蛋白質范文10篇

蛋白質范文10篇蛋白質范文第9篇1質譜分析的特點

質譜分析用于蛋白質等生物活性分子的討論具有如下優(yōu)點：很高的靈敏度能為亞微克級試樣供應信息，能最有效地與色譜聯(lián)用，適用于簡單體系中痕量物質的鑒定或結構測定，同時具有精確?????性、易操作性、快速性及很好的普適性。

2質譜分析的方法

近年來涌現(xiàn)出較勝利地用于生物大分子質譜分析的軟電離技術主要有下列幾種：

①電噴霧電離質譜；

②基質幫助激光解吸電離質譜；

③快原子轟擊質譜；

④離子噴霧電離質譜；

⑤大氣壓電離質譜。在這些軟電離技術中，以前面三種近年來討論得最多，應用得也最廣泛。

3蛋白質的質譜分析

蛋自質是一條或多條肽鏈以特別方式組合的生物大分子，簡單結構主要包括以肽鏈為基礎的肽鏈線型序列及由肽鏈卷曲折疊而形成三維結構。目前質譜主要測定蛋自質一級結構包括分子量、肽鏈氨基酸排序及多肽或二硫鍵數(shù)目和位置。

3.1蛋白質的質譜分析原理以往質譜(MS)僅用于小分子揮發(fā)物質的分析，由于新的離子化技術的消失，如介質幫助的激光解析/離子化、電噴霧離子化，各種新的質譜技術開頭用于生物大分子的分析。其原理是：通過電離源將蛋白質分子轉化為氣相離子，然后利用質譜分析儀的電場、磁場將具有特定質量與電荷比值(M/Z值)的蛋白質離子分別開來，經(jīng)過離子檢測器收集分別的離子，確定離子的M/Z值，分析鑒定未知蛋白質。

3.2蛋白質和肽的序列分析現(xiàn)代討論結果發(fā)覺越來越多的小肽同蛋白質一樣具有生物功能，建立具有特別、高效的生物功能肽的肽庫是現(xiàn)在的討論熱點之一。因此需要高效率、高靈敏度的肽和蛋白質序列測定方法支持這些討論的進行。現(xiàn)有的肽和蛋白質測序方法包括N末端序列測定的化學方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化學降解法等，這些方法都存在一些缺陷。例如作為肽和蛋白質序列測定標準方法的N末端氨基酸苯異硫氰酸酯(phenylisothiocyanate)PITC分析法(即Edman法，又稱PTH法)，測序速度較慢(50個氨基酸殘基/天)；樣品用量較大(nmol級或幾十pmol級)；對樣品純度要求很高；對于修飾氨基酸殘基往往會錯誤識別，而對N末端愛護的肽鏈則無法測序。C末端化學降解測序法則由于無法找到PITC這樣抱負的化學探針，其進展仍面臨著很大的困難。在這種背景下，質譜由于很高的靈敏度、精確?????性、易操作性、快速性及很好的普適性而倍受科學家的廣泛留意。在質譜測序中，靈敏度及精確?????性隨分子量增大有明顯降低，所以肽的序列分析比蛋白簡單很多，很多討論也都是以肽作為分析對象進行的。近年來隨著電噴霧電離質譜(electrosprayionisation，ESI)及基質幫助激光解吸質譜(matrixassistedlaserdesorption/ionization，MALDI)等質譜軟電離技術的進展與完善，極性肽分子的分析成為可能，檢測限下降到fmol級別，可測定分子量范圍則高達100000Da，目前基質幫助的激光解吸電離飛行時間質譜法(MALDITOFMS)已成為測定生物大分子尤其是蛋白質、多肽分子量和一級結構的有效工具，也是當今生命科學領域中重大課題——蛋白質組討論所必不行缺的關鍵技術之一。目前在歐洲分子生物試驗室(EMBL)及美國、瑞士等國的一些高校已建立了MALDITOFMS蛋白質一級結構(序列)譜庫，能為解析FAST譜圖供應極大的關心，并為確證分析結果供應牢靠的依據(jù)。

3.3蛋白質的質譜分析方式質譜用于肽和蛋白質的序列測定主要可以分為三種方法：一種方法叫蛋白圖譜(proteinmapping)，即用特異性的酶解或化學水解的方法將蛋白切成小的片段，然后用質譜檢測各產(chǎn)物肽分子量，將所得到的肽譜數(shù)據(jù)輸入數(shù)據(jù)庫，搜尋與之相對應的已知蛋白，從而獵取待測蛋白序列。將蛋白質繪制“肽圖”是一重要測列方法。其次種方法是利用待測分子在電離及飛行過程中產(chǎn)生的亞穩(wěn)離子，通過分析相鄰同組類型峰的質量差，識別相應的氨基酸殘基，其中亞穩(wěn)離子碎裂包括“自身”碎裂及外界作用誘導碎裂.第三種方法與Edman法有相像之處，即用化學探針或酶解使蛋白或肽從N端或C端逐一降解下氨基酸殘基，形成相互間差一個氨基酸殘基的系列肽，名為梯狀測序(laddersequencing)，經(jīng)質譜檢測，由相鄰峰的質量差知道相應氨基酸殘基。

3.3.1蛋白消化蛋白的基團越大，質譜檢測的精確?????率越低。因此，在質譜檢測之前，須將蛋白消化成小分子的多肽，以提高質譜檢測的精確?????率。一般而言，6-20個氨基酸的多肽最適合質譜儀的檢測?，F(xiàn)今最常用的酶為胰蛋白酶(trypsin)，它于蛋白的賴氨酸(lysine)和精氨酸(arginine)處將其切斷。因此，同一蛋白經(jīng)胰蛋白酶消化后，會產(chǎn)生相同的多肽。

3.3.2基質幫助激光解吸電離/飛行時間質譜測量法(MALDI-TOFMS)簡而言之，基質幫助激光解吸電離/飛行時間質譜測量儀是將多肽成分轉換成離子信號，并依據(jù)質量/電荷之比(mass/charge，m/z)來對該多肽進行分析，以推斷該多肽源自哪一個蛋白。

3.3.3電子噴霧電離質譜測量法(electrosprayion-izationmassspectrometry，ESI-MS)。

4蛋白質質譜分析的應用

人體對蛋白質的需要當然有量的要求，但更重要的是質。換句話說，蛋白質食物并非多多益善，而是越優(yōu)越好。

所謂優(yōu)質蛋白質，至少應具備兩個條件：一是氨基酸品種齊全，特殊是8種必需氨基酸

將兩種或幾種養(yǎng)分價值較低的蛋白質食物，根據(jù)肯定的比例搭配食用，就能取長補短，改善氨基酸的結構與比例，比如豆類加谷物類即為最佳搭配。另外，可對植物性蛋白質食品予以科學地加工，清除其中過多的纖維素，從而避開其對蛋白質汲取的干擾。以大豆為例，如煮熟之后整粒食用。所含蛋白質的汲取率為60％。而加工成豆?jié){飲用，所含蛋白質的汲取率可提高到90％以上。

避開不合理的搭配

為了使蛋白質食物能夠充分地消化、汲取與利用，還須在搭配上下功夫，避開不合理的搭配。

蛋白質食物與水果同吃就不妥。由于水果中的果酸可抑制消化液分泌，破壞消化蛋白質的胃蛋白酶，進而導致蛋白質消化不良。

蛋白質食物不宜和精制糖搭配。由于精制糖抑制胃酸分泌，并可滯留于胃中發(fā)酵產(chǎn)氣，降低蛋白質的消化與汲取。而與蔬菜同食則有利，由于蔬菜中一種也不能缺；二是所含氨基酸的比例平衡，有利于人體消化與汲取。

按上述兩條標準來衡量，瘦肉、蛋類、魚蝦等動物性食品當屬優(yōu)質蛋白質之列，而植物性食品則或多或少存在缺陷，如豆類蛋白質缺乏蛋氨酸，大米蛋白質缺乏賴氨酸，花生蛋白質缺乏異亮氨酸，這些均屬于不完全蛋白質。人體的汲取利用率也略低一籌。

植物蛋白質食品巧組合

前面說過，動物性蛋白最優(yōu)，當為首選。但長期食用動物性蛋白質食物也簡單導致肥胖、膽固醇上升等不良后果。由于，最好的方法是將植物性食品奇妙組合