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文檔簡介

作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫基因工程基因工程定義：利用PCR擴(kuò)增技術(shù)或在體外從某種生物基因組中分離感興趣的基因，或是用人工合成的方法獲取基因，然后經(jīng)過一系列切割，加工修飾，連接反應(yīng)形成重組DNA分子，再將其轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞，以期獲得基因表達(dá)的過程.基因工程的操作過程基因工程的操作過程主要由以下步驟組成：①載體和目的基因的分離；②載體和目的基因的切斷；③載體和目的基因的重組；④重組DNA的轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增；⑤重組DNA的篩選和鑒定。

基因工程三大理論DNA結(jié)構(gòu)和中心法則的發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒的發(fā)現(xiàn)限制性內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)基因工程三大技術(shù)轉(zhuǎn)化技術(shù)DNA體外重組技術(shù)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)現(xiàn)代基因操作技術(shù)1.PCR技術(shù)現(xiàn)代基因操作技術(shù)2.DNAShuffling技術(shù)基本原理：先將來源不同但功能相同的一組同源基因，用DNA核酸酶I進(jìn)行消化產(chǎn)生隨機(jī)小片段，由這些小片段組成一個(gè)文庫，使之互為引物和模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，當(dāng)一個(gè)基因拷貝片段作為另一基因拷貝引物時(shí)，引起模板轉(zhuǎn)換，重組因而發(fā)生，導(dǎo)入體內(nèi)后，選擇正突變體作為新一輪的體外重組。一般通過2~3個(gè)循環(huán)，得到產(chǎn)物大幅度提高的重組突變體。全基因組改組：將DNAshuffling的多親本體外重組的優(yōu)點(diǎn)和傳統(tǒng)的育種(細(xì)胞融合)相結(jié)合的全基因組體內(nèi)改組技術(shù)。作

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