2023學(xué)年完整公開課版形態(tài)學(xué)檢查

項目十二：形態(tài)學(xué)檢查知道細(xì)菌培養(yǎng)物染色標(biāo)本檢查方法學(xué)會對細(xì)菌培養(yǎng)物進(jìn)行不染色標(biāo)本的檢查學(xué)會暗視野顯微鏡的使用方法問題導(dǎo)入問題1：尿液標(biāo)本在血平板上長出圓形、光滑、濕潤、灰白色略扁平的菌落，怎樣進(jìn)行后續(xù)檢測呢？問題2：糞便標(biāo)本在SS瓊脂上長出無色小菌落，疑似志賀氏菌，用怎樣一個簡單的方法大致判斷呢？學(xué)習(xí)內(nèi)容針對不同的可疑培養(yǎng)物選擇正確的細(xì)菌形態(tài)檢查方法,明確形態(tài)學(xué)檢查在細(xì)菌鑒定中的意義。運(yùn)用革蘭染色或抗酸染色檢查細(xì)菌的形態(tài)。用暗視野顯微鏡、明視野顯微鏡檢查細(xì)菌動力。

培養(yǎng)物的染色檢查標(biāo)本分離培養(yǎng)后觀察生長現(xiàn)象,進(jìn)行染色檢查：標(biāo)本培養(yǎng)物革蘭染色抗酸染色革蘭染色一般需氧、厭氧、CO2培養(yǎng)后，取培養(yǎng)物涂片、革蘭染色鏡檢。革蘭染色結(jié)果G+球菌G－球菌革蘭染色結(jié)果G–桿菌G+鏈球菌抗酸染色取培養(yǎng)物涂片（略厚）→干燥→固定石炭酸復(fù)紅加溫染色8～10min后，水洗3%的鹽酸酒精脫色約1～2min，脫色時輕搖玻片，直到涂片顏色脫去為止，水洗用堿性美藍(lán)復(fù)染1min→水洗印干→油鏡觀察結(jié)果抗酸染色結(jié)果培養(yǎng)物的不染色標(biāo)本檢查1.懸滴法2.壓滴法3.暗視野顯微鏡觀察法方法動力觀察有鞭毛菌壓滴法取生理鹽水1滴于載玻片中央，挑取少許菌落或菌苔于鹽水中磨勻（或直接挑一環(huán)增菌液），取潔凈的蓋玻片一張，輕輕覆蓋其上，置顯微鏡下觀察。懸滴法取生理鹽水1滴于蓋玻片中央，挑取少許菌落或菌苔于鹽水中磨勻（或直接挑1~2環(huán)增菌液），取潔凈的抹有少許凡士林的凹玻片一張，翻轉(zhuǎn)蓋玻片輕輕覆蓋其上，置顯微鏡下觀察。暗視野顯微鏡檢查法光學(xué)顯微鏡的一種，是在顯微鏡中裝入特殊的暗視野聚光器。經(jīng)暗視野聚光器后，照明光線不能直接進(jìn)入物鏡，而是形成傾斜的光線通過標(biāo)本，標(biāo)本的像是由標(biāo)本散射和反射的光線形成的。暗視野顯微鏡形成的像，背景是黑暗的，像是亮的，由于反差的增大，提高了分辨率，所以適合于觀察有鞭毛的細(xì)菌等。使用時應(yīng)注意聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)大于物鏡的數(shù)值孔徑，以確保照明光線不進(jìn)入物鏡內(nèi)。暗視野顯微鏡數(shù)碼暗視野顯微鏡倒置暗視野顯微鏡標(biāo)本增菌或分離培養(yǎng)后應(yīng)該進(jìn)行什么檢查？常用染色檢查有哪些？不染色檢查的方法有哪些？暗視野檢查法怎樣做？甘曉玲，微生物學(xué)檢驗［M