大黃的成分提取

大黃中蒽醌類成分的提取分離和鑒定關鍵詞：大黃蒽醌類成分提取2012-08-2709:01來源：丁香園點擊次數(shù)：344概述大黃記載于《神農本草經(jīng)》等許多文獻中，用于泄下、健胃、清熱、解毒等。自古以來，大黃在植物性瀉下藥中占有重要位置，是一位很早就被各國藥典所收載的世界性生藥。大黃的種類繁多，優(yōu)質大黃是蓼科植物掌葉大黃(RheumpalmatclmL)，大黃(R.officinaleBaill)及唐古特大黃(R.tangutiumMaxim.etRegli)的根莖及根，大黃中含有多種游離的羥基蔥醌類化合物以及它們與糖所形成的苷。已經(jīng)知道的羥基蒽醌主要有下列五種：0H00HR：名稱晶形熔魚-H-COOH大黃酸(Rhein)黃色針晶-OH大螢素(Emodin)橙色鈴聶23425/CH-CH:OH蘆薈大黃素橙色細針晶206<OSC(Alae-emodin)-CHs大黃素甲K(Physcian)磚紅色針晶207C41-CH3大黃酚(CI)>Tsophanol)金色片狀結196C晶大黃中蔥醌苷元，其結構不同，因而酸性強弱也不同。大黃酸連有-COOH,酸性最強；大黃素連有〃0H,酸性第二；蘆薈大黃素連有芐醇-0H,酸性第三；大黃素甲醚和大黃酚均具有1,8-二酚羥基，前者連有-0CH3和-CH3，后者只連有-CH3,因而后者酸性排在第四位。實驗目的和要求1．學習緩沖紙色譜的基本操作技術，并能根據(jù)色譜結果，設計液液萃取法分離混合物的實驗方案。掌握PH梯度法的原理及操作技術。3．通過磷酸氫鈣柱色譜分離大黃酚及大黃素甲醚的試驗，進一步熟悉柱色譜操作技術。4．學習蒽醌類化合物鑒定方法。實驗方法大黃總蔥醌苷元的提取犬貧粗務(100^)攻浴叵流4hr,過鴻，就冒濾液體積二戟渣 範倉提戴液＜^450ml)注意：①大黃中的蔥醌類成分大部分與糖結合，以蔥醌的形式存在于植物組織中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿、苯及乙醚等有機溶劑，用苯時應注意苯蒸氣的揮發(fā)，嚴防中毒；②所得的氯仿液中如帶有酸水液，應該用分液漏斗分出棄去，并用蒸餾水回洗一次除去酸性以免影響梯度萃取。氯仿提取液放置中如有沉淀析出，可濾取之，該沉淀多為大黃素，余液進行下一步分離試驗用。總蒽醌苷元分離方案的設計大黃總蒽醌苷元的紙色譜蒽醌類成分的緩沖紙色譜試驗最佳萃取劑及其用量的確定蒽醌類成分各種萃取劑用量的確定新分離方法的設計蒽醌類成分的分離與精制大黃酸的分離與精制將含有總游離蔥醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中，加PH8緩沖液275ml振搖萃取，靜置至徹底分層，放出氯仿液后，到出堿水液至置250ml燒杯中，加HCI酸化至PH=3，待黃色沉淀析出完全后，過濾、干燥，干燥后的樣品加冰醋酸10ml加熱使溶，趁熱過濾，濾液靜置，析出黃色針晶為大黃酸，過濾即得純品。大黃素的分離與精制將提過大黃酸的氯仿液繼續(xù)移至分液漏斗中，用PH9.9緩沖液275ml振搖萃取，徹底分層后，分出堿水層，并用HCI酸化至PH=3，析出棕黃色沉淀，過濾，沉淀經(jīng)干燥后，用10ml冰醋酸加熱使溶，趁熱過濾，析出橙色大針晶，過濾后，即得大黃素純品。蘆薈大黃素的分離和精制余下氯仿液移至分液漏斗后，加5%NaCO3:5%NaOH(9:1)堿水液540ml或用0.5%KOH540mI振搖萃取，堿水液加HCl酸化，析出的沉淀過濾干燥，用10ml乙酸乙酯重結晶，得黃色針晶的蘆薈大黃素純品。大黃酚和大黃素甲醚的分離--磷酸氫鈣柱色譜4．蒽醌類成分的鑒定1)紙色譜鑒定2)IR光譜解析本實驗講解要點及注意事項pH梯度萃取的原理及注意事項。如何設計萃取分離方案的程序與方法。蒽醌化合物紅外光譜的特點。分離萃取時一定注意乳化層的分出，不要混入，并且每步最好用新鮮CHCI3,回洗堿水液。緩沖液的配制和堿液的配制要準確，嚴格注意檢查。每步萃取時，利用紙色譜檢查跟蹤萃取效果，如未達到預想效果應及時糾正。大黃可減輕內毒素性低血壓，消除氧自由基，降低再灌注期血漿、肺、小腸等內源性一氧化氮的水平，降低腸、肝、肺毛細血管通透性，減輕內毒素引起的腸壁血管通透性增加，防止腸道細菌移位及內毒素進入血循環(huán)等等。臨床可用于嚴重創(chuàng)傷、感染性休克、MODS等危重病預防及治療胃腸功能衰竭。我們的經(jīng)驗：生大黃30克煎成100ml,灌腸或口服，100ml,l-3次/日，亦可灌腸和口服并用。直到腸鳴音恢復開始減量大黃含有蒽類衍生物、苷類化合物、鞣質類、有機酸類、揮發(fā)油類等。蔥類衍生物分為：⑴游離蔥醌衍生物，如蘆薈大黃素(aloeemodin)、土大黃素(chrysaron)、大黃酚(chrysophanol)、大黃素(emodin)、異大黃素(isoernodin)、蟲漆酸D(laccaicacidD)>大黃素甲醚(physcion)、大黃酸(rhein):⑵結合蔥醌化合物，有大黃酸、蘆薈大黃素、大黃酚的單和雙葡萄糖甙；大黃素、大黃素甲醚的單糖甙；蒽酚和蒽酮化合物：大黃二蒽酮(rheidin)、掌葉二蔥酮(palmidin)以及與糖結合的貳如番瀉貳(sennoside)A、B、C、D、E、F等。苷類化合物：土大黃貳(rhaponticin)、3，5,4'-三羥基芪烯一4'-0-0-D-(6'-O-沒食子酰)葡萄糖貳(3,5，4'-trihydroxy-stilbene一4'-O-0-D-(6'-O-gallayl)-glucoside)、3，5，4'-三羥基茋烯-4'-O-0-D-吡喃葡萄糖貳(3,5，4'-trihydroxystilbene-4'-0-0-D-glucopyranoside）。萘衍生物：torachrysone-8-0-0-D-glucopyranoside,torachrysone-8-（6‘-oxaly）-glucoside及決明松（torachryson）。鞣質類：沒食子酰葡萄糖、d-兒茶素、沒食子酸、大黃四聚素（tetrann）等。大黃四聚苯經(jīng)水解，得沒食子酸、肉桂酸及大黃明（rheosmin）。此外合有樹脂。尚含有有機酸：蘋果酸、琥珀酸、草酸、乳酸、桂皮酸、異丁烯二酸、檸檬酸、延胡紊酸等。大黃中還含有揮發(fā)油、脂肪酸及植物甾醇等。本品橫切面：根木栓層及皮層大多已除去。韌皮部明顯；薄壁組織發(fā)達。形成層成環(huán)。木質部射線較密，寬2?4列細胞，內含棕色物；導管非木化，常1至數(shù)個相聚，稀疏排列。薄壁細胞含草酸鈣簇晶，并含多數(shù)淀粉粒。根莖髓部寬廣，其中常見黏液腔，內有紅棕色物；異型維管束散在，形成層成環(huán)，木質部位于形成層外方，韌皮部位于形成層內方，射線呈星狀射出。粉末黃棕色。草酸鈣簇晶直徑20?160》m,有的至190》m。具緣紋孔、網(wǎng)紋、螺紋及環(huán)紋導管非木化。淀粉粒甚多，單粒類球形或多角形，直徑3?45》m,臍點星狀；復粒由2?8分粒組成。取本品粉末少量，進行微量升華，可見菱狀針晶或羽狀結晶。取本品粉末0.1g，加甲醇20ml浸漬1小時，濾過，取濾液5ml,蒸干加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml,置水浴上加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.1g,同法制成對照藥材溶液。再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法（附錄WB）試驗，吸取上述三種溶液各4》l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以石油醚（30?60°C）-甲酸乙酯-甲酸（155:1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光主斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點，置氨蒸氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色?！緳z查】土大黃苷取本品粉末0.2g，加甲醇2ml,溫浸10分鐘，放冷，取上清液10》l,點于濾紙上，以45%乙醇展開，取出，晾干，放置10分鐘，置紫外光燈（365nm）下檢視，不得顯持久的亮紫色熒光。干燥失重取本品，在105C干燥6小時，減失重量不得過15.0%（附錄IXG）。總灰分不得過10.0%（附錄XK）。酸不溶性灰分不得過0.8%（附錄XK）?！竞繙y定】照高效液相色譜法（附錄WD）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按大黃素峰計算應不低于1500。對照品溶液的制備精密稱取大黃素、大黃酚對照品各5mg，分別置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取大黃素溶液1ml、大黃酚溶液2ml，分別置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（大黃素每1ml中含4》g、大黃酚每1ml中含8》g）。供試品溶液的制備取本品粉末（過四號篩）約O.lg［同時另取本品粉末測定水分（附錄IXH第二法）］，精密稱定，置50ml錐形瓶中，精密加甲醇25ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻濾過，精密量取續(xù)濾5ml，置50ml圓底燒瓶中，揮去甲醇，加2.5mol/L硫酸溶液10ml，超聲處理5分鐘，再加氯仿10ml，加熱回流1小時，冷卻，移置分液漏斗中，用少量氯仿洗滌容器，并入分液漏斗中，分取氯仿層，酸液用氯仿提取2次，每次約8ml，合并氯仿液，以無水硫酸鈉脫水，氯仿液移至100ml錐形瓶中，揮去氯仿，殘渣精密加甲醇10ml，稱定重量，置水浴中微熱溶解殘渣，放冷后，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取上述兩種對照品溶液與供試品溶液各5“l(fā)，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計算，含大黃素（C15H10O5）和大黃酚（C15H10O4）的總量不得少于0.05％。大黃中有多種游離蒽醌及其苷類,總含量約2-5%。主要有大黃酸、大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素、大黃素甲醚以及它們的葡萄糖苷等。從大黃中提取分離游離蒽醌時,先用20%硫酸加熱使苷類水解，保留濾餅，濾餅用乙醚加熱回流提取總蒽醌苷元（游離蒽醌），提取液作TLC鑒識。實驗對象實驗對象實驗對象實驗對象::::大黃濾餅 主要儀器主要儀器主要儀器主要儀器、、、、試劑試劑試劑試劑::::電熱套、圓底燒瓶、冷凝管、乙醚、硅膠薄層板、石油醚乙酸乙酯實驗操作步驟實驗操作步驟實驗操作步驟實驗操作步驟::::總羥基蒽醌苷元的提?。喝「稍餅V餅，放入100ml圓底燒瓶中，加入乙醚50ml,回流提取3-4小時，得乙醚提取液。乙醚提取液經(jīng)薄層層析檢查有大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。薄層板為硅膠G-CMC-Na,展開劑為石油醚（60-90°C）—乙酸乙酯（7：3）,直立展開。 實驗注意事項實驗注意事項實驗注意事項實驗注意事項::::①加熱回流時電熱套電壓小于50v。 ②取石油醚（60-90C）7ml，乙酸乙酯3ml,混合均勻。。③控制點樣量，注意點樣斑點位置。④仔細觀察斑點、溶劑前沿移動距離。后記后記后記后記::::結論：在可見光下可看到4個斑點，Rf最大的黃色斑點為大黃酚和大黃素甲醚的混合物，其

20%H2SO4濾乙酸水層乙酸乙酯層乙酸乙酯層棄掉黃色沉淀粗品大黃素結晶具體操作步余3個斑點依20%H2SO4濾乙酸水層乙酸乙酯層乙酸乙酯層棄掉黃色沉淀粗品大黃素結晶具體操作步大黃素的提取、分離流程圖大黃粗粉30g【4】150ml 加熱1h,抽濾、干燥餅 乙酸乙酯回流提取1h乙酯層 5%NaHCO3萃取紫紅色5%Na2CO3 水層紅色HCl水洗至中性丙酮溶解分離純化驟 1.游離蔥醌的提取稱取大黃粗粉30g加20%H2SO4水溶液150mL加熱1小時放冷抽濾同時濾餅水洗至近中性除去H2SO4 于70°C干燥后置回流裝置中加入乙酸乙酯300mL回流提取1小時得到乙酸乙酯提取液。2.PH梯度萃取分離 1將乙酸乙酯提取液加入分液漏斗中用5%NaHCO3水溶液萃取三次經(jīng)觀察乙酸乙酯層顏色變淺及無氣泡產生為止。2經(jīng)5%NaHCO3水溶液萃取后的乙酸乙酯層繼以5%Na2CO3水溶液萃取三次乙酸乙酯層經(jīng)薄層檢查（標準大黃素作對照）得知已提盡大黃素后合并三次Na2CO3萃取液并用HC1酸化得大黃素沉淀。注意:加酸時應緩慢加入以防酸液溢出。 3.大黃素的精制過濾大黃素沉淀水洗沉淀物至洗出液呈中性用適量丙酮溶解用自備薄層色譜分離純化大黃素。薄層層析板上橙色層為大黃素將其刮下溶于丙酮中?！?】用旋轉蒸發(fā)儀濃縮丙酮溶液得到大黃素結晶。4?大黃素的薄層色譜檢識【5】薄層板硅膠CMC-Na板樣品液自制大黃素溶液對照品標準大黃素溶液展開劑石油醚-乙酸乙酯7 3顯色觀察斑點顏色及計算Rf值五、注意事項1）游離蒽醌的提取要控制溫度不宜太高2）PH梯度萃取分離時要檢查是否萃取完全3）注意堿液濃度及萃取時的靜置時間對實驗結果的影響。、酸水解用天平稱取大黃粉10g,置500ml燒杯中，加20%硫酸水溶液100m1,直火加熱1h,用布氏漏斗抽濾，濾餅水洗后于70度左右干燥。2、總羥基蔥醌苷元的提取濾餅經(jīng)干燥后，置索氏提取器中（（（（預習索氏提取器的預習索氏提取器的預習索氏提取器的預習索氏提取器的結構原理和使用方法結構原理和使用方法結構原理和使用方法結構原理和使用方法、、、、注意事項注意事項注意事項注意事項）））），加入乙醚150ml，回流提取2h，得乙醚提取液。乙醚提取液經(jīng)TLC檢查有大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。薄層板為硅膠CMC-Na板，展開劑為石油醚-乙酸乙酯，展開后在可見光下可看到四個斑點，Rf=0.9的黃色斑點為大黃酚和大黃素甲醚混合物，在此條件下分不開，其余三個斑點，按Rf值由大到小分別為大黃素（橙色斑點）、蘆薈大黃素（黃色斑點）、大黃酸（黃色斑點）。3、pH梯度萃取分離（1）大黃酸的分離與精制將上述乙醚提取液以5%碳酸氫鈉溶液振蕩萃取，水層呈紫紅色。分出水層，再重復萃取數(shù)次，直至不顯紅色為止。合并水層萃取液，用鹽酸酸化至pH3左右，即得黃色沉淀。過濾，先用水洗沉淀數(shù)次，再用少量冰冷的丙酮洗，以除去有色雜質。干燥后以冰醋酸或吡啶結晶2-3次，得黃色針狀結晶。經(jīng)TLC與標準品對照鑒定為大黃酸。（2）大黃素的分離與精制碳酸氫鈉溶液提取后的乙醚層再以5%碳酸鈉溶液振蕩萃取數(shù)次，水層呈紅色，合并水層提取液，加鹽酸至酸性，得黃色沉淀，過濾，用水洗沉淀，以冰冷丙酮洗，在冰醋酸或吡啶中結晶數(shù)次，得橙色大針狀結晶。經(jīng)TLC與標準品對照為大黃素。 （3）蘆薈大黃素的分離和精制 碳酸鈉溶液提取后的乙醚層，再經(jīng)0.25%氫氧化鈉溶液振蕩萃取數(shù)次，水層呈紅色，合并水層，加鹽酸至酸性，得橙色沉淀。過濾后用水洗沉淀，干燥后在冰醋酸或乙酸乙酯中結晶數(shù)次，得橙色長針狀結晶。經(jīng)TLC鑒定為蘆薈大黃素。（4）大黃酚和大黃素甲醚的分離與提純上述萃取后的乙醚層用5%氫氧化鈉溶液振蕩萃取數(shù)次，直至無色。合并深紅色的水層溶液，加鹽酸至酸性，得黃色沉淀。過濾水洗，干燥后得大黃酚和大黃素甲醚混合物，將此混合物溶于乙酸乙酯中，用硅膠柱色譜分離，洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯（15:1）混合液，先洗脫下的化合物為大黃酚，后洗脫下的化合物為大黃素甲醚，再分別經(jīng)乙酸乙酯結晶純化，兩者經(jīng)TLC鑒定皆為純品。、硅膠柱色譜精制大黃素（1）裝柱：取100-200目硅膠約10g，按濕法裝住（2）加樣：將大黃素粗提物溶于5ml石油醚-乙酸乙酯（7:3）混合溶劑中，用吸管吸取樣品溶液于色譜柱床頂端。（3）洗脫：用石油醚-乙酸乙酯（7:3）為洗脫劑洗脫，分段收集，每份10ml，用TLC跟蹤檢查。請大家先預習硅膠柱色譜的濕法和干法裝柱及上樣的相關注意事項請大家先預習硅膠柱色譜的濕法和干法裝柱及上樣的相關注意事項請大家先預習硅膠柱色譜的濕法和干法裝柱及上樣的相關注意事項請大家先預習硅膠柱色譜的濕法和干法裝柱及上樣的相關注意事項（五）注意事項1、酸水解過程中加熱時間應足夠長，以保證水解充分。2、同一堿液萃取分為數(shù)次，以保證萃取充分，可用TLC監(jiān)測。3、乙醚總提取物要用保鮮膜封嚴實，防止乙醚揮發(fā)。（六）實驗報告要求①記錄大黃蒽醌的提取方法及其原理。②比較大黃素、大黃酸、大黃素甲醚的酸性及在TLC中的Rf值（附色譜圖）。 3、儀器及試劑大黃中大黃素的提取、分離和鑒定一一一一、、、、實驗目的與要求實驗目的與要求實驗目的與要求實驗目的與要求 1．熟悉蒽醌類成分的提取分離方法。2．掌握PH梯度提取法的原理和操作技術。3．學習用硅膠柱色譜法分離精制大黃素。4．學習羥基恩醌類化合物的鑒定方法。二二二二、、、、實驗方法實驗方法實驗方法實驗方法（一）、基本原理大黃中羥基葸醌類化合物多數(shù)以苷的形式存在，故先用稀硫酸溶液把蒽醌苷水解成苷元，利用游離葸醌可溶于熱氯仿的性質，用氯仿將它們提取出來。由于各羥基葸醌結構上的不同所表現(xiàn)的酸性不同，用pH梯度萃取法分離它們；大黃酚和大黃素甲醚酸性相近，利用其極性的差別，用柱色譜分離之。（二）操作步驟實驗步驟實驗操作實驗現(xiàn)象和結果總羥基蒽醌苷元的提取1稱取大黃粉3.5g，用濾紙包裹，置索氏提取器中，圓底燒瓶中加入乙醚150m1,回流提取2h,得乙醚提取液。 乙醚提取液為黃色澄清溶液。2點板，展開，展開劑為石油醚-乙酸乙酯（7:3）。硅膠板上可見四個斑點，從上往下依次為黃色斑點、橙色斑點、黃色斑點、黃色斑點。pH梯度萃取分離1大黃酸的分離和提純：將提取液用5%NaHCO3振蕩提取數(shù)次，分出水層，重復提取數(shù)次后合并水層提取液，用鹽酸酸化至pH3,得黃色沉淀。抽濾，水洗沉淀，再用丙酮洗，干燥后待測。水層提取液為呈紫紅色。鹽酸酸化時有大量氣泡生成。酸化后得到黃色沉淀。2大黃素的分離和純化：碳酸氫鈉溶液提取后的乙醚層以5%Na2CO3振蕩提取數(shù)次，分出水層，合并水層提取液，加鹽酸至酸性（pH6左右），得黃色沉淀，抽濾，水洗沉淀，再用丙酮洗，干燥后待測。水層提取液呈紅色。鹽酸酸化后得到黃色沉淀。3蘆薈大黃素的分離和提純：碳酸鈉溶液提取后的乙醚層，用0.25%NaOH振蕩提取數(shù)次，合并水層提取液，加鹽酸至pH約為6,得橙色沉淀。抽濾，水洗沉淀，干燥后待測。水層提取液層紅色。鹽酸酸化后得到橙色沉淀。4大黃酚和大黃素甲醚的分離和提純：將步驟3得到的乙醚層用5%NaOH振蕩提取數(shù)次至無色，合并水層提取液，加鹽酸酸化，得黃色沉淀。抽濾，水洗沉淀，干燥后待測。水層提取液呈深紅色。鹽酸酸化后得到黃色沉淀。三、實驗結果（1）分離與精制大黃酸的過程中得到了黃色的針狀結晶，此結晶就是大黃酸。（2）分離與精制大黃素過程中得到了橙色針狀結晶，此結晶就是大黃素。（3）分離與精制蘆薈大黃素的過程中得到了黃色針晶，這個就是蘆薈大黃素。（4）大黃酚和大黃素甲醚的分離和提純中得到的黃色沉淀為大黃酚和大黃素甲醚的混合物。實訓項目五大黃中游離蒽醌的提取分離及鑒定【實訓目的】1．能夠運用回流提取法對大黃中總蒽醌類化合物進行提取2.能夠熟練運用pH梯度萃取法對大黃中游離蔥醌進行分離。3．正確判斷顯色反應、薄層色譜的結果【實訓原理】大黃中含有大黃素型游離蒽醌及其苷類，本實訓利用大黃中的蒽醌類化合物均可溶于乙醇而提取，根據(jù)游離蒽醌及蒽醌苷在水和乙醚中溶解度的不同采用萃取方法分離。游離蒽醌的分離是利用各羥基蒽醌類化合物酸性不同，采用pH梯度萃取法進行?！緦嵱柌牧稀繄A底燒瓶冷凝管研缽水浴鍋分液漏斗燒杯三角瓶表面皿試管層析缸pH試紙薄層硅膠CMC-Na大黃粗粉95%乙醇乙醚鹽酸三氯甲烷5%KOH5%Na2CO35%NaHCO30.5%NaOH新華色譜濾紙（20cmX7cm）苯-醋酸乙酯（8：2）苯-甲醇（8：1）甲苯氨0.5%醋酸鎂1%大黃酸三氯甲烷溶液1%大黃素三氯甲烷溶液1%蘆薈大黃素三氯甲烷溶液【實訓步驟】1．乙醇總提取物的制備游離蒽醌的提取取大黃粗粉50g,置于500ml圓底燒瓶中，加95%乙醇以約高出生藥面為度，置水浴加熱回流2?3小時，趁熱抽濾。濾渣再以95%乙醇熱提二次，趁熱抽濾后合并三次乙醇提取液。濃縮乙醇提取液，得到乙醇總提取物。2．總游離蒽醌的提取，親脂性成分與親水性成分分離將乙醇總提取物浸膏加水適量混懸，加乙醚150ml于500ml分液漏斗中萃取，充分振蕩后放置，傾出醚層，再加50ml乙醚振搖，放置，傾出醚層，同法操作6次，直至乙醚液呈色較淺時為止，合并乙醚液，乙醚溶液含總游離蒽醌。3．蒽醌單體的分離大黃酸的分離將含有游離蔥醌的乙醚溶液移至250ml的分液漏斗中，加5%NaHCO3水溶液20m1,振搖