第九章細菌的生長繁殖與培養(yǎng)詳解

第九章細菌的生長繁殖與培養(yǎng)詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)四十頁\編于五點優(yōu)選第九章細菌的生長繁殖與培養(yǎng)目前二頁\總數(shù)四十頁\編于五點細菌是一大類具有獨立生命活動的單細胞微生物，能從外界環(huán)境中攝取營養(yǎng)物質(zhì)，合成自身細胞成分并獲得能量，同時不斷排出廢物，完成新陳代謝，得以生長繁殖。細菌的生長繁殖與環(huán)境條件密切相關(guān)，條件適宜時，細菌的生長繁殖及代謝旺盛，改變條件時可使細菌生命活動受到抑制或使細菌死亡。前言目前三頁\總數(shù)四十頁\編于五點占細胞總重量80%蛋白質(zhì)、糖類、脂類、無機鹽等；15-20%肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、脂多糖二氨基庚二酸、吡啶二羧酸、2-酮基-3-脫氧辛酸水：固體成分：特有成分：第一節(jié)細菌的生長繁殖一、細菌的化學(xué)組成目前四頁\總數(shù)四十頁\編于五點（一）營養(yǎng)物質(zhì)水:參與營養(yǎng)的吸收與代謝。碳源:

co2、碳酸鹽、糖、脂肪氮源:

有機氮、無機氮、游離氮無機鹽:

K、Ca、Na、Mg、S、P、Fe等生長因子(growthfactor)：

某些細菌生長所必需而又不能自身合成，必須由外界提供的有機化合物。種類：B族維生素——硫胺素、核黃素、生物素、泛酸某些必須氨基酸、嘌呤、嘧啶、膽堿Ⅴ因子、Ⅹ因子二、細菌生長繁殖的條件目前五頁\總數(shù)四十頁\編于五點（二）酸堿度（三）溫度大多數(shù)病原菌：37℃（四）氣體

①O2：專性需氧菌：有氧條件，如結(jié)核分枝桿菌專性厭氧菌：無氧條件，如破傷風(fēng)梭菌

兼性厭氧菌：有氧或無氧，多數(shù)致病菌屬于此類

二、細菌生長繁殖的條件大多數(shù)病原菌：pH7.2～pH7.6霍亂弧菌:

pH8.4～pH9.2結(jié)核分枝桿菌:

pH6.5～pH6.8

目前六頁\總數(shù)四十頁\編于五點（一）細菌個體的生長繁殖方式：無性二分裂速度：20～30分鐘/代

三、細菌生長繁殖的規(guī)律目前七頁\總數(shù)四十頁\編于五點（二）細菌群體的生長繁殖細菌生長曲線小時細菌數(shù)目的對數(shù)目前八頁\總數(shù)四十頁\編于五點遲緩期(lagphase)

最初培養(yǎng)1-4小時，菌體不分裂，但菌體增大、代謝活躍

對數(shù)期(logarithmicphase)

一般持續(xù)6-8小時?；罹鷶?shù)目呈對數(shù)直線上升。

細菌形態(tài)、染色、生理活性典型，對外界環(huán)境敏感

穩(wěn)定期(stationaryphase)

細菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)接近。

細菌形態(tài)、染色、生理活性改變，產(chǎn)生外毒素、抗生素、芽孢

衰退期(declinephase)

死亡數(shù)超過活菌數(shù)。細菌變長、腫脹、畸形、自溶細菌生長曲線特點目前九頁\總數(shù)四十頁\編于五點四、細菌的代謝產(chǎn)物及意義（一）根據(jù)細菌具有不同的酶，對糖、蛋白質(zhì)分解能力及分解后產(chǎn)生的產(chǎn)物不同用生化方法來鑒定細菌稱：細菌的生化反應(yīng)目前十頁\總數(shù)四十頁\編于五點甲基紅試驗（methylredtest，MR）機理：大腸桿菌產(chǎn)氣桿菌葡萄糖乳糖PH＜4.5PH＞5.4甲基紅指示劑呈紅色甲基紅指示劑呈桔黃色甲基紅試驗陽性甲基紅試驗陰性丙酮酸中性產(chǎn)物脫羧丙酮酸目前十一頁\總數(shù)四十頁\編于五點

利用分解代謝的產(chǎn)物和能量，合成新的物質(zhì)合成產(chǎn)物毒素和侵襲性酶熱原質(zhì)色素抗生素細菌素維生素

（二）合成代謝產(chǎn)物及醫(yī)學(xué)意義（重點）目前十二頁\總數(shù)四十頁\編于五點毒素和侵襲性酶主要的致病物質(zhì)，包括外毒素、內(nèi)毒素、侵襲性酶熱原質(zhì)

細菌合成的，使機體發(fā)熱的物質(zhì)耐高溫，需蒸餾、吸附才可去除（二）合成代謝產(chǎn)物及醫(yī)學(xué)意義（重點）色素兩種：脂溶性、水溶性鑒定細菌，如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌目前十三頁\總數(shù)四十頁\編于五點抗生素某些細菌、真菌、放線菌產(chǎn)生的能抑制和殺滅其它他微生物和腫瘤細胞的物質(zhì)。如青霉素、鏈霉素等。功能：抗菌譜廣，廣泛用于治療細菌感染性疾病和腫瘤。維生素

營養(yǎng)機體，可供人體吸收利用。如大腸埃希菌合成的維生素B，K，供人體吸收利用。（二）合成代謝產(chǎn)物及醫(yī)學(xué)意義（重點）目前十四頁\總數(shù)四十頁\編于五點第二節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)基(culturemedium)人工配制適合于細菌生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)“滅菌”目前十五頁\總數(shù)四十頁\編于五點按照物理狀態(tài)分類：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基2-3%瓊脂0.3-0.5%瓊脂目前十六頁\總數(shù)四十頁\編于五點二、細菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象（一）細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象（重點）沉淀生長混濁生長菌膜生長（大多數(shù)）（鏈狀菌）（專性需氧菌）目前十七頁\總數(shù)四十頁\編于五點（二）細菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落(colony)：細菌在固體培養(yǎng)基上出現(xiàn)由單個細菌生長繁殖形成的肉眼可見的細菌集團意義：鑒別細菌、分離細菌菌苔(mossy)：多個菌落融合形成的細菌集團目前十八頁\總數(shù)四十頁\編于五點三、人工培養(yǎng)細菌的實際意義1.感染性疾病的診斷和防治標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)純培養(yǎng)生化鑒定顯微鏡觀察染色

初步診斷確定診斷診斷目前十九頁\總數(shù)四十頁\編于五點標(biāo)本青慶紅鏈紅青鏈慶密聚劃線接種培養(yǎng)藥浸紙片最敏感藥物治療目前二十頁\總數(shù)四十頁\編于五點2.細菌的鑒定與研究例如：嗜肺軍團菌3.生物制品的制備結(jié)核桿菌（有毒）培養(yǎng)基（膽汁、甘油、馬鈴薯）卡介苗（BCG）接種13年230代目前二十一頁\總數(shù)四十頁\編于五點第十章細菌的分布與消毒滅菌劉瀟病原生物與免疫學(xué)高職高專護理目前二十二頁\總數(shù)四十頁\編于五點學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握正常菌群、條件致病菌及菌群失調(diào)、消毒、滅菌、無菌操作的概念；掌握常見的消毒、滅菌、無菌操作的方法；了解細菌的分布及防護原則。目前二十三頁\總數(shù)四十頁\編于五點

針頭上的細菌模式圖抹布和砧板上的細菌模式圖細菌種類多，繁殖快，適應(yīng)環(huán)境的能力強，是自然界中分布最廣泛的一群微小生物。了解細菌的分布對醫(yī)學(xué)生加強無菌觀念，嚴(yán)格無菌操作，預(yù)防醫(yī)院感染等具有重要意義。

前言目前二十四頁\總數(shù)四十頁\編于五點一、細菌在自然界中的分布1.土壤中的細菌土壤是細菌生存的天然場所（因為土壤中有水分、營養(yǎng)物質(zhì)、空氣、一定的PH環(huán)境和溫度）。自然界中，以土壤的含菌量（種類）最多，土壤素有“天然培養(yǎng)基”之稱。土壤中的細菌多數(shù)為非病原菌，它們在自然界的物質(zhì)循環(huán)中起著重要的作用，是動植物與人類生存的必要條件之一。第一節(jié)細菌的分布目前二十五頁\總數(shù)四十頁\編于五點使人致病的主要為球菌和芽胞桿菌，如炭疽桿菌、破傷風(fēng)桿菌、氣性壞疽可長期存活。所以，當(dāng)人體創(chuàng)傷處污染泥土?xí)r，要嚴(yán)防破傷風(fēng)和氣性壞疽感染。土壤中的病原菌從哪里來？土壤中僅有少數(shù)病原菌，它們來自人和動物體（糞、尿、痰、尸體等），多數(shù)病菌在土壤中很能容易死亡。目前二十六頁\總數(shù)四十頁\編于五點2.水中的細菌土壤、空氣、動植物尸體、人和動物的排瀉物、工業(yè)及生活污水。通過水體傳播的病原微生物主要有沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、霍亂弧菌等?？梢鹣到y(tǒng)傳染病，甚至爆發(fā)流行。因此，做好水的衛(wèi)生學(xué)檢查對預(yù)防疾病至關(guān)重要。一、細菌在自然界中的分布目前二十七頁\總數(shù)四十頁\編于五點3.空氣中的細菌空氣中缺乏營養(yǎng)物質(zhì)與水分，且受日光照射，細菌不易繁殖。但由于人群和各種動物的呼吸道及口腔中的細菌可隨唾液、飛沫散布到空氣中，極易造成疾病的傳播。細菌可隨塵埃漂浮在空氣中，尤其在人口密集的公共場所或醫(yī)院，空氣中細菌種類和數(shù)量顯著增多。一、細菌在自然界中的分布目前二十八頁\總數(shù)四十頁\編于五點常見的病原菌如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及腦膜炎奈瑟菌等，可引起傷口或呼吸道感染?？諝庵械姆侵虏【？稍斐缮镏破贰⑺幬镏苿┘芭囵B(yǎng)基的污染。因此，醫(yī)院的手術(shù)室、病房、制劑室、實驗室等要經(jīng)常進行空氣消毒，并嚴(yán)格按照有關(guān)制度和無菌技術(shù)進行醫(yī)療操作，以防止疾病的傳播及醫(yī)院感染。你知道嗎？目前二十九頁\總數(shù)四十頁\編于五點正常人體的體表以及與外界相通的腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道、泌尿生殖道等黏膜）表面存在著一定數(shù)量和不同種類的細菌，這些通常對人體無害甚至有益的細菌，稱為正常菌群（normalflora）。二、人體正常菌群及分布（一）正常菌群目前三十頁\總數(shù)四十頁\編于五點生物拮抗作用：即對病原菌的拮抗作用，如大腸菌素可抑制痢疾桿菌生長；唾液鏈球菌產(chǎn)生的H2O2抑制腦膜炎球菌生長。

營養(yǎng)作用：大腸桿菌及乳鏈球菌能合成VitB1、B12、泛酸、葉酸及VitC、K等，供機體利用；雙岐桿菌產(chǎn)酸造成酸性環(huán)境可促進對VitD、Ca、Fe的吸收。免疫作用：微生物具有免疫原性、促分裂和佐劑的作用，可剌激機體免疫系統(tǒng)發(fā)育和成熟。正常菌群的生理意義目前三十一頁\總數(shù)四十頁\編于五點正常菌群與人體間的平衡狀態(tài)，在某種特定條件下被打破，使原來不致病的正常菌群也能引起疾病，這些能引起疾病的微生物稱為條件致病菌或機會致病菌。

（二）條件致病菌二、人體正常菌群及分布目前三十二頁\總數(shù)四十頁\編于五點①機體免疫機能低下：如大面積燒傷，過度疲勞，受涼，長期患消耗性疾病。②正常菌群寄居部位發(fā)生變遷：如外傷，手術(shù)，留置導(dǎo)尿管等使大腸桿菌進入腹腔、泌尿道或血液等。③不適當(dāng)?shù)目咕厮幬镏委煂?dǎo)致菌群失調(diào)：如長期或濫用抗菌素治療。條件致病菌致病的特定條件目前三十三頁\總數(shù)四十頁\編于五點菌群失調(diào)：指機體、菌群、環(huán)境三者之間的動態(tài)平衡發(fā)生改變，導(dǎo)至體內(nèi)正常菌群中各種細菌的數(shù)量和比例發(fā)生大幅度的變化，生態(tài)體系表現(xiàn)出的不平衡狀態(tài)。菌群失調(diào)癥：指嚴(yán)重的菌群失調(diào)使機體發(fā)生功能紊亂表現(xiàn)出明顯臨床癥狀者。菌群失調(diào)癥又叫菌群交替癥（二次感染）。菌群失調(diào)經(jīng)常發(fā)生而菌群失調(diào)癥則少見?；级馗腥镜臋C體抵抗力很弱，細菌對抗菌素藥物不敏感，治療難度大，應(yīng)嚴(yán)加預(yù)防，避免發(fā)生。菌群失調(diào)及菌群失調(diào)癥目前三十四頁\總數(shù)四十頁\編于五點

消毒（disinfection）：殺死物體上病原微生物的方法，但不一定殺死細菌芽胞。滅菌（sterilization）：殺死物體上包括芽胞在內(nèi)的所有病原性和非病原性微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。

無菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物進入機體或物體的操作方法，稱為無菌操作或無菌技術(shù)。進行微生物實驗、外科手術(shù)及醫(yī)療技術(shù)操作等過程，均需進行嚴(yán)格的無菌操作。

第二節(jié)消毒滅菌目前三十五頁\總數(shù)四十頁\編于五點

熱力滅菌法分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。在同一溫度下，后者效力比前者為大，這是因為：（1）濕熱的穿透力比干熱大；

（2）濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固；（3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。水由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時釋放出的潛熱，可迅速提高被滅菌物體的溫度。一、物理消毒滅菌法（重點）（一）熱力滅菌法目前三十六頁\總數(shù)四十頁\編于五點1、濕熱滅菌法高壓蒸氣滅菌法：一種最常用、最有效的滅菌方法。利用密閉的容器加熱產(chǎn)生的蒸汽滅菌，通常103.4kPa（1.05kg/cm2）的蒸汽壓力下，容器內(nèi)溫度可達121.3℃，維持15～30分鐘，即可達到滅菌的目的。凡耐高溫、耐潮濕的物品，如手術(shù)器械、敷料和一般培養(yǎng)基等，均可用此法滅菌。煮沸法：水溫100℃經(jīng)5分鐘可殺死細菌繁殖體，常用于食具、刀剪、注射器等的消毒，細菌芽胞需煮沸1～2小時才被殺滅。水中加入2%碳酸氫鈉，可使沸點達105℃，既可促進殺滅芽胞，又能防止金屬器械生銹。（一）熱力滅菌法目前三十七頁\總數(shù)四十頁\編于五點目前三十八頁\總數(shù)四十頁\編于五點流通蒸氣法：利用蒸籠或阿諾蒸鍋進行消毒。流通蒸汽法溫度不超過100℃，經(jīng)15～30分鐘可殺死細菌繁殖體；把流通蒸汽加熱的物品放置37℃溫箱過夜，促使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再經(jīng)流通蒸汽加熱，如此重復(fù)3次，可達到滅菌的目的，稱為間歇滅菌法，常用于不耐高溫的材料如培養(yǎng)基的滅菌。