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文檔簡介
項目六氨基酸的分析與檢驗任務(wù)二谷氨酸的測定
■谷氨酸是一種酸性氨基酸。分子內(nèi)含兩個羧基,化學(xué)名稱為α-氨基戊二酸,俗名又叫麩酸?!鲇絮r味,微溶于水,而溶于鹽酸溶液,等電點為3.22。■L-谷氨酸的用途廣泛,它本身作為藥品,能治療肝昏迷癥,也可用來生產(chǎn)味精、食品添加劑、香料和用于生物化學(xué)的研究。
■檢測方法主要有旋光法、滴定法、比色法和色譜法等任務(wù)二谷氨酸的測定一、旋光法測定谷氨酸含量
1.原理
谷氨酸是一種酸性氨基酸,由于其分子結(jié)構(gòu)中含有一個不對稱碳原子,具有光學(xué)活性(即旋光性),能使偏振光面旋轉(zhuǎn)一定角度,故可以采用旋光儀測定其旋光度,然后根據(jù)旋光度換算成谷氨酸的含量。
2.試劑與儀器1.試劑
■
鹽酸谷氨酸樣品蒸餾水等2.儀器■
旋光儀(精度±0.10),備有鈉光燈(鈉光譜D線589.3nm)、天平容量瓶燒杯玻璃棒等
一、旋光法測定谷氨酸含量3.操作步驟1.試液的制備
稱取樣品10g,精確至0.0001g,置50mL燒杯中,加水20mL,在攪拌下加入鹽酸16.5mL,待谷氨酸全部溶解后移人100mL容量瓶中,沖洗燒杯的洗液并入容量瓶中。待溶液冷卻至20℃時,定容至100mL,混勻。用濾紙過濾,收集濾液。若試液顏色較深,可加入活性炭0.1g(以糖蜜為原料顏色很深時,最多可加入活性炭0.3g),攪拌脫色。用濾紙過濾,棄去前5mL濾液,收集其余濾液作為試液。2.測定
在恒溫室(20℃)里,先用標(biāo)準(zhǔn)旋光角校正儀器,然后將上述試液置于旋光管中(不得有氣泡),觀測其旋光度,同時記錄旋光管中試液的溫度。一、旋光法測定谷氨酸含量4.結(jié)果計算X——樣品中谷氨酸含量(%)α——實測試液的旋光度(0)L——旋光管長度(即液層厚度)(dm)c——1mL試液中含谷氨酸的質(zhì)量(g/mL)32.00——谷氨酸的比旋光度[α]20D(O)t——測定時試液的溫度(℃)0.06——溫度校正系數(shù)20——標(biāo)準(zhǔn)溫度(℃)計算結(jié)果精確至1位小數(shù)一、旋光法測定谷氨酸含量5.結(jié)果記錄測定次數(shù)測定內(nèi)容123實測試樣液的旋光度(0)旋光管長度(即液層厚度)(dm)1mL試液中含谷氨酸的質(zhì)量(g/mL)測定時試液的溫度(℃)樣品中谷氨酸含量(%)樣品中谷氨酸含量平均值(g/100mL)相對平均偏差(%)一、旋光法測定谷氨酸含量6.注意事項
◆同一樣品測定結(jié)果,相對平均偏差不得超過0.3%
◆由于樣品準(zhǔn)備時使用濾紙過濾或加活性炭脫色后過濾,會造成c偏大,影響α的值,
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