上海市臨床檢驗(yàn)中心 2014年免疫質(zhì)評(píng)會(huì)3.20

2014年免疫質(zhì)評(píng)會(huì)議上海市臨床檢驗(yàn)中心臨床免疫室朱宇清

2013年免疫現(xiàn)場(chǎng)督查發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及對(duì)策

2014年上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理基本內(nèi)容和要求—臨床免疫學(xué)室內(nèi)質(zhì)控存在問(wèn)題

開(kāi)展的項(xiàng)目無(wú)室內(nèi)質(zhì)控，未采取其它相關(guān)的質(zhì)控措施

臨檢中心集中代購(gòu)質(zhì)控品

廠商試劑盒自帶質(zhì)控品

第三方質(zhì)控品

實(shí)驗(yàn)室自制室內(nèi)質(zhì)控存在問(wèn)題

關(guān)于失控分析報(bào)告

失控原因分析不到位

有些未見(jiàn)失控分析報(bào)告關(guān)于開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控的要求

金標(biāo)試紙、斑點(diǎn)滲濾等定性試驗(yàn)，除檢測(cè)裝置的內(nèi)對(duì)照外，每檢測(cè)日或分析批，應(yīng)使用弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控，陰、陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果分別為陰性和陽(yáng)性即表明在控，相反則為失控；

根據(jù)滴度或稀釋度判定陰陽(yáng)性結(jié)果的試驗(yàn)，如凝集試驗(yàn)，每檢測(cè)日或分析批，應(yīng)使用弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控，陽(yáng)性質(zhì)控結(jié)果在均值上下一個(gè)滴度或稀釋度以及陰性質(zhì)控結(jié)果為陰性即為在控，否則為失控。室間質(zhì)評(píng)存在問(wèn)題

沒(méi)有可供參加的室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃的部分檢測(cè)項(xiàng)目（如Tg-Ab和TPO、PCT等），未進(jìn)行比對(duì)或用其他方法驗(yàn)證其結(jié)果的可靠性

室間質(zhì)評(píng)反饋結(jié)果沒(méi)有打印具體項(xiàng)目的回報(bào)表

室間質(zhì)評(píng)不符合的項(xiàng)目無(wú)分析報(bào)告

失控分析報(bào)告無(wú)實(shí)質(zhì)性的糾正措施非統(tǒng)一質(zhì)控項(xiàng)目

1.精密度控制：室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控品來(lái)源（試劑供應(yīng)商、第三方、自制）

每月結(jié)果匯總（均值、S、CV%)

2.正確度控制：

室間質(zhì)評(píng)（衛(wèi)生部、CAP、其他）

實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)（同方法）：樣本至少10例（包括正常和異常樣本），確定比對(duì)結(jié)果的偏倚標(biāo)準(zhǔn)

3.編寫(xiě)SOP、填寫(xiě)表格、保留原始記錄室內(nèi)室間不符合項(xiàng)如何分析整改

書(shū)寫(xiě)錯(cuò)誤：

從儀器輸出的結(jié)果到報(bào)告形式之間，由于抄寫(xiě)、謄寫(xiě)或打印出錯(cuò)引起的錯(cuò)誤；

在實(shí)驗(yàn)室中室間樣本編號(hào)搞錯(cuò)；

在室間結(jié)果遞交表中，錯(cuò)誤輸入了儀器和方法；

單位報(bào)告錯(cuò)誤；

小數(shù)點(diǎn)位數(shù)點(diǎn)錯(cuò)；室內(nèi)室間不符合項(xiàng)如何分析整改

方法學(xué)問(wèn)題：

不合適的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程；

與廠商或試劑準(zhǔn)備或校準(zhǔn)品相關(guān)的問(wèn)題（例如穩(wěn)定性的問(wèn)題等）；

試劑或校準(zhǔn)品批號(hào)間變化；

錯(cuò)誤的校準(zhǔn)品定值；

對(duì)被測(cè)量，方法缺乏足夠的特異性；

對(duì)測(cè)量濃度，方法缺乏足夠的敏感度；

前一個(gè)樣品引起的交叉污染；室內(nèi)室間不符合項(xiàng)如何分析整改

設(shè)備問(wèn)題：

設(shè)備的管道或孔徑被凝塊堵塞；

設(shè)備的吸液針未對(duì)準(zhǔn)；

設(shè)備數(shù)據(jù)處理功能錯(cuò)誤；

設(shè)備設(shè)置錯(cuò)誤；

自動(dòng)加液器沒(méi)有被校到可接受的精密度和正確度范圍；

移液器未校準(zhǔn)到可接受的精密度和正確度范圍；

設(shè)備部件故障，例如，光源、液體流速控制、探測(cè)器；

設(shè)備狀況錯(cuò)誤，例如，環(huán)境、溫度、（水質(zhì)）

；

設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)沒(méi)有按要求執(zhí)行；室內(nèi)室間不符合項(xiàng)如何分析整改

由于操作人員引起的技術(shù)問(wèn)題：

未正確操作設(shè)備或者操作與標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程不一致；

不正確的試劑或校準(zhǔn)品貯存、準(zhǔn)備或處理；

因延遲檢測(cè)引起室間樣品的蒸發(fā)或退變；

未能遵循建議的儀器功能檢查或維修；

移液或稀釋錯(cuò)誤；

校準(zhǔn)錯(cuò)誤；

檢測(cè)結(jié)果的理解錯(cuò)誤；室內(nèi)室間不符合項(xiàng)如何分析整改

室間樣本的問(wèn)題

樣品不正確的貯存、準(zhǔn)備或處理；

室間樣品與患者樣品的差異，例如，基質(zhì)、添加劑、穩(wěn)定劑；

在運(yùn)輸或?qū)嶒?yàn)室貯存過(guò)程中樣品的退化；

低值樣品或者臨界反應(yīng)；

樣品含有的干擾因素（可能存在方法特異性問(wèn)題）；

樣品瓶間的不均一問(wèn)題現(xiàn)場(chǎng)督查發(fā)現(xiàn)的其他問(wèn)題

項(xiàng)目的參考區(qū)間在操作規(guī)程文件和檢測(cè)報(bào)告單上的表述不一致；

部分檢測(cè)項(xiàng)目的定標(biāo)頻率不符合制造商規(guī)定的要求；

無(wú)儀器的校準(zhǔn)操作規(guī)程；

無(wú)儀器打印結(jié)果的檢驗(yàn)項(xiàng)目；

HBsAg的復(fù)檢范圍沒(méi)有按要求設(shè)置如何做好項(xiàng)目的校準(zhǔn)和記錄

制定項(xiàng)目校準(zhǔn)（定標(biāo)）文件，包括校準(zhǔn)品來(lái)源、性質(zhì)、貯存條件、有效期、校準(zhǔn)操作、校準(zhǔn)確認(rèn)等；

對(duì)開(kāi)展的每個(gè)項(xiàng)目根據(jù)廠家的聲明、常規(guī)使用情況、特殊情況（質(zhì)控、維修）等，確定校準(zhǔn)的頻次；

保留每次校準(zhǔn)記錄，包括校準(zhǔn)品名、批號(hào)、輸出的數(shù)據(jù)、校準(zhǔn)結(jié)果等如何做好比對(duì)

做到結(jié)果相對(duì)一致

定性檢驗(yàn)項(xiàng)目在不同的儀器或系統(tǒng)上進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，每年至少做一次比對(duì)實(shí)驗(yàn)。每個(gè)項(xiàng)目應(yīng)選擇至少5份新鮮病人血清（包含高、中、低濃度和陰性），檢測(cè)結(jié)果應(yīng)100％符合，應(yīng)保存比對(duì)實(shí)驗(yàn)的原始記錄如何做好比對(duì)

做到結(jié)果相對(duì)一致

相同的定量檢測(cè)項(xiàng)目在不同的檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)1.用患者樣品進(jìn)行比對(duì)（同方法）。以一種檢測(cè)系統(tǒng)為對(duì)照，另一種為被評(píng)系統(tǒng)，至少檢測(cè)40例樣品

相關(guān)回歸分析：

評(píng)價(jià)：r2≥0.95，b=1.0±0.5，偏倚%應(yīng)在1/2CLIA的允許誤差范圍內(nèi)

配對(duì)t檢驗(yàn)：評(píng)價(jià)：t＜t0.05,f,則兩種檢測(cè)結(jié)果在置信度為95%的情況下，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異如何做好比對(duì)

做到結(jié)果相對(duì)一致2.用患者樣品進(jìn)行比對(duì)（不同方法）。以一種檢測(cè)系統(tǒng)為對(duì)照，另一種為被評(píng)系統(tǒng)，至少檢測(cè)40例樣品。評(píng)價(jià)：r2≥0.95，參考區(qū)間內(nèi)、外樣品，2個(gè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)一致如何做好比對(duì)

做到結(jié)果相對(duì)一致

不同方法的檢測(cè)結(jié)果有較大差異時(shí)，采取的措施：

1.如果臨床對(duì)實(shí)驗(yàn)室同一項(xiàng)目在急診和常規(guī)實(shí)驗(yàn)室報(bào)告不同參考區(qū)間可以接受，在醫(yī)院相關(guān)管理部門(mén)的審核確認(rèn)，并宣貫、公示后，實(shí)驗(yàn)室可以分別報(bào)告；

2.如果臨床只接受一種報(bào)告形式，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加大比對(duì)樣品數(shù)量和頻次，確保相關(guān)方程的穩(wěn)定、可靠，將結(jié)果調(diào)到一致此種情況請(qǐng)注意：對(duì)某些無(wú)法用調(diào)整方法達(dá)到一致的項(xiàng)目，應(yīng)只用一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)檢驗(yàn)儀器校準(zhǔn)程序

根據(jù)參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、制造商建議、儀器工作情況制定各類(lèi)檢驗(yàn)設(shè)備的校準(zhǔn)計(jì)劃，至少包括：

1.校準(zhǔn)有效期：如半年或一年校準(zhǔn)一次，或特殊情況下，如出現(xiàn)故障維修后等進(jìn)行校準(zhǔn)；

2.校準(zhǔn)方：如由計(jì)量、檢定單位、制造商或其授權(quán)單位、本實(shí)驗(yàn)室等；

3.校準(zhǔn)方法：如校準(zhǔn)方提供相關(guān)資料等；

4.驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)等

校準(zhǔn)必須有完整的校準(zhǔn)記錄（包括校準(zhǔn)的原始數(shù)據(jù)和校準(zhǔn)報(bào)告儀器校準(zhǔn)SOP的編寫(xiě)

如酶標(biāo)儀：（1）酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性（漂移）選用492nm波長(zhǎng)，用1.0A的中性濾光片測(cè)定，過(guò)10分鐘后重復(fù)測(cè)定，兩次測(cè)定值之差不應(yīng)超過(guò)±0.005A（2）吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確性選用405、492、620nm波長(zhǎng)，分別用0.5、1.0A的中性濾光片，用專(zhuān)用測(cè)試板代替酶標(biāo)板連續(xù)測(cè)定3次，計(jì)算準(zhǔn)確度（3）吸光度測(cè)定的重復(fù)性分別選用405、492、620nm波長(zhǎng)，在酶標(biāo)板第一排加注空白溶液。第二排加入濃度為200ug/ml的重鉻酸鉀溶液，重復(fù)測(cè)5次。取二排對(duì)應(yīng)的測(cè)定值計(jì)算重復(fù)性?xún)x器校準(zhǔn)SOP的編寫(xiě)(4）酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長(zhǎng)，將0.5、1.0A的中性濾光片分別放入專(zhuān)用測(cè)試板樣本位置中，以空氣為參比，各重復(fù)測(cè)定3次；然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于專(zhuān)用測(cè)試板的同一孔位中，重復(fù)測(cè)3次。計(jì)算線性誤差(5)

測(cè)定速度的檢定選用492nm波長(zhǎng)，放入96孔酶標(biāo)板

進(jìn)行測(cè)定，用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間無(wú)儀器打印結(jié)果的檢驗(yàn)項(xiàng)目

無(wú)儀器打印結(jié)果的檢驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)有原始記錄，記錄信息至少應(yīng)包括檢測(cè)日期、方法、試劑品牌、批號(hào)、有效期、檢驗(yàn)結(jié)果、檢驗(yàn)者HBsAg的復(fù)檢范圍設(shè)置

ELISA檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗HCV、HAV-IgM、抗HEV-IgM檢測(cè)項(xiàng)目臨界狀態(tài)的標(biāo)本均應(yīng)復(fù)檢，復(fù)檢范圍的確定按下列公式計(jì)算：cutoff值×0.7≤樣品測(cè)定值≤cutoff值×3，不得小于此范圍。檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗HCV、HAV-IgM、抗HEV-IgM陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照的A(OD)值應(yīng)符合制造商規(guī)定的要求HBsAg的復(fù)檢范圍設(shè)置

應(yīng)制定化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光、時(shí)間分辨熒光方法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗HCV檢測(cè)項(xiàng)目的臨界狀態(tài)標(biāo)本的復(fù)檢措施，至少應(yīng)遵從制造商推薦的要求，并記錄復(fù)檢結(jié)果，歸檔保存，便于查對(duì)HBsAg的復(fù)檢范圍設(shè)置

實(shí)驗(yàn)室自定復(fù)檢范圍：

歷史數(shù)據(jù)回顧

依據(jù)病人歷史情況

依據(jù)二對(duì)半檢測(cè)的情況2014年上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理基本內(nèi)容和要求臨床免疫專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)項(xiàng)要求

臨床免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室特殊崗位（如HIV初篩、產(chǎn)前篩查、新生兒疾病篩查等）工作人員應(yīng)取得相應(yīng)上崗證。

實(shí)驗(yàn)室特殊項(xiàng)目（如乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗體、艾滋病病毒抗體、梅毒等項(xiàng)目）的檢測(cè)試劑應(yīng)符合國(guó)家的有關(guān)規(guī)定。無(wú)室間質(zhì)評(píng)項(xiàng)目的替代程序

無(wú)能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)與其他實(shí)驗(yàn)室（如其它使用相同檢測(cè)方法的配套系統(tǒng)的同級(jí)別或高級(jí)別醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室）比對(duì)的方式判斷檢驗(yàn)結(jié)果的可接受性。并滿(mǎn)足如下要求：（a）

規(guī)定比對(duì)實(shí)驗(yàn)室的選擇原則；（b）

樣品數(shù)量：至少5份，包括正常和異常水平；（c）

頻率：至少每年2次；（d）

判定標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)有≥80%結(jié)果的偏差<1/2TEa。2014年新增室間質(zhì)評(píng)項(xiàng)目新增室間質(zhì)評(píng)項(xiàng)目：葉酸、VitB12增加質(zhì)控調(diào)查項(xiàng)目肝纖維指標(biāo)（如透明質(zhì)酸（HA），層粘蛋白（LN），III型膠原，IV型膠原）針對(duì)精神衛(wèi)生中心HPLC精神類(lèi)抗抑郁藥物濃度開(kāi)展室間質(zhì)評(píng)流式細(xì)胞白血病免疫表型分型檢測(cè)性激素結(jié)合球蛋白（SHBG），17-羥-孕酮（17-OHP