熒光熒光第三部分演示文稿

熒光熒光第三部分演示文稿目前一頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點（優(yōu)選）熒光熒光第三部分目前二頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點1.和氨基反應(yīng)的目前三頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點fluorescein-5-isothiocyanate(FITC'IsomerI')

MolecularFormula:C21H11NO5S

MolecularWeight:389.38CASNumber/Name:3326-32-7/Spiro(isobenzofuran-1(3H),9'-(9H)xanthen)-3-one,3',6'-dihydroxy-5-isothiocyanato-目前四頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點fluorescein-6-isothiocyanate(FITC'IsomerII')

MolecularFormula:C21H11NO5SMolecularWeight:389.38CASNumber/Name:18861-78-4/Spiro(isobenzofuran-1(3H),9'-(9H)xanthen)-3-one,3',6'-dihydroxy-6-isothiocyanato-目前五頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點4-dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonylchloride(dabsylchloride)

MolecularFormula:C14H14ClN3O2SMolecularWeight:323.80CASNumber/Name:56512-49-3/Benzenesulfonylchloride,4-((4-(dimethylamino)phenyl)azo)目前六頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點RhodamineRed?-X,succinimidylester

MolecularFormula:C37H44N4O10S2MolecularWeight:768.90CASNumber/Name:N/A目前七頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點TexasRed?sulfonylchloride

MolecularFormular:C31H29ClN2O6S2MolecularWeight:625.15CASNumber/Name:82354-19-6/1H,5H,11H,15H-Xantheno[2,3,4-ij:5,6,7-i'j']diquinolizin-18-ium,9-[2(or4)-(chlorosulfonyl)-4(or2)-sulfophenyl]-2,3,6,7,12,13,16,17-octahydro-,innersalt目前八頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點Spectra—TexasRed-BSAconjugate

AbsorptionandfluorescenceemissionspectraoftheTexasRedconjugateofbovineserumalbumin(A-23017)inpH7.0buffer.目前九頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點牛肺動脈內(nèi)皮細胞微絲成像用AlexaFluor430標記抗體實現(xiàn)微絲染色目前十頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點斑馬魚視網(wǎng)膜綠色：AlexaFluor488標記藍色：Hoechst33258染核目前十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點2.和巰基反應(yīng)目前十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點AlexaFluor488C5maleimine目前十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點5-(bromomethyl)fluorescein目前十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點Tetramethylrhodamine-5-maleimide目前十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點AlexaFluor350,488,568：核、微管、特殊蛋白目前十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點3.標記其他基團羥基：蛋白質(zhì)中絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基；糖類目前十七頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點NBD-Cl目前十八頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點目前十九頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點目前二十頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點肼和芳香胺用來標記醛、酮目前二十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點APTSFluorescein-5-thiosemicarbazide目前二十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點九、熒光分析方法常規(guī)熒光分析法三維熒光分析法時間分辨熒光分析法能量轉(zhuǎn)移熒光分析法熒光免疫分析超靈敏技術(shù)（信號放大）目前二十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點1、常規(guī)熒光分析法熒光生成/增敏法熒光猝滅法同步熒光分析法目前二十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點（1）、熒光生成/增敏法

1.待測物本身有熒光，可以直接進行測定

2.待測物沒有熒光或熒光較弱，則反應(yīng)產(chǎn)生熒光衍生物進行測定目前二十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點熒光強度與物質(zhì)濃度的關(guān)系

It=AI0e-kcldI=AI0e-kcx－AI0e-kc(x+dx)

=AI0e-kcx(1－e-kcx)因dxkc很小dI=AI0kce-kcx.dxdF=KdI=KAI0kce-kcxdx液槽中溶液熒光強度F=KAI0kc∫0le-kcxdx=KAI0[1－e-kcl]=AKI0[kcl－(kcl)2/2!+(kcl)3/3!－…]=AKI0kcl[1－kcl/2+(kcl)2/6－…]目前二十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點當kcl≤0.05則括號內(nèi)第二項開始可忽略不計F=AKI0kcl對1cm2吸光截面F=2.3φI0εclA不超過0.05目前二十七頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點（2）、熒光猝滅法待測物沒有熒光，但它可以通過動態(tài)猝滅或靜態(tài)猝滅的過程使一熒光物的熒光猝滅進行測定。

如：O2猝滅芘丁二酸的熒光，用于測定血液中的氧

S2-猝滅熒光素汞的熒光用于測定環(huán)境中石油及天然氣中的痕量硫

目前二十八頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點（3）、同步熒光分析法同步熒光是在同時掃描兩個單色器波長的情況下測繪的熒光光譜，根據(jù)激發(fā)和發(fā)射兩個單色器在同時掃描過程中彼此間所應(yīng)保持的關(guān)系，同步熒光測定可分為三個類型：1．

固定波長同步熒光，在同時掃描過程中使激發(fā)波長和發(fā)射波長彼此保持固定的波長間隔，即λem-λex=常數(shù)。2．

固定能量同步熒光，在同時掃描過程中使激發(fā)波長和發(fā)射波長之間保持一個固定的能量差（1/λex-1/λem）X107=△v=常數(shù)△v表示能量差（cm-1）即激發(fā)和發(fā)射兩個單色器之間保持固定波數(shù)差進行掃描可變角（或可變波長）同步熒光：在同時掃描過程中使激發(fā)和發(fā)射兩個單色器以不同的速率同時進行掃描，目前二十九頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點目前三十頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點同步熒光法優(yōu)點光譜簡化譜帶窄化減小光譜重疊減小散射光的影響目前三十一頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點2、三維熒光分析法目前三十二頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點3、時間分辨熒光分析法目前三十三頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點4、能量轉(zhuǎn)移熒光分析法目前三十四頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點茶葉堿的測定目前三十五頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點HIV的測定HIVprotease檢測原理目前三十六頁\總數(shù)四十一頁\編于十九點5、熒光免疫分析

(FluorescenceImmunoassay)

BersonandYalowRIA1959