大規(guī)模篩查實驗室策略 山西省臨床檢驗中心 馬斌國

大規(guī)模篩查實驗室策略山西省臨床檢驗中心

馬斌國（2021.9.

日下午）目

錄疫情發(fā)生時，為何要進行大規(guī)模人群篩查？如何做好大規(guī)模人群篩查工作大規(guī)模人群篩查時實驗室檢測策略疫情發(fā)生時，為何要進行大規(guī)模人群篩查？傳染病實現(xiàn)傳播的必要條件：傳染源、傳播途徑和易感者切斷傳播的有效措施：控制傳染源、切斷傳播途徑和保護易感者（疫苗）大規(guī)模人群篩查的目的：迅速發(fā)現(xiàn)隱藏的傳染源并加以控制，從而切斷疫情傳播鏈，控制疫情如何做好大規(guī)模人群篩查?成立指揮中心組織、協(xié)調(diào)、調(diào)配、統(tǒng)一采樣信息化采樣運送檢測采送檢匹配如何做到采送檢匹配？

有些采用還有胍鹽等滅活病毒同時可穩(wěn)定RN

的采樣容器，可在冷藏和室溫（

2

℃）運送及保存至4

小時。

一般人群篩查標(biāo)本，則可在4℃保存24小時

2

小時內(nèi)無法檢測的標(biāo)本則應(yīng)置于-7

℃或以下保存（如無

7

℃保存條件，則于

2

℃冰箱暫存）。首先了解清楚擬開展大規(guī)模核酸篩查地區(qū)的核酸檢測能力（管/2

小時）再次了解標(biāo)本的保存要求，篩查實驗室的保存能力，檢測能力，避免大量樣本積壓。2021年9月8日9時20分5核酸檢測基地（1000

管

日）公共檢測實驗室(1000

管

日)市域（500

管

日）大規(guī)模篩查實驗室承擔(dān)大規(guī)模核酸臨時改造縣域篩查的機構(gòu)、資源（100

管

日）第三方檢測機構(gòu)氣模實驗室火眼實驗室體育館會展中心空間較大的基地外援人員、平臺會議室改造空地、輔助配套設(shè)施移動方艙確保檢測人數(shù)在50

萬以內(nèi)的在

天內(nèi)、檢測人數(shù)大于50

萬的在

天內(nèi)完成全員檢測。我省具備大規(guī)模核酸篩查的機構(gòu)統(tǒng)計委直、市檢測基地公共實驗室大規(guī)模篩查實驗室3311112委直、委管太原市大同市朔州市忻州市晉中市陽泉市呂梁市運城市臨汾市長治市晉城市合計3（縣域）3（縣域）（共1000管

日）6（縣域）3（縣域）（共1000

管

日）1111（縣域）13（縣域）8（市域1+縣域7）111（共1000

管

日）120737第三方檢驗機構(gòu)：

個（500

管

日）

個（100

管

日）發(fā)生疫情時，大規(guī)模核酸篩查，可采用10:

或5:

混采技術(shù)每日完成

萬管（單管為

萬人份，

混

為

萬人份，1

混

為1

萬人份）所需要準(zhǔn)備的檢測能力人員：數(shù)量（4

人）、分配（檢測人員2

人，輔助人員1

人）、可調(diào)動的人員空間：一區(qū)（20

）：二區(qū)（40

）

三區(qū)（40m

）、預(yù)留空間（臨時改造）設(shè)備:

檢測平臺：提取儀、(9

?

臺

臺

、擴增儀(9

?

1

臺~1

臺)提速設(shè)備：分杯系統(tǒng)、排槍（多通道加樣器）、混勻器、9

孔板離心機等生物安全柜：A

（

臺~

臺）可調(diào)動的設(shè)備物資：試劑：按照混采或單采準(zhǔn)備相應(yīng)數(shù)量的常規(guī)試劑，另外準(zhǔn)備

種敏感度更高的擴增區(qū)域與常規(guī)試劑不同的復(fù)核試劑。耗材：擴增版、吸頭（包括加長型）、試管架、消殺用品等防護用品：按

套

天

人配置

天用量，應(yīng)按人員體型配置不同型號。后勤：電力、供水、生活、應(yīng)急處置、生活保障等大規(guī)模人群篩查實驗室的檢測策略崗位合理設(shè)置

檢測保證質(zhì)量信息系統(tǒng)暢通記錄表格簡略應(yīng)急處置及時環(huán)節(jié)無縫對接檢測流程清晰人員操作熟練崗位設(shè)置合理標(biāo)本接收區(qū)（BSL

）參

考制定拒收標(biāo)準(zhǔn)、接收、清點雙簽字標(biāo)本接收輔助人員人

班標(biāo)本接收、前處理信息錄入、標(biāo)本分揀、震蕩混勻、暫時保存標(biāo)本前處理試劑準(zhǔn)備試劑耗材儲存、試劑配制檢測人員

人

班檢測人員

人

班篩查實驗室崗位2

標(biāo)本檢測標(biāo)本處理及暫存、加樣提取、加樣擴增核酸擴增標(biāo)本制備擴增分析結(jié)果報告檢測人員

人

班（與試劑準(zhǔn)備區(qū)共用）滅菌、醫(yī)療廢物存放間輔助人員人員人醫(yī)廢處理高壓滅菌、醫(yī)療廢物存放環(huán)節(jié)無縫對接速度！效率！提取移液工作站手工分液分液系統(tǒng)手工加樣分杯系統(tǒng)加樣方法

提取速度提取、加樣滿足擴增試劑配制滿足擴增混勻、加樣滿足提取核酸提?。?~

臺）核酸擴增試劑準(zhǔn)備標(biāo)本前處理結(jié)果分析結(jié)果報告（10~1

臺）標(biāo)本接收標(biāo)本采集PC

反應(yīng)體系冷藏保存時間不宜太長檢測流程清晰人員操作熟練首次進入基地參加大規(guī)模篩查的檢測人員應(yīng)在短時間內(nèi)

熟悉文件

熟悉流程

熟悉設(shè)備分杯系統(tǒng)分液系統(tǒng)

實戰(zhàn)訓(xùn)練檢測保證質(zhì)量質(zhì)量保證檢測系統(tǒng)室內(nèi)質(zhì)控室間質(zhì)評內(nèi)部比對1

應(yīng)依據(jù)檢測系統(tǒng)的要求選擇病毒采樣管2

提取試劑與提取儀及擴增試劑與擴增儀應(yīng)匹配3

初檢試劑盡量選擇含內(nèi)源性內(nèi)標(biāo)，且敏感度≤500cp/m

的試劑盒，以控制采樣、提取及擴增全過程。復(fù)檢試劑選擇敏感度更高擴增區(qū)域不同的試劑盒。4

應(yīng)對檢測系統(tǒng)進行性能驗證（確認(rèn)：選擇高水平質(zhì)控品或標(biāo)物梯度稀釋，重復(fù)測定2

次，確認(rèn)檢測下限與重復(fù)性）1

每批檢測至少有

份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的1.

-倍）、

份陰性質(zhì)控品（生理鹽水）。1

按時參加國家或省臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)評或盲樣考核活動；應(yīng)按要求開展不同人員，不同平臺或不同檢測系統(tǒng)間的比對工作2

質(zhì)控品隨機放在臨床標(biāo)本中，參與從提取到擴增的全過程。2

室間質(zhì)評應(yīng)按規(guī)定要求上報結(jié)果，錯報、遲報或不報結(jié)果者，按實際上報情況評價。3

為了避免污染，試劑盒中的陽性對照可以不做。信息系統(tǒng)暢通

信息儲存服務(wù)器容量要足夠

防止同一時間大量人群信息采集時出現(xiàn)系統(tǒng)崩潰實驗室信息系統(tǒng)（

）

單采樣本條碼

混采樣本條碼

送檢箱總條碼LI標(biāo)本采集標(biāo)本接收標(biāo)本檢測結(jié)果報告及時反饋單檢混檢快速錄入銜接記錄表格簡略臨床基因擴增檢驗流程記錄表試劑準(zhǔn)備區(qū)（1區(qū)）檢驗日期檢驗項目：擴增儀中保存文件名：檢驗日期：檢驗項目：檢測方法：

定性定量

實驗前

：

打開通風(fēng)設(shè)備冰箱溫度：冷藏室（2~8℃）實驗室溫度：

℃（允許范圍：10~30℃）；實驗室相對濕度：

（允許范圍：30%~70%）實驗中：

實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）℃；

冷凍室（18℃2℃）使用說明：℃1．本記錄表須嚴(yán)格遵循試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴增區(qū)（產(chǎn)物分析區(qū)）單一流向移動，嚴(yán)禁逆向移動。2．各項工作執(zhí)行后，在相應(yīng)敘述前的“”內(nèi)打“”。3．本記錄表最后與相應(yīng)的標(biāo)本接收記錄等歸檔保存于擴增區(qū)的專用文件柜內(nèi)，以備查找。1.儀器設(shè)備使用：超凈工作臺：

正常

不正常按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）操作離心機：

正常

不正常2.PCR試劑配置：PCR試劑來源：（可直接列出有關(guān)廠家名稱

批號：已進行性能驗證或質(zhì)檢

振蕩器：

正常

不正常實驗前準(zhǔn)備各區(qū)壓力合理，準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴增區(qū)（產(chǎn)物分析區(qū)）可以形成空氣單一流向

；是

□

否□本次實驗用量：人份按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制3.其他有關(guān)試劑配制：按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制0.1%含氯消毒液按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制4％NaOH溶液按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯其他：毫升

，剩余量：人份。試劑在有效期內(nèi)

；是

□

否□毫升；毫升；擴增儀、加樣器和溫度計在校準(zhǔn)的有效期內(nèi)；是

□

否□生物安全柜的濾膜在使用有效期內(nèi)

；是

□

否□生物安全柜流入速度，下降速度符合規(guī)定要求；是

□

否□消毒溶液在有效期內(nèi)；是

□

否□毫升；實驗后：按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔超凈工作臺，并進行并進行紫外照射30分鐘以上。按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機，并進行紫外照射30分鐘以上。沖眼器內(nèi)無菌生理鹽水在有效期內(nèi)

；是

□

否□離心管、帶濾芯吸頭已經(jīng)過質(zhì)檢合格是

□

否□按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。操作者：操作者：標(biāo)本制備區(qū)（2區(qū)）擴增及產(chǎn)物分析區(qū)（

區(qū)）3檢驗日期：實驗前檢驗項目：檢測方法：

定性

定量

□

打開通風(fēng)設(shè)備實驗室溫度：實驗室相對濕度：實驗中□實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）℃（允許范圍：10~30℃）；（允許范圍：30%~70%）擴增儀操作：開機自檢及運行正常

按XXX（列出編號）SOP進行編程、參數(shù)設(shè)定將PCR反應(yīng)管順序放入反應(yīng)板架，不足96個時，應(yīng)放在中間以保持平衡及受熱均勻啟動擴增□定量：標(biāo)準(zhǔn)曲線：Slope值：Intercept值:

(-3.58--3.15

)r值：室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果：是否失控：□否

□是填寫室內(nèi)質(zhì)控記錄、繪制濃度對數(shù)值質(zhì)控圖

□（）（）□定性

陰

性

質(zhì)

控

結(jié)果：是否失控：□否

□是

弱陽性質(zhì)控結(jié)果：是否失控：□否

□是CT值：實驗中填寫室內(nèi)質(zhì)控記錄、弱陽性質(zhì)控繪制CT值質(zhì)控圖

□實驗結(jié)果：見所附擴增儀打印結(jié)果?核酸提取及加樣過程：按sop進行實驗后?按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔生物安全柜，并進行并進行紫外照射30分鐘以上實驗后?按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機，并進行紫外照射按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設(shè)備。按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。30分鐘以上。?按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。操作者操作者：應(yīng)急處置及時制定應(yīng)急處置預(yù)案應(yīng)急處置職業(yè)暴露實驗室污染假陽性預(yù)防后勤保障（如供電供水）設(shè)施設(shè)備故障處理物資保障人員調(diào)配標(biāo)本灑溢實驗室溫度、壓力問題處理通過通風(fēng)、各區(qū)嚴(yán)格管理、規(guī)范操作、清潔預(yù)防假陽性協(xié)調(diào)后勤部門啟用備用供電啟動試劑、耗材調(diào)用預(yù)案報告指揮中心協(xié)調(diào)解決配置職業(yè)暴露處理箱與標(biāo)本灑溢處理箱設(shè)備故障處理，備用儀器設(shè)備？假陽性的預(yù)防措施化學(xué)試劑去對擴增產(chǎn)物進行修飾陽性及可疑樣本復(fù)核實驗室管理一般方法除污染源10%次氯酸紫外線照射一次性耗材原始樣本復(fù)查嚴(yán)格分區(qū)控制氣流鈉

溶液尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG)遵循實驗室工作原則帶濾芯的吸頭重取樣本復(fù)查70%乙醇雙試劑雙孔復(fù)核更高靈敏度試劑嚴(yán)格按SOP操作核酸清除劑大小合適的手套