實驗動物基本知識及基本操作2

實驗動物基本知識及基本操作演示文稿目前一頁\總數(shù)四十六頁\編于二點實驗動物基本知識及基本操作目前二頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。小鼠（Mouse)小鼠被廣泛的用于生物學、醫(yī)學、獸醫(yī)學、生理學、遺傳學、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產和教學。目前三頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。大鼠（Rat)大鼠應用于生理學、藥理學、免疫學，內分泌學、神經生理、營養(yǎng)學、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。目前四頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。豚鼠（Guineapig)常用于免疫學、微生物學、傳染病學、聽覺生理、實驗性壞血癥等研究。

目前五頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。家兔(Rabbit)常用于免疫學、腫瘤、實驗生理學、生殖生理、遺傳性疾病等的方面的研究，制造生物制品。

目前六頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。貓（Cat）貓的神經系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達，與人很相似。常用于神經、循環(huán)和呼吸方面的實驗。

目前七頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。犬(Dog)常用于基礎醫(yī)學、藥理、毒理學、實驗外科學、行為學、腫瘤學等方面研究

在以犬為實驗動物的研究成果中，只有應用Beagle才能被國際公認。

目前八頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。豬(Pig)常應用于皮膚燒傷、腫瘤學、免疫學、心血管及糖尿病、遺傳性和營養(yǎng)性疾病、移植、外科手術等方面的研究

目前九頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（一）實驗動物的種類。猴(Monkey)主要用于傳染病學、藥理學和毒理學、生殖生理、口腔醫(yī)學）營養(yǎng)、代謝、行為學和高級神經活動研究及老年病、器官移植、眼科、內分泌病和畸胎學、腫瘤學目前十頁\總數(shù)四十六頁\編于二點實驗動物的選擇和利用一般來說，實驗動物愈高等，進化程度愈高、其機能、代謝、結構愈復雜．反應就愈接近人類，猴、拂拂、猩猩、長臂猿等靈長目動物是最近似于人類的理想動物。但實驗動物中，并非僅靈長類動物在生物學特性、解剖生理特點等方面與人具有相似性。目前十一頁\總數(shù)四十六頁\編于二點蛙的大腦不發(fā)達，不可作為高級神經活動的實驗，但蛙的脊髓具有最簡單的發(fā)射中樞，做神經反射弧實驗，簡單、直觀、明確、容易分析。目前十二頁\總數(shù)四十六頁\編于二點時象或年齡狀態(tài)的相似性目前十三頁\總數(shù)四十六頁\編于二點所選的實驗動物中一種為嚙齒類動物，另一種為非嚙齒類動物。常用的實驗序列是小鼠、大鼠、狗、猴或小型豬。目前十四頁\總數(shù)四十六頁\編于二點動物的捉拿、固定動物性別的辨別實驗動物的編號常用給藥方法二、實驗動物的基本操作目前十五頁\總數(shù)四十六頁\編于二點蟾蜍（一）動物的捉拿、固定AB圖3-2-1青蛙(或蟾蜍)捉拿法圖3-2-2青蛙(或蟾蜍)固定法目前十六頁\總數(shù)四十六頁\編于二點小鼠的捉持1.捉持法以右手捉小鼠尾，將小鼠放于粗糙面上，向后輕拉小鼠尾部，使小鼠固定于粗糙面上。用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠兩耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾住其背部皮膚和尾部，使頭部朝上，頸部拉直但不宜過緊，以免窒息。

圖3-2-2小白鼠的捉拿法目前十七頁\總數(shù)四十六頁\編于二點大鼠、豚鼠家兔（一）動物的捉拿、固定圖3-2-5兔捉拿方法AB圖3-2-4大鼠和豚鼠的捉拿和固定目前十八頁\總數(shù)四十六頁\編于二點目前十九頁\總數(shù)四十六頁\編于二點家兔的捉持方法動作要輕柔，用右手抓住兔背部近頸處皮膚，輕輕提起，另用左手托住臀部，使重量傾于左手減輕頸部拉力目前二十頁\總數(shù)四十六頁\編于二點注意：切勿只抓兩耳朵，因兔耳是軟骨，不能承受全身重量，受抓時必感疼痛而亂跳，使耳根受傷，兩耳垂落，血管擴張影響實驗結果觀察。也不應抓后腿，因突然使頭部向下倒置，易發(fā)生頭部血液循環(huán)障礙而致死目前二十一頁\總數(shù)四十六頁\編于二點小白鼠家兔（二）動物性別的辨別雄雌圖3-2-7小鼠性別的特征目前二十二頁\總數(shù)四十六頁\編于二點常用實驗動物性別鑒定動物♂♀小白鼠和大白鼠家兔豚鼠青蛙與蟾蜍生殖器與肛門距離較遠，用手捏外生殖器，可見陰莖凸出，天熱時可見陰囊下垂。左手抓住頸部皮膚，右手中指與無名指夾住尾巴；拇指與食指分開生殖器的皮毛，可見陰莖露出。一手抓住頸部，另一手扒開靠生殖器的突起，可見陰莖露出。用右手指捏住腰部將其提起，前肢作環(huán)抱狀，并有鳴叫，前肢拇指與食指間趾蹼上有棕黑色小突起（婚痣）外生殖器與肛門距離較近，乳頭明顯。僅呈橢圓形間隙，有陰道。呈三角形間隙。前肢呈伸直狀，無鳴叫，無婚痣。目前二十三頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（三）實驗動物的編號

可用不同的顏色分別代表編號的個位、十位、百位。紅色：0.5％中性紅或品紅溶液

黃色：3％-5％苦味酸溶液

咖啡色：2％硝酸銀溶液

黑色：煤焦油酒精溶液標號順序：先左后右，從上到下147258369目前二十四頁\總數(shù)四十六頁\編于二點標記方法：用棉簽或毛筆沾一種顏料溶液，涂于動物體表不同部位標記，順序是：先左后右，從上到下，從前到后。左前腿記為1號，左側腹部記為2號，左后腿記為3號；頭部記為4號，腰部記為5號，尾基部記為6號；右前腿記為7號，右側腹部記為8號，右下腿記為9號?？瞻滋巹t記為10號。目前二十五頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（四）常用給藥方法經消化道給藥法自動攝取法喂藥法灌胃給藥法經直腸給藥圖3-2-9小鼠灌胃法胃管開口器圖3-2-10兔灌胃方法目前二十六頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（四）常用給藥方法注射給藥法皮下注射腹腔注射小鼠腹腔注射方法目前二十七頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（四）常用給藥方法注射給藥法肌肉注射靜脈注射8.5cm3.5cm1cm小鼠尾靜脈注射法兔耳緣靜脈注射法目前二十八頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（四）常用給藥方法涂布給藥法藥物經皮膚吸收、局部作用或致敏作用時間根據(jù)藥物性質和要求定目前二十九頁\總數(shù)四十六頁\編于二點（五）動物被毛的去除法拔毛法剪毛法剃毛法脫毛法目前三十頁\總數(shù)四十六頁\編于二點常用實驗動物的給藥方法小鼠1.灌胃法左手拇指和食指捏住小鼠頸背部皮膚，無名指和小指將尾部緊壓在手掌上，使小鼠腹部朝上。右手持灌胃管(注射針頭稍加彎曲制成)經口角插入口腔，用灌胃管向后上方壓迫小鼠頭部，使口腔與食道成一直線，再將胃管沿上顎壁輕輕推進食道，推注藥液。2.皮下注射注射部位可選背部皮下，操作時輕輕拉起背部皮膚，將注射針頭刺入皮下，稍稍擺動針頭，若容易擺動則表明針尖的位置確定在皮下，此時注射藥物。拔針時，輕捏針刺部位片刻，以防藥液逸出。目前三十一頁\總數(shù)四十六頁\編于二點3.肌肉注射小鼠固定如上述，將注射器針頭刺入小鼠臀部外側肌肉，注入藥物。4.腹腔注射左手固定動物，使小鼠呈頭低位，腹部朝上，右手持注射器，在左或右側下腹部將針頭刺入皮下，沿皮下向前推進3～5mm，然后使針頭與皮膚呈45度角方向穿入腹腔。針尖進入腹腔可有抵抗消失感，此時可輕推藥物。目前三十二頁\總數(shù)四十六頁\編于二點尾靜脈注射將小鼠裝入籠內，使其尾部外露。尾部用溫水浸泡半分鐘或用酒精棉球擦拭，使其血管充血和表皮角質軟化，以拇指和食指捏住尾根部的兩側，阻斷其靜脈回流，使尾靜脈充盈明顯，以無名指和小指夾持其尾尖，用中指托起尾巴，使之固定。選其一側尾靜脈穿刺，如針頭確在血管內，則推注藥液。需反復靜脈注射時，易從尾端開始。目前三十三頁\總數(shù)四十六頁\編于二點給藥量(一)

小白鼠：灌胃法（0.1-0.3ml/10g）

皮下注射（0.1-0.3ml/10g）

腹腔注射（0.1-0.2ml/10g）（二）家兔：灌胃法（≤20ml/只）皮下注射（0.5-1.0ml/kg）

腹腔注射（0.5-1.0ml/kg）

靜脈注射（0.5-1.0ml/kg）

肌肉注射（0.5-1.0ml/kg）目前三十四頁\總數(shù)四十六頁\編于二點家兔的取血方法1.耳靜脈采血

本法為最常用的取血法之一，常作多次反復取血用，因此，保護耳緣靜脈，防止發(fā)生栓塞特別重要。

將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中，或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵，將耳靜脈部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦兔耳，使靜脈擴張，用連有5（1/2）號針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或將針頭逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血，此種采血法一次最多可采血5-10ml。

目前三十五頁\總數(shù)四十六頁\編于二點2.耳中央動脈采血

將兔置于兔固定筒內，在兔耳的中央有一條較粗、顏色較鮮紅的中央動脈，用左手固定兔耳，右手取注射器，在中央動脈的末端，沿著動脈平行地向心方向刺入動脈，即可見動脈血進入針筒，取血完畢后注意止血。此法一次抽血可達15ml。但抽血時應注意，由于兔耳中央動脈容易發(fā)生痙攣性收縮，因此抽血前，必須先讓兔耳充分充血，當動脈擴張，未發(fā)生痙攣性收縮之前立即進行抽血，如果等待時間過長，動脈經常會發(fā)生較長時間的痙攣性收縮。取血用的針頭一般用6號針頭，不要太細。針刺部位從中央動脈末端開始。不要在近耳根部取血，因耳根部軟組織厚，血管位置略深，易刺透血管造成皮下出血。

目前三十六頁\總數(shù)四十六頁\編于二點3.心臟取血

將家兔仰臥固定，在第三肋間胸骨左緣3毫米處注射針垂直刺入心臟，血液隨即進入針管。注意事項有：⑴動作宜迅速，以縮短在心臟內的留針時間和防止血液凝固；⑵如針頭已進入心臟但抽不出血時，應將針頭稍微后退一點。⑶在胸腔內針頭不應左右擺動以防止傷及心，肺、一次可取血20-25ml。

目前三十七頁\總數(shù)四十六頁\編于二點4.后肢脛部皮下靜脈取血將兔仰臥固定于兔固定板上，或由一人將兔固定好。拔去脛部被毛，在脛部上端股部扎以橡皮管，則在脛部外側淺表皮下，可清楚見到皮下靜脈。用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有5（1/2）號針頭的注射器內皮下靜脈平行方向刺入血管，抽一下針栓，如血進入注射器，表示針頭已刺入血管，即可取血。一次可取2～5ml。取完后必須用棉球壓迫取血部位止血，時間要略長些，因此處不易止血。如止血不妥，可造成皮下血腫，影響連續(xù)多次取血。

目前三十八頁\總數(shù)四十六頁\編于二點5.股靜脈、頸靜脈取血先作股靜脈和頸靜脈暴露分離手術

⑴股靜脈取血注射器平行于血管，從股靜脈下端向心方向刺入，徐徐抽動針栓即可取血。抽血完畢后要注意止血。股靜脈較易止血，用于紗布輕壓取血部位即可。若連續(xù)多次取血，取血部位宜盡量選擇靠離心端。

⑵外頸靜脈取血注射器由近心端（距頸靜脈分支2-3厘米處）向頭側端順血管平等方向刺入，使注射針一直引深至頸靜脈分支叉處，即可取血。此處血管較粗，很容易取血，取血量也較多，一次可取10ml以上。取血完畢，拔出針頭，用干紗布輕輕壓迫取血部位也易止血。兔急性實驗的靜脈取血，用此法較方便。目前三十九頁\總數(shù)四十六頁\編于二點各種動物麻醉的方式吸入麻醉、注射麻醉、局部麻醉。局部麻醉常用的麻醉藥:浸潤麻醉、阻滯麻醉和椎管麻醉常用0.5%~1%普卡因注射液，表面麻醉宜用2%丁卡因溶液。目前四十頁\總數(shù)四十六頁\編于二點實驗動物的處死方法實驗動物的處死方法很多，應根據(jù)動物實驗目的、實驗動物品種（品系）、以及需要采集標本的部位等因素，選擇不同的處死方法。無論采用哪一種方法，都應遵循安樂死的原則。安樂死是指在不影響動物實驗結果的前提下，使實驗動物短時間無痛苦地死亡。處死實驗動物時應注意，首先要保證實驗人員的安全；其次要確認實驗動物已經死亡，通過對呼吸、心跳、瞳孔、神經反射等指征的觀察，對死亡作出綜合判斷；再者要注意環(huán)保，避免污染環(huán)境，還要妥善處理好尸體。

目前四十一頁\總數(shù)四十六頁\編于二點1.頸椎脫臼處死法此法是將實驗動物的頸椎脫臼，斷離脊髓致死，為大、小鼠最常用的處死方法。操作時實驗人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用力向下按壓鼠頭及頸部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成頸椎脫臼，脊髓與腦干斷離，實驗動物立即死亡。