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生物選修一——生物技術(shù)實(shí)踐總復(fù)習(xí)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第1頁。課題1果酒和果醋的制作課題2腐乳的制作課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量專題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第2頁。一、果酒制作1、酵母菌:4、流程:選果→沖洗→榨汁→發(fā)酵→酒精2、原理:5、檢驗(yàn):酸性條件酒精遇重鉻酸鉀呈灰綠色真菌、異養(yǎng)兼性厭氧型、繁殖最適溫度20℃C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶(1)前期需O2(2)后期不需O23、發(fā)酵條件:18℃~25℃高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第3頁。二、果醋制作1、醋酸菌:2、原理:

(1)氧氣、糖源都

:醋酸菌將葡萄汁中的

分解成

。(糖制醋)(2)氧氣充足、糖源不足:醋酸菌將

→乙醛→

。(酒變醋)果酒制作果醋的反應(yīng)式為:

。充足糖醋酸乙醇醋酸C2H5OH+O2CH3COOH+H2O3、條件:

最適溫度為30℃~35℃,需要充足的氧氣。4、流程:選果榨汁→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵原核、異養(yǎng)需氧型高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第4頁。思考討論:(1)裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用?(2)為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接?(3)為什么發(fā)酵瓶中只裝入2/3的液體?其目的是先讓酵母菌有氧呼吸快速繁殖,耗盡氧氣后再進(jìn)行酒精發(fā)酵;其次,防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出。充氣口:在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣排氣口:排出發(fā)酵時產(chǎn)生的CO2,以免發(fā)酵瓶爆裂。出料口:用來取樣。排氣管長而彎,可防止空氣中微生物的污染。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第5頁。1.(2010·廣東理綜,25)小李嘗試制作果酒,他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行試驗(yàn)(見圖),恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ牵p選)()高考真題A.加入適量的酵母菌B.一直打開閥b通氣C.一直關(guān)緊閥a,偶爾打開閥b幾秒鐘D.把發(fā)酵裝置放到4℃冰箱中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)AC高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第6頁。三、腐乳制作1、毛霉(主要):讓豆腐長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制2、原理:5、鹽與酒的作用:抑制微生物生長毛霉等產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶分解豆腐成小分子肽、氨基酸、甘油、脂肪酸。3、溫度條件:15℃~18℃真菌、異養(yǎng)需氧型4、流程:高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第7頁。四、泡菜制作1、乳酸菌:3、流程:2、原理:原核、異養(yǎng)厭氧型C6H12O6→2C3H6O3+少量能量酶高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第8頁。4、亞硝酸鹽及其含量測定:(1)測定亞硝酸鹽含量的方法:比色法(2)測定亞硝酸鹽含量的原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅染料,通過目測比較,大致估算其含量。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第9頁。專題2:微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第10頁。一、培養(yǎng)基:1、概念:2、成分

培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。水無機(jī)鹽碳源(提供碳元素的物質(zhì))氮源(提供氮元素的物質(zhì)注意:培養(yǎng)基還需要滿足微生物對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。課題1:微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第11頁。3、類型液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物。例如,在培養(yǎng)基中加入青霉素,以抑制細(xì)菌、放線菌的生長,從而分離到酵母菌和霉菌。又如,在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長,但不影響金黃色葡萄球菌的生長。根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成,用以鑒別不同種類的微生物。例如,在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán),可以用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌:如果有大腸桿菌,其代謝產(chǎn)物就與伊紅和美藍(lán)結(jié)合,使菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第12頁。使用方法結(jié)果常用的方法舉例消毒滅菌較為溫和的物理或化學(xué)方法強(qiáng)烈的理化因素僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法等灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌二、無菌技術(shù)泛指在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防止雜菌污染的方法

高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第13頁。滅菌的方法:back高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第14頁。三、微生物培養(yǎng)技術(shù)(一)實(shí)驗(yàn)操作步驟(以培養(yǎng)大腸桿菌為例):1、制備培養(yǎng)基(1)計(jì)算(2)稱量(3)溶化(注意取出稱量紙)(4)滅菌:高壓蒸氣滅菌鍋,在壓力為100kPa、溫度為121℃,滅菌15~30min。(5)倒平板:待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時,在酒精燈附近倒平板。2d后觀察平板,無雜菌污染才可用來接種。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第15頁。倒平板技術(shù)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第16頁。2、純化大腸桿菌:平板劃線法和稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上將細(xì)菌逐步稀釋或分散成單個細(xì)胞,使其長成單個的菌落,這個菌落就是一個純化的細(xì)菌菌落。*菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。(1)原理:(2)常用接種方法:高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第17頁。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第18頁。菌落高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第19頁。2.稀釋涂布平板的操作方法高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第20頁。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第21頁。四、菌種的保存方法1、臨時保藏:接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基,待長出菌落后放4℃的冰箱保藏2、長期保存:甘油管藏高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第22頁。一、實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理:人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、PH等),同時抑制或阻止其他微生物生長。二、分離能夠分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基:以尿素作為唯一氮源課題2:土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第23頁。三、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目:2、間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。此法的缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌和活菌。1、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。(1)常用方法:(2)原理:稀釋涂布平板法高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第24頁。(3)操作:①設(shè)置重復(fù)組,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力和準(zhǔn)確性。②為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)計(jì)算公式:每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×MC:某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)V:涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml)M:稀釋倍數(shù)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第25頁。四、細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程:土壤取樣

樣品的稀釋取樣涂布微生物的培養(yǎng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)觀察并記錄結(jié)果高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第26頁。一.纖維素與纖維素酶課題3:分解纖維素的微生物的分離1.纖維素纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。2.纖維素酶纖維二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纖維素纖維素酶(復(fù)合酶)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第27頁。二.纖維素分解細(xì)菌的篩選:1.方法:

剛果紅染色法。2.原理:剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。3.優(yōu)點(diǎn):該方法可以通過顏色反應(yīng)直接篩選。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第28頁。三.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落注意:分解纖維素的微生物的分離可用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。(應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第29頁。2.(2013·廣東理綜,6)以下為某興趣小組獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果及其分析,正確的是B

高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第30頁。一、菊花組織的培養(yǎng)1、原理:植物細(xì)胞的全能性2、步驟:(1)制備MS固體培養(yǎng)基(滅菌)無機(jī)鹽、維生素、蔗糖、激素

(2)外植體消毒(未開花新生側(cè)枝)

(3)接種(4)培養(yǎng)(5)移栽(6)栽培專題3植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)條件:PH5.8、溫度18-22、每日光照12h高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第31頁。3、過程:根、芽(胚狀體)4、不同植物激素使用順序和使用量使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長素,后細(xì)胞分裂素先細(xì)胞分裂素,后生長素同時使用生長素/細(xì)胞分裂素結(jié)果比值高時比值低時比值適中有利于分裂但不分化細(xì)胞既分裂也分化分化頻率提高

有利于根的分化,抑制芽的形成有利于芽的分化,抑制根的形成

促進(jìn)愈傷組織生長高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第32頁。二、月季花藥培養(yǎng)1、花藥選?。?、花粉發(fā)育檢查:(1)醋酸洋紅法(細(xì)胞核紅色)(2)焙花青-鉻礬法(細(xì)胞核藍(lán)黑色)3、培養(yǎng)過程:花藥中的花粉胚狀體愈傷組織從芽從芽生根移栽脫分化分化再分化誘導(dǎo)花藥中的花粉初花期、未開放花蕾、單核期

注意:兩條途徑之間沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第33頁。一、果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用專題4:酶的應(yīng)用果膠酶可水解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁和胞間層。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第34頁。二、酶的活性與影響酶活性的因素酶活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶活性的高低可以用在一定條件下,酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來表示。酶反應(yīng)速度用單位時間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示。影響酶活性的因素:溫度、PH和酶的抑制劑等條件高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第35頁。二、加酶洗衣粉的洗滌效果1、定義:加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。2、酶制劑:用特殊化學(xué)物質(zhì)包裹酶,使之耐酸堿、耐高溫、忍受表面活性劑3、酶制劑的種類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶,其中效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶4、作用:分解污漬(蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、纖維素)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第36頁。三、固定化酶1、原理:2、高果糖漿生產(chǎn):(1)原理:(2)固定化酶:(3)生產(chǎn)過程:把酶固定在顆粒狀的載體上,易于催化回收、重復(fù)使用葡萄糖異構(gòu)酶葡萄糖果糖酶固定在載體上、裝入反應(yīng)柱上端注入葡萄糖,柱內(nèi)酶催化,下端生產(chǎn)果糖漿高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第37頁。固定化酶和固定化細(xì)胞是利用理化方法,把酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)發(fā)揮作用的技術(shù)。四、固定化細(xì)胞2、方法:(1)包埋法:包埋在多孔載體里(2)化學(xué)結(jié)合法:結(jié)合到載體上(3)物理吸附法:吸附到載體表面1、概念:注意:一般來說,酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第38頁。

3、固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞活化:1g干酵母+10ml水(2)配制CaCl2溶液:0.05mol/L(3)配海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸鈉+10ml水(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合成A液(吸入注射器)(5)固定化酵母細(xì)胞:把A液滴入CaCl2形成凝膠珠(6)沖洗凝膠珠(蒸餾水)(7)酒精發(fā)酵:凝膠珠+葡萄糖液→酒精(25度)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第39頁。專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第40頁。一、DNA的粗提取與鑒定(一)實(shí)驗(yàn)原理

1.血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。2.DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同,在0.14mol/L的氯化鈉溶液中的溶解度最低。利用這一原理,可使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

3.DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

4.DNA遇二苯胺(沸水浴)會變成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第41頁。(二)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)材料的選取選用DNA含量相對較高的組織(如雞血細(xì)胞)2、破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液動物細(xì)胞:加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液植物細(xì)胞:需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第42頁。3、除去濾液中的雜質(zhì)原理:方案一:(高中實(shí)驗(yàn)室較常用)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同。過程:利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)。具體做法是:在濾液中加入NaCl

,使NaCl溶液濃度為2mol/L,過濾除去不溶的雜質(zhì),再加入蒸餾水調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度為0.14mol/L,析出DNA,過濾去除溶液中的雜質(zhì),再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。方案二:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應(yīng)10-15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。方案三:將濾液放在60-75℃的恒溫水浴箱中保溫10-15min,注意嚴(yán)格控制溫度范圍。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第43頁。4、DNA的析出與鑒定與濾液體積相等的冷卻的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)95%),靜置2-3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物

——粗提取DNA。1、DNA的析出2.DNA的鑒定試劑:條件:二苯胺(現(xiàn)配現(xiàn)用)沸水浴條件下,

DNA遇二苯胺被染成藍(lán)色沸水浴現(xiàn)象:高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第44頁。①DNA模板;②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物;③四種脫氧核苷酸;④耐高溫的DNA聚合酶;⑤控制溫度,但不需解旋酶;⑥緩沖溶液二、PCR技術(shù)1、反應(yīng)條件:高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第45頁。變性退火(復(fù)性)延伸3’5’3’5’3’3’3’3’3’3’3’3’5’5’5’5’5’5’5’5’2、過程:(1)變性:95℃DNA解旋為單鏈(2)復(fù)性:55℃引物與模板配對(3)延伸:72℃合成子鏈注意:DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第46頁。三、血紅蛋白的提取和分離1、分離方法:(1)凝膠色譜法(分配色譜法)原理:

根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第47頁。不同蛋白質(zhì)通過多孔凝膠通道時:→大分子路程短、流動快→先收集→小分子路程長、流動慢→后收集高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第48頁。(2)電泳法

②原理:

利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小,形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。①概念:帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。高中生物選修一復(fù)習(xí)ppt全文共53頁,當(dāng)前為第49頁。2、血紅蛋白的提?。悍炙牟剑簶悠诽幚怼⒋址蛛x、純化和純度鑒定樣品處理和粗分離:

(1)紅細(xì)胞的洗滌:生理鹽水--除雜蛋白

(2)血紅蛋白的釋放:蒸餾水--40%甲苯(3)分離血紅蛋白溶液:離心分層

第3層紅色透明液體,是血紅蛋白的水溶液。

(4)透析:除去樣

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