第二節(jié)發(fā)酵罐及發(fā)酵工程應用實例演示文稿

第二節(jié)發(fā)酵罐及發(fā)酵工程應用實例演示文稿目前一頁\總數(shù)二十六頁\編于七點優(yōu)選第二節(jié)發(fā)酵罐及發(fā)酵工程應用實例目前二頁\總數(shù)二十六頁\編于七點排管傳熱氣通式發(fā)酵罐

機械攪拌通氣式發(fā)酵罐又稱為通用式發(fā)酵罐，是工業(yè)上最常用的一種微生物反應器。

通氣式發(fā)酵罐的主要優(yōu)點是：發(fā)酵液的pH值和溫度易于控制；適合連續(xù)培養(yǎng)。①優(yōu)點②缺點⑴通氣式發(fā)酵罐

通氣式發(fā)酵罐的主要缺點是：設備結構復雜，難以清洗；在絲狀菌的培養(yǎng)過程中，細胞易受損傷。目前三頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑵自吸式發(fā)酵罐

自吸式發(fā)酵罐不需要空壓機供應壓縮空氣，它是利用攪拌器旋轉時產生的負壓吸入空氣。

攪拌與供空氣均由機械攪拌器完成，省去空壓機。①優(yōu)點

吸程不高，須采用低阻力高效空氣除菌裝置，對無菌要求高的發(fā)酵不適應；由于空氣在攪拌時直接進入發(fā)酵罐，故對厭氧菌的發(fā)酵不適應。②缺點目前四頁\總數(shù)二十六頁\編于七點一、KRH-PJ發(fā)酵罐系列產品基本性能發(fā)酵罐的控制是液晶觸摸屏操作界面，PLC控制器。該設備對溫度、攪拌轉速、PH值、DO值、消泡、多路補料、加酸、加堿、壓力、通氣量等參數(shù)實時測量和自動控制。兩種市售機械攪拌發(fā)酵罐二、30BS-100JS-3000發(fā)酵罐罐體材料——不銹鋼。

攪拌系統(tǒng)——采用上懸掛強磁力攪拌系統(tǒng)，無機械密封不易泄漏，底部無頂針罐底磁力攪拌?？刂葡到y(tǒng)——自動、手動。泡沫控制——全自動PID測控與報警，蠕動泵自動添加消泡劑。目前五頁\總數(shù)二十六頁\編于七點2.鼓泡式發(fā)酵罐

鼓泡式發(fā)酵罐是借助鼓入空氣而提供混合與傳質所需的功率。排氣排料進料進料空氣

鼓泡式發(fā)酵罐的結構如右圖所示，空氣與培養(yǎng)液由下部鼓入罐體，并以分散系通過篩板鼓泡。

鼓泡式發(fā)酵罐結構簡單，造價低，動力消耗較小，避免了機械攪拌因軸封不嚴帶來的雜菌污染，減小了對絲狀菌培養(yǎng)過程中的細胞易受損傷。鼓泡式發(fā)酵罐一般較適用于，培養(yǎng)液粘度低、固含量低、需氧量較低的發(fā)酵過程。目前六頁\總數(shù)二十六頁\編于七點3.液體循環(huán)式發(fā)酵罐

氣升式發(fā)酵罐與鼓泡式發(fā)酵罐相似，不設機械攪拌，但在罐外設體外循環(huán)管，或在罐內設導流筒（拉力筒）。

氣升式發(fā)酵罐結構簡單，造價低，動力消耗較小，避免了機械攪拌因軸封不嚴帶來的雜菌污染，減小了對絲狀菌培養(yǎng)過程中的細胞易受損傷。氣升式發(fā)酵罐一般較適用于，粘度低、固含量低的培養(yǎng)液。⑴氣升環(huán)流式發(fā)酵罐排氣排料進料空氣排氣排料進料空氣目前七頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑵噴嘴環(huán)流式發(fā)酵罐

噴嘴環(huán)流式發(fā)酵罐采用機械泵引射壓縮空氣，在噴嘴處形成剪切力場，將射入的空氣在液相中分散為小氣泡。這些小氣泡在罐內開始會積聚出較大的氣泡，通過環(huán)流后將重新分散，從而加快了傳質速率。

與機械攪拌式發(fā)酵罐相比，在同樣耗能的前提下，噴嘴環(huán)流式發(fā)酵罐的氧傳質速率要高得多。與氣升式發(fā)酵罐比較，噴嘴環(huán)流式發(fā)酵罐的適用氛圍相對較廣。排氣排料進料空氣外循環(huán)支路噴嘴目前八頁\總數(shù)二十六頁\編于七點一、光照氣升式發(fā)酵罐KRH-WQ發(fā)酵罐系列產品基本性能發(fā)酵罐的控制是光照氣升式反應器采用外循環(huán)，由罐體和外掛式提升管組成，在提升管內置為冷光源的光照系統(tǒng)，光照時間可根據(jù)工藝要求而定。該設備配有多個發(fā)酵罐專用標準接口，如pH接口、DO接口、溫控接口、接種口、消泡報警口等。兩種市售氣升式發(fā)酵罐二、氣升內環(huán)流發(fā)酵罐AIF發(fā)酵罐系列產品特點：氣流攪拌，剪切力小，特別適用于霉菌菌絲體和動植物細胞等剪切敏感體系的純培養(yǎng)。無機械密封，具有可靠的抗污染密封性能。目前九頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑶連續(xù)管道發(fā)酵器

連續(xù)管道發(fā)酵器有多種多樣，可以是直管也可以是蛇管。培養(yǎng)液和種子液不斷流入發(fā)酵器進行發(fā)酵。連續(xù)管道發(fā)酵器主要用于厭氧發(fā)酵。種子罐管道發(fā)酵器培養(yǎng)液種子液目前十頁\總數(shù)二十六頁\編于七點資料卡片1.抗生抗生是生物之間的一種相互關系，即一種生物通過分泌化學物質來抑制、排斥另一種生物的現(xiàn)象。此現(xiàn)象主要發(fā)生于微生物之間，也見于某些植物和動物。

2.抗生素抗生素是指由微生物（包括細菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中，所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物，能干擾或抑制其它生物活細胞發(fā)育功能的化學物質。二、發(fā)酵工程應用實例1.抗生素的發(fā)酵生產問題：什么是抗生(antibiosis)？什么是抗生素(antibiotics)？目前十一頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑴抗生素的種類

抗生素的種類繁多（目前已知天然抗生素不下萬種）。從合成的角度來看，抗生素可簡單地分為天然品和人工合成品，前者由微生物代謝產生的，后者是對天然抗生素進行結構改造獲得的部分合成產品。

例如：由真菌產生的抗生素——青霉素。青霉素－CH2－C－NH－OONCOOHCH3CH3S氨芐青霉素－CH－C－NH－OONCOOHCH3CH3SNH2目前十二頁\總數(shù)二十六頁\編于七點孢子制備種子罐（一級）種子罐（二級）種子培養(yǎng)25℃40-45h種子培養(yǎng)25℃13-15h種子種子制備發(fā)酵的上游工程發(fā)酵發(fā)酵罐（一級）發(fā)酵罐（二級）發(fā)酵罐（三級）22－26℃40－45h發(fā)酵13－15h發(fā)酵液放罐過濾pH=5.015℃濾液萃取萃取液濃縮、脫色結晶、干燥青霉素鹽（產品）醋酸丁酯（BA萃取液）發(fā)酵的下游工程（提煉）①工藝流程菌種黃青霉素冷凍管斜面母瓶大米孢子孢子培養(yǎng)25℃6-7天孢子培養(yǎng)25℃6-7天成熟孢子⑵青霉素的發(fā)酵生產目前十三頁\總數(shù)二十六頁\編于七點

基質濃度在分批發(fā)酵過程中，常因前期基質量濃度過高，對生物合成酶系產生阻遏（或抑制）或對菌絲生長產生抑制（如葡萄糖和錢的阻遏或抑制，苯乙酸的生長抑制）；而后期基質濃度低限制了菌絲生長和產物合成，為了避免這一現(xiàn)象，在青霉素發(fā)酵中通常采用補料分批操作法，緩慢流加基質以維持一定的最適濃度。在基質流加中特別注意的是葡萄糖的流加。因為葡萄糖即使是超出最適濃度范圍較小的波動，都將引起嚴重的阻遏或限制，使生物合成速度減慢或停止。由于目前糖濃度的檢測尚難在線進行，故葡萄糖的流加不是依據(jù)糖濃度控制，而是間接根據(jù)pH值、溶氧或C02釋放率予以調節(jié)?！净|濃度】①工藝控制

在青霉素發(fā)酵工程中，其主要工藝控制因素有基質濃度、溫度、pH值和溶氧等。目前十四頁\總數(shù)二十六頁\編于七點

青霉素發(fā)酵的最適溫度隨所用菌株的不同可能稍有差別，但一般認為應在25℃左右較好。溫度過高將明顯降低發(fā)酵產率，同時增加葡萄糖的維持消耗，降低葡萄糖至青霉素的轉化率。【溫度】

對于好氧的青霉素發(fā)酵來說，溶氧濃度是影響發(fā)酵過程的一個重要因素。當溶氧濃度降到30%飽和度以下時，青霉素產率急劇下降；低于10%飽和度時，則造成不可逆的損害。當溶氧濃度過高，說明菌絲生長不良或加糖率過低，造成呼吸強度下降，同樣影響生產能力的發(fā)揮?！救苎酢?/p>

青霉素發(fā)酵的最適pH值一般認為在6.5左右較好，有時也可以略高或略低一些，但應盡量避免pH>7.0。因為青霉素在堿性條件下不穩(wěn)定，容易加速其水解?！緋H值】目前十五頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑶紅霉素的發(fā)酵生產①紅霉素

紅霉素是由紅色鏈霉菌（Streptomyceserythreus）所產生的大環(huán)內酯（macrolide）系的代表性的抗生素。其抗菌譜主要是部分革蘭陰性桿菌，與青霉素同屬于窄譜抗生素（NarrowSpectrumAntibiotics）。紅霉素HCH3H3CHH3COHOHOHHOH3COHC2H5OHCH3HHHCH3CH3N(CH3)2OHOOOCH3H3COOHOCH3

紅霉素分子中含有一個大環(huán)內酯作為配糖體，并以糖苷鍵和2個分子的糖相連。其中糖的二甲胺基顯堿性。多氧大環(huán)內酯目前十六頁\總數(shù)二十六頁\編于七點②生產工藝流程菌種紅色鏈霉菌孢子制備發(fā)酵液種子種子制備發(fā)酵孢子制備種子制備溫度：37℃培養(yǎng)基：淀粉、(NH4)2SO4、NaCl、CaCO3、玉米漿、瓊脂pH=7.0－7.2培養(yǎng)基：花生餅粉、蛋白凍、(NH4)2SO4、淀粉、葡萄糖溫度：33－35℃發(fā)酵培養(yǎng)基：黃豆餅粉、玉米漿、淀粉、葡萄糖、(NH4)2SO4、CaCO3、KH2PO4pH=6.5－7.2有氧發(fā)酵目前十七頁\總數(shù)二十六頁\編于七點菌種紅色鏈霉菌孢子培養(yǎng)發(fā)酵液種子種子培養(yǎng)發(fā)酵發(fā)酵液處理甲醛ZnSO4調酸堿度pH=8.0NaOH過濾過濾液材料的預處理層析醋酸丁酯BA萃取液離心分離乳酸鹽沉淀過濾洗滌濕晶體干燥<55℃H2OpH=7-8產品（紅霉素堿）目前十八頁\總數(shù)二十六頁\編于七點2.氨基酸的發(fā)酵生產

氨基酸(aminoacid)是指，含有“氨基”和“羧基”一類有機化合物的通稱，是蛋白質的基本組成單位，是構成動物營養(yǎng)所需蛋白質的基本物質。例如：在氨基酸分子中，氨基為堿性基團，羧基為酸性基團。天然氨基酸均為α－氨基酸。NH2R—CH—

COOHα－氨基酸NH2R—CH—CH2—

COOHβ－氨基酸⑴氨基酸

我們知道，生物大分子的各種蛋白質在生命活動中表現(xiàn)出的各種各樣生理功能，主要取決于蛋白質中氨基酸的組成。目前，我們所知道的天然氨基酸有300多種，其中人體所需的氨基酸有22種。根據(jù)人體所需氨基酸的情況，常將其分為必須氨基酸和非必須氨基酸兩類。目前十九頁\總數(shù)二十六頁\編于七點⑵谷氨酸的生產

谷氨酸非必須氨基酸，是生物機體內氮代謝的基本氨基酸之一，在代謝上具有重要意義。在醫(yī)學上主要用于治療肝性昏迷；另外谷氨酸作為神經(jīng)中樞及大腦皮質的補劑，對于治療腦震蕩或神經(jīng)損傷、癲癇以及對弱智兒童均有一定療效。①谷氨酸（L-GLU）HOOC—CH2—CH2—CH—COOHNH2

谷氨酸鈉是由鈉離子與谷氨酸根離子形成的鹽，是食品工業(yè)調味料味精的主要成分，也是雞精的重要成分。HOOC—CH2—CH2—CH—COONaNH2谷氨酸鈉晶體目前二十頁\總數(shù)二十六頁\編于七點淀粉液化（水解）α－淀粉酶水解液糊精、低聚糖糖化（水解）糖化酶糖化液（葡萄糖）

發(fā)酵法生產谷氨酸一般采用淀粉或糖蜜，我國大多數(shù)廠家是采用淀粉為原材料。在發(fā)酵法工藝中，幾乎所有的氨基酸產生菌都不能直接利用淀粉或糊精，需對淀粉進行水解處理。淀粉的水解可采用酸解法或酶解法。目前，國內外廠家多以酶解法為主。其流程如下：【淀粉的糖化】85℃，pH=6.060℃，24h

過去氨基酸都是從蛋白質水解液中分離提取。自1965年日本采用發(fā)酵法生產谷氨酸后，發(fā)酵法生產氨基酸逐步取代了傳統(tǒng)的水解法工藝，使得發(fā)酵法在氨基酸生產中占主導的地位。②生產工藝流程目前二十一頁\總數(shù)二十六頁\編于七點【菌種擴大培養(yǎng)及發(fā)酵】發(fā)酵30-37℃，30h發(fā)酵液北京棒桿菌斜面培養(yǎng)32℃，18-24h菌種一級種子培養(yǎng)32℃，12h二級種子培養(yǎng)32℃，7-10h★斜面培養(yǎng)基蛋白胨、牛肉膏、NaCl、瓊脂；

pH=7.0-7.2★一級種子培養(yǎng)基

葡萄糖、玉米漿、尿素、KH2PO4、MgSO4、Fe2(SO4)3及MnSO4；

pH=6.5－6.8★二級種子培養(yǎng)基

糖化液(葡萄糖)、玉米漿、尿素、KH2PO4、MgSO4、Fe2(SO4)3及MnSO4；

pH=6.5－6.8（振蕩）（通氣、攪拌）目前二十二頁\總數(shù)二十六頁\編于七點谷氨酸發(fā)酵液丙酮酸北京棒桿菌菌種擴大培養(yǎng)淀粉酶解糖化液EMP酵解菌種接種三羧酸循環(huán)谷氨酸脫氫酶轉氨基發(fā)酵★EMP酵解在細胞漿內所發(fā)生的，由葡萄糖直接分解為丙酮酸的過程。該途徑又稱Embden-Meyerhof-Parnus途徑，簡稱EMP酵解?！锶人嵫h(huán)由乙酰CoA和草酰乙酸縮合成檸檬酸，檸檬酸經(jīng)一系列反應，再氧化脫羧，經(jīng)α-酮戊二酸、琥珀酸，再降解成草酰乙酸。HOOOOOHα－酮戊二酸HOOOOHNH2谷氨酸脫氫酶NH4+谷氨酸目前二十三頁\總數(shù)二十六頁\編于七點三羧酸循環(huán)示意圖α-酮戊二酸+NH4+

谷氨酸谷氨酸脫氫酶NADH+H+NAD+目前二十四頁\總數(shù)二十六頁\編于七點【谷氨