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實(shí)驗(yàn)五、數(shù)量遺傳實(shí)驗(yàn)五、數(shù)量遺傳/NUMPAGES22實(shí)驗(yàn)五、數(shù)量遺傳實(shí)驗(yàn)五、數(shù)量遺傳專業(yè)班級(jí):生物2班 學(xué)號(hào):20120322234 姓名:劉顯號(hào)同組人:關(guān)德紅、林星龍、莽斌、李玉圣、楊伏東、郄凱鑫、榿正富實(shí)驗(yàn)日期:2014年04月23日——2014年05月11日 平均室溫:28.7 平均大氣壓:81.27Kpa實(shí)驗(yàn)五:果蠅數(shù)量性狀遺傳一、目的1、以果蠅腹片著生的小剛毛為對(duì)象,研究數(shù)量性狀遺傳的特點(diǎn)。2、記錄交配結(jié)果和學(xué)習(xí)估算統(tǒng)計(jì)遺傳學(xué)基本參數(shù)—遺傳率。3、進(jìn)一步熟練的掌握雌雄果蠅的鑒別方法。4、學(xué)會(huì)飼養(yǎng)果蠅,掌握果蠅的雜交技術(shù)。二、原理2.1、性狀:性狀是指生物的形態(tài)結(jié)構(gòu),生理特征,行為習(xí)慣等具有的各種特征。生物體的性狀有質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀之分。質(zhì)量性狀指屬性性狀,即能觀察而不能量測(cè)的性狀,是指同一種性狀的不同表現(xiàn)型之間不存在連續(xù)性的數(shù)量變化,而呈現(xiàn)質(zhì)的中斷性變化的那些性狀。它由少數(shù)起決定作用的遺傳基因所支配,在表面上這類性狀顯示的差別,如角的有無(wú)、毛色、血型、遺傳缺陷、花藥、籽粒、穎殼等器官的顏色、芒的有無(wú)、絨毛的有無(wú)等稱為質(zhì)量性狀。質(zhì)量性狀較穩(wěn)定,不易受環(huán)境條件上的影響,它們?cè)谌后w內(nèi)的分布是不連續(xù)的,雜交后代的個(gè)體可明確分組。質(zhì)量性狀的遺傳可以較容易地由分離定律和連續(xù)定律來(lái)分析。指的是是指在一個(gè)群體內(nèi)的各個(gè)體間表現(xiàn)為連續(xù)變異的性狀,如動(dòng)植物的高度或長(zhǎng)度等。數(shù)量性狀較易受環(huán)境的影響,在一個(gè)群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的差異一般呈連續(xù)的正態(tài)分布,難以在個(gè)體間明確地分組,也就是說(shuō)所有能夠度量的性狀都可成為數(shù)量性狀。這些性狀呈連續(xù)變異。這些性狀呈連續(xù)變異,它不可以嚴(yán)格地分類,而是呈現(xiàn)出一系列程度上的差異,帶有這些差異的個(gè)體沒有質(zhì)的差別,只有量的不同。數(shù)量性狀表型的連續(xù)性是下列兩個(gè)現(xiàn)象的結(jié)果。第一:一種基因型并不只表達(dá)為一種表型,而是影響一組表型的表現(xiàn)。其結(jié)果模糊了基因型所決定的不同表型之間的差異,因而不能將一個(gè)特定的表型歸屬于一個(gè)特定的基因型。第二:許多不同基因座的等位基因都能使某一種被觀察的表型發(fā)生改變,許多不同的基因型可能有相同的表現(xiàn)型。在生物中凡是可數(shù)、可度、可衡等并可用數(shù)字形式描述的性狀,稱數(shù)量性狀。如果蠅的身體大小、生長(zhǎng)速度、小剛毛數(shù)量的多少等,這樣的性狀都是數(shù)量性狀,可用某種尺度來(lái)測(cè)量并可用數(shù)字形式來(lái)描述,一個(gè)顯示數(shù)量性狀的個(gè)體,其表型是受到多個(gè)不同等位基因的作用,而每個(gè)基因?qū)Ρ硇偷呢暙I(xiàn)很小,但相關(guān)的基因數(shù)目很多,其表型也受到環(huán)境因素的影響,數(shù)量性狀的變異由可遺傳的變異和不可遺傳的變異組成,數(shù)量性狀大都由多基因控制,控制同一性狀的基因數(shù)目很多,而每個(gè)基因的作用很小,并且很容易受環(huán)境影響。群體的表型變量通常呈連續(xù)分布。對(duì)影響數(shù)量性狀的單個(gè)等位基因的分離,以及用普通遺傳學(xué)方法去追查各個(gè)基因的行為都是困難的,因此通常不能用孟德爾的分析方法進(jìn)行分析,而是用數(shù)理統(tǒng)計(jì)的方法來(lái)進(jìn)行分析。本實(shí)驗(yàn)用野生型黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)剛毛數(shù)量作為數(shù)量性狀的研究。2.2、遺傳率遺傳率是指基因型方差(VG)占表型總方差(Vp)的比值,它是衡量基因型變異和表型總變異相對(duì)程度的遺傳統(tǒng)計(jì)量。遺傳率反映了通過(guò)表型值預(yù)測(cè)基因型值的可靠程度,表明了親代變異傳遞到子代的能力。同時(shí)也可以作為考查親代與子代相似程度的指標(biāo)。由于導(dǎo)致群體表現(xiàn)型產(chǎn)生變異的遺傳原因可以進(jìn)一步區(qū)分為由遺傳主效應(yīng)產(chǎn)生的普通遺傳變異和由基因型×環(huán)境互作效應(yīng)產(chǎn)生的互作遺傳變異,故遺傳率可以分解為普通遺傳率和互作遺傳率兩個(gè)分量。在多基因遺傳中,遺傳因素所起的作用稱為遺傳率,一般采用百分比來(lái)表示。遺傳率是一個(gè)統(tǒng)計(jì)概率,只能運(yùn)用于群體而不能用于個(gè)體,遺傳率有廣義遺傳率和狹義遺傳率之分廣義遺傳率=普通遺傳率廣義遺傳率是指由遺傳主效應(yīng)引起的那部分遺傳率,一般指基因型方差占表現(xiàn)型方差的比率。狹義遺傳率=互作遺傳率狹義遺傳率是指計(jì)算基因的相加效應(yīng)的方差VA在總的表型方差中所占百分率。記作:狹義遺傳率=相加的遺傳方差/表型方差=相加的遺傳方差/(相加的遺傳方差+顯性的遺傳方差+環(huán)境方差),一般指累加方差占表現(xiàn)型方差的比率。但不管是廣義遺傳率還是狹義遺傳率都涉及方差,方差是反映觀察數(shù)同平均數(shù)之間的變異程度。觀察數(shù)同平均數(shù)之間的偏差越大,方差就越大,也就是觀察的離散度大,其分布范圍廣;方差小,則表示各個(gè)觀察值之間比較接近。方差可用變數(shù)同平均數(shù)之間偏差的平均平方來(lái)表示。記作:S2,如寫成公式則是:S2=∑(X—ˉX)2/n需要注意的是,公式中的分母n,只限于平均數(shù)是由理論假定的時(shí)候才適用。如果平均數(shù)是從實(shí)際觀察數(shù)計(jì)算出來(lái)的時(shí)候,則分母應(yīng)該是(n-1)。對(duì)于某些受多基因系統(tǒng)支配,在表現(xiàn)為連續(xù)變異性狀的遺傳處理上,遺傳率是一項(xiàng)極為重要的數(shù)量指標(biāo),尤其是狹義的遺傳率,現(xiàn)已成為進(jìn)行選擇育種時(shí)的基礎(chǔ)數(shù)量指標(biāo)。這是因?yàn)樵谌后w的個(gè)體變異中可以求出其哪些變異能夠傳給子代,其遺傳可能的百分率究竟有多少等(即為可遺傳率的百分率),也就是說(shuō),進(jìn)行人工選擇時(shí),所獲得的遺傳獲得量ΔG,可以用選擇差數(shù)i乘以遺傳率h2來(lái)求出。估算遺傳率的方法有二:一是應(yīng)用子代對(duì)于親本的回歸法;一是應(yīng)用方差分析,求得基因型方差及其中各個(gè)組分后,再進(jìn)行估算遺傳率。除上述之外,還可以用選擇差數(shù)i除人工選擇過(guò)程中實(shí)際獲得的遺傳獲得量,即ΔG/i,此稱為現(xiàn)實(shí)遺傳率,本次實(shí)驗(yàn)主要是采用標(biāo)準(zhǔn)選擇差數(shù)法來(lái)估算遺傳率。三、材料與方法3.1、材料:黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)。3.2、儀器設(shè)備:雙筒解剖鏡,恒溫培養(yǎng)箱,天平,培養(yǎng)瓶,麻醉瓶,毛筆、白瓷板,放大鏡,棉花,鑷子,大燒杯,電爐,玻璃棒,鐵架臺(tái),漏斗,膠管,無(wú)數(shù)錐形瓶。3.3、試劑:乙醚、玉米粉、瓊脂、葡萄糖、酵母粉、丙酸。3.4、方法:找一些塑料瓶或者不用的水杯,在里面放上爛的香蕉或者菠蘿,并將其放在垃圾堆或者水果攤處(盡可能的放在向陽(yáng)的地方),到第二天中午的時(shí)候再去用熟料袋或者紗布蓋住瓶口將瓶子取走。果蠅培養(yǎng)基配制:先計(jì)算所要的量,然后制定配方:A:糖6.2克,加瓊脂0.62克,再加水40ml煮沸溶解;B:玉米粉8.25克,加水40ml,加熱攪拌均勻,再加0.7克酵母粉;A和B混合加熱成糊狀后,加0.5ml丙酸,即可分裝到培養(yǎng)瓶中。2厘米,在培養(yǎng)基中插入一張消過(guò)毒的干燥硬紙片,以擴(kuò)大果蠅的活動(dòng)場(chǎng)所;將培養(yǎng)瓶置入高溫高壓滅菌鍋內(nèi),以121℃,1.5大氣壓消毒30分鐘;滅菌完成后,待滅菌鍋內(nèi)壓力降至常壓后開啟鍋蓋使其半開,再以滅菌鍋干燥培養(yǎng)瓶之棉塞30分鐘,完成后取出使其冷卻備用;待培養(yǎng)基冷卻后,用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。因?yàn)槠坷镉辛朔e水,移入的果蠅容易淹死或粘?。幌劝雅囵B(yǎng)瓶中的老果蠅全部除去,收集10小時(shí)之內(nèi)羽化出來(lái)的新果蠅,麻醉后用放大鏡在百瓷板上將果蠅雌雄分開,這時(shí)得到的雌果蠅應(yīng)該全部都是處女蠅。可以在每天晚上22:00~23:00將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的成蠅殺死,次日早晨8:00~9:00對(duì)新羽化出的果蠅進(jìn)行挑選,將選擇出來(lái)的果蠅分開培養(yǎng)。所用的麻醉瓶可直接用干凈的培養(yǎng)瓶,或用廣口瓶代替。用左小指與無(wú)名指夾取麻醉瓶瓶塞。在瓶塞滴加數(shù)滴乙醚。取果蠅培養(yǎng)瓶輕拍瓶壁,使果蠅震落在瓶底。再用左手無(wú)名指與中指夾取培瓶塞.培養(yǎng)瓶口與麻醉瓶口對(duì)接輕拍上方的培養(yǎng)瓶將果蠅落到麻醉瓶里。然后迅速蓋好兩個(gè)瓶塞,半分鐘左右,果蠅被麻醉,活動(dòng)緩慢,注意麻醉不得過(guò)度,如果果蠅兩翅展開且肢體僵硬.說(shuō)明已致死。因此,必須抓緊時(shí)間移人新培養(yǎng)瓶中.可將培養(yǎng)瓶橫臥,用干凈毛筆把果蠅挑入,待果蠅清醒后.再豎立加塞,防止果蠅粘在培養(yǎng)基上。將挑出來(lái)的處女蠅和雄果蠅各50只分別放在載玻片上,用顯微鏡觀察其雌雄果蠅腹部第四和第五腹板上的剛毛數(shù),并記錄下來(lái)。(注意:取果蠅進(jìn)行觀察時(shí)要隨機(jī)的挑選)。在6個(gè)雜交瓶上貼上標(biāo)簽,標(biāo)明雜交親本,雜交日期、實(shí)驗(yàn)人姓名,進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn),且在每個(gè)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分別加入8只雌雄果蠅進(jìn)行如下雜交:(不用進(jìn)行正反交實(shí)驗(yàn))(1)、剛毛數(shù)多的果蠅與剛毛數(shù)多的果蠅雜交;(2)、剛毛數(shù)多的果蠅與剛毛數(shù)少的果蠅雜交;(3)、剛毛數(shù)多的果蠅與剛毛數(shù)中間的果蠅雜交;(4)、剛毛數(shù)少的果蠅與剛毛數(shù)少的果蠅雜交;(5)、剛毛數(shù)中間的果蠅與剛毛數(shù)少的果蠅雜交;(6)、剛毛數(shù)中間的果蠅與剛毛數(shù)中間的果蠅雜交。F1代成蟲混雜。再過(guò)4-5天,F(xiàn)1成蠅出現(xiàn)。四、結(jié)果與分析4.1、結(jié)果表1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總結(jié)果雌(20只)雄(20只)平均方差平均方差親代35.65.4927.4511.73子代(F1)向多的方向選擇(H)向少的方向選擇(L)37.754.1226.41.4833.91.9922.752.76由表1數(shù)據(jù)得到2ΔG=-=1/2x(37.75+26.4)─1/2x(33.9+22.75)=3.75ΔG=1.875Vp=1/6x(5.49+4.12+1.99+11.73+1.48+2.76)=4.595σp=(Vp)1/2=(4.595)1/2=2.144表2選擇標(biāo)準(zhǔn)差(i)的理論值選擇強(qiáng)度群體大小10203050∞0.11.5391.6381.6741.7051.7550.21.2701.3321.3541.3721.4000.31.0651.1101.1261.1391.1590.40.8930.9280.9410.9510.9660.50.7390.7670.7770.7860.798本實(shí)驗(yàn)是從20只中取出2只時(shí),選擇強(qiáng)度為0.1,根據(jù)上表得到理論值i=1.638。由此計(jì)算本實(shí)驗(yàn)的遺傳率:H2=ΔG/σpiH2=1.875/2.144x1.638=0.5344.2、分析1)中向多方向選擇的雌果蠅剛毛數(shù)比向少方向選擇的雄果蠅剛毛數(shù)平均多出15左右。另外,在果蠅小剛毛數(shù)的統(tǒng)計(jì)中,我認(rèn)為親代表現(xiàn)的離散度比較適中,但在子代中都趨于密集,只有極個(gè)別個(gè)體的小剛毛數(shù)與其他的果蠅明顯不同,這或許是環(huán)境因素都比較適宜而且具有明確的選擇方向而導(dǎo)致的。但通過(guò)對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析,我認(rèn)為本實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)還是可行的。五、討論與結(jié)論5.1、經(jīng)過(guò)與各小組的討論,我們發(fā)現(xiàn),要得到更有說(shuō)服力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)我們還應(yīng)改善以下兩點(diǎn):(1)從F2代開始觀察雌雄果蠅不同個(gè)體的小剛毛數(shù),因?yàn)榭紤]到F1代還未完全出現(xiàn)性狀分離,故從F2代開始計(jì)數(shù)。(2)應(yīng)該拉大實(shí)驗(yàn)的規(guī)模,多做幾組實(shí)驗(yàn)可以減小誤差。5.2、結(jié)論:果蠅的數(shù)量性狀的變異由可遺傳的變異和不可遺傳的變異組成,而且控制同一數(shù)量性狀的基因數(shù)目很多,而每個(gè)基因的作用很小,并且很容易受環(huán)境影響的論點(diǎn)??傮w來(lái)說(shuō),本實(shí)驗(yàn)是成功的,數(shù)據(jù)也與預(yù)期數(shù)據(jù)相符合,具有一定的參考價(jià)值。六、作業(yè)1、什么是性狀,數(shù)量性狀與質(zhì)量性狀的區(qū)別與聯(lián)系?試述二者的遺傳學(xué)本質(zhì)?二者的研究方法有什么區(qū)別?

答:數(shù)量性狀(quantitativecharacters)是指在一個(gè)群體內(nèi)的各個(gè)體間表現(xiàn)為連續(xù)變異的性狀,如動(dòng)植物的高度或長(zhǎng)度等。數(shù)量性狀較易受環(huán)境的影響,在一個(gè)群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的差異一般呈連續(xù)的正態(tài)分布,難以在個(gè)體間明確地分組。數(shù)量性狀大都由很多基因支配,其中每個(gè)基因的作用很小,但有關(guān)的基因數(shù)目很多,又受到環(huán)境的影響,所以它們的表型呈連續(xù)分布。

數(shù)量性狀與質(zhì)量性狀的聯(lián)系

控制數(shù)量性狀的微效多基因。與控制質(zhì)量性狀的主基因都在染色體上,都符合遺傳的基本規(guī)律,二者既有區(qū)別又互相聯(lián)系。主要表現(xiàn)在:

①遺傳性狀的分布有連續(xù)的和不連續(xù)的。表現(xiàn)不連續(xù)分布的性狀稱為質(zhì)量性狀,表現(xiàn)連續(xù)分布的性狀稱為數(shù)量性狀。數(shù)量性狀的差異不能象區(qū)別質(zhì)量性狀一樣用文字來(lái)描述,它只能用數(shù)字加上計(jì)量單位如克、厘米、升等表示,數(shù)字大小之間沒有明確的界限,而只能是人為的加以分組.

②支配數(shù)量性狀或質(zhì)量性狀的基因數(shù)目不同。支配質(zhì)量性狀的是單對(duì)基因,而支配數(shù)量性狀的則是多對(duì)基因(一般在10對(duì)以上),因此數(shù)量性狀的雜種后代其基因型的分離比較復(fù)雜,需用數(shù)量統(tǒng)計(jì)的方法從基因的總效應(yīng)上進(jìn)行分析。

③數(shù)量性狀或性狀的區(qū)分并不是絕對(duì)的。如上面的實(shí)驗(yàn)中,小麥的籽粒有紅色和白色,紅色籽粒的紅色程度隨顯性基因數(shù)目的多少而有差別,因此紅粒與白粒雜交,子二代分離為紅粒與白粒。

2、試述果蠅麻醉的操作過(guò)程,如何判斷果蠅已麻醉死亡?

答:麻醉果蠅:對(duì)果蠅進(jìn)行觀察,檢查時(shí),用乙醚麻醉,使其暫時(shí)處于昏迷狀態(tài),以便于操作,先取下麻醉瓶塞,滴幾滴乙醚于麻醉蕊的棉花上(注意不要讓乙醚流進(jìn)瓶?jī)?nèi)),麻醉瓶要保持干燥,否則會(huì)粘住果蠅翅膀,影響觀察,再將果蠅的培養(yǎng)瓶手掌上震幾下,使果蠅落在培養(yǎng)瓶底部,然后迅速打開培養(yǎng)瓶的棉塞,把果蠅倒入去蓋的麻醉瓶中,并立即蓋好麻醉瓶,待果蠅全部昏迷后,倒在白瓷板上進(jìn)行觀察。本實(shí)驗(yàn)時(shí)如不熟練,一次麻醉計(jì)測(cè)20只是有困難的,所以分幾次麻醉,把計(jì)測(cè)過(guò)的果蠅放入指管,每管一只,這樣做也是可以的。用三乙基胺時(shí),麻醉時(shí)間長(zhǎng),這是方便之處,但也要注意,不要麻醉過(guò)頭

果蠅的麻醉程度視實(shí)驗(yàn)要求而定,對(duì)仍須培養(yǎng)的果蠅以輕度麻醉為宜,但對(duì)不再培養(yǎng),單單進(jìn)行性狀觀察的果蠅,可以深度麻醉,甚至死也不妨(果蠅翅膀外展45o角,說(shuō)明已死亡)。檢查完畢后,把不需要的果蠅倒入盛有煤油或酒精的瓶中。

3、試述本學(xué)期所完成的所有遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)之間的內(nèi)在聯(lián)系。答:本學(xué)期我們所完成的實(shí)驗(yàn)有果蠅形態(tài)以及生活史的觀察、果蠅的單因子實(shí)驗(yàn)、果蠅的雙因子實(shí)驗(yàn)、果蠅的伴性遺傳、果蠅的數(shù)量性狀遺傳,在這幾個(gè)實(shí)驗(yàn)中我們所用的材料都是果蠅,有長(zhǎng)翅黑腹果蠅、黑檀體、殘翅果蠅、白眼果蠅等多種果蠅進(jìn)行雜交試驗(yàn),都是從果蠅的遺傳方面進(jìn)行研究,從顏色、眼色、體型、翅型、剛毛數(shù)等多種性狀。這些實(shí)驗(yàn)都是以遺傳為基礎(chǔ)來(lái)展開的實(shí)驗(yàn)。而且有幾個(gè)是驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。果蠅已有哪些數(shù)量性狀?選擇其中的某一數(shù)量性狀,寫出一個(gè)你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。答:果蠅的數(shù)量性狀有身體大小、生長(zhǎng)速度、重量等。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):一、目的:以果蠅的身體大小為對(duì)象,研究數(shù)量性狀的遺傳特點(diǎn)。二、原理:數(shù)量性狀是指?jìng)€(gè)體間的表現(xiàn)成聯(lián)系變異,很難明確分組,需要用度量等方式來(lái)描述的性狀。數(shù)量性狀的變異由可遺傳的變異和不可遺傳的變異組成,數(shù)量性狀大都由多基因控制,控制同一性狀的基因數(shù)目很多,而每個(gè)基因的作用很小,并且很容易受環(huán)境影響。三、材料與方法3.1、材料:黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)。3.2、儀器設(shè)備:雙筒解剖鏡,恒溫培養(yǎng)箱,天平,培養(yǎng)瓶,麻醉瓶,毛筆、白瓷板,放大鏡,棉花,鑷子,大燒杯,電爐,玻璃棒,鐵架臺(tái),漏斗,膠管,無(wú)數(shù)錐形瓶。3.3、試劑:乙醚、玉米粉、瓊脂、葡萄糖、酵母粉、丙酸。3.4、方法3.4.1、收集野生果蠅3.4.2、把果蠅的雜交而得的F2成蠅,隨機(jī)選出處女蠅和雄蠅各20只,用乙醚適度麻醉,在40倍顯微鏡下測(cè)出果蠅身體大小,裝入小指管里貼上標(biāo)簽。3.4.3、分別從上述20只果蠅中選出身體最大和最小的♀、♂蠅各2只。3.4.4、把最大的♀、♂各1只配成一雜交組合,次大的♀、♂各1只配成一雜交組合(作備用),最小的♀、♂各1只配成另一組合,次少的♀、♂各1只再配成一雜交組合(作備用)。3.4.5、把配好的雜交組合,培養(yǎng)3-4天,把親本倒去。3.4.6、培養(yǎng)兩周后,把所有成蟲倒出試管中進(jìn)行麻醉,分別測(cè)出大小,做好記錄并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。把所得的數(shù)據(jù)分組,確定組距。把親代和子代♀、♂兩組數(shù)字,分別以果蠅身體大小(組距)為橫坐標(biāo),頻數(shù)為縱坐標(biāo)繪制頻度分布圖。計(jì)算實(shí)現(xiàn)遺傳率:H2=ΔG/σpi3.4.10、根據(jù)實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果,作數(shù)量性狀遺傳的詳細(xì)分析。七、參考文獻(xiàn)1.洪亢亢.PINK1對(duì)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制的研究.桂林醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文,20132.賈丹丹.氯化鋰對(duì)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型的保護(hù)作用研究.中南大學(xué)博士學(xué)位論文,20123.豐

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