例如用Tris溶液溶解DNA制品，則要用Tris液做空白對(duì)照。）3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對(duì)照，設(shè)置為0.000A；(先不取出對(duì)照，按下Sample，看是否調(diào)零成功，若成功則可開始測(cè)樣品)5.將第一個(gè)樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個(gè)樣品的相關(guān)參數(shù)（記下樣品濃度，OD260，OD280，OD260/OD280）8.直接放入第二個(gè)樣品；9.按下“Sample”；10.儀器顯示第二個(gè)樣品的吸光度值和濃度值，以及其他相關(guān)參考比值；11.依次測(cè)定，每個(gè)樣品的測(cè)定值將自動(dòng)存儲(chǔ)在機(jī)器中，查看測(cè)定結(jié)果的方法如下：（1）按下鍵“./Function”（2）選擇“DISPLAY-RESULT”,按Enter鍵，查看每個(gè)樣品的測(cè)定值記錄（本機(jī)可存儲(chǔ)100個(gè)樣品的測(cè)定值）。二、OD600細(xì)菌生長(zhǎng)密度測(cè)定1.按下鍵“5/OD600”；2.將空白對(duì)照置入樣品孔；3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對(duì)照，設(shè)置為0.000A；5.將第一個(gè)樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個(gè)樣品的吸光度值和濃度值；8.依次測(cè)定，每個(gè)樣品的測(cè)定值將自動(dòng)存儲(chǔ)在機(jī)器中，查看測(cè)定結(jié)果。三、蛋白質(zhì)濃度的直接測(cè)定（280nm測(cè)定）1.按下鍵“4/Protein”；2.將空白對(duì)照置入樣品孔；3.按下鍵“Blank”；4.儀器記錄空白對(duì)照，設(shè)置為0.000A；5.將第一個(gè)樣品置入樣品孔；6.按下“Sample”；7.儀器顯示第一個(gè)樣品的吸光度值和濃度值，以及其他相關(guān)參考比值；8.依次測(cè)定，每個(gè)樣品的測(cè)定值將自動(dòng)存儲(chǔ)在機(jī)器中，可查看測(cè)定結(jié)果。四、蛋白質(zhì)濃度顯色法的間接測(cè)定（Bradford，Lowry，BCA）1.按下鍵“1/Bradbord”or“2/Lowry”or“BCA”選擇蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)的方法；注：Bradford鍵按兩次，每次顯示不同的測(cè)定范圍。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)樣品數(shù)量、測(cè)定次數(shù)和濃度范圍。按下鍵“Parameter”用上下鍵進(jìn)行選擇和參數(shù)調(diào)整。3.將空白對(duì)照置入樣品孔；4.按下鍵“Blank”；5.儀器記錄空白對(duì)照，設(shè)置為0.000A；6.將第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品（如需沿用已存儲(chǔ)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可直接測(cè)樣品）置入樣品孔；7.按下“Sample”或“Standard”；8.依次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，每個(gè)樣品的測(cè)定值將自動(dòng)存儲(chǔ)在機(jī)器中，查看測(cè)定結(jié)果。五、注意事項(xiàng)：1為了盡量減少顆粒對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1－1.5A。在此范圍內(nèi)顆粒的干擾相對(duì)較小，結(jié)果穩(wěn)定。樣品的濃度不能過低或者過高。2混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現(xiàn)負(fù)值；3混合液中不能有氣泡，空白液無懸浮物，否則讀數(shù)漂移劇烈；4必須使用相同的比色杯測(cè)試空白液和樣品，