藥物常見定量分析方法 樣品前處理和分析方法的驗(yàn)證 （藥物分析課件）

樣品前處理樣品前處理是指在樣品分析前要采用一定的方法，使待測藥物純化或待測元素轉(zhuǎn)化為適宜的狀態(tài)后再進(jìn)行分析測定。樣品前處理1.目的樣品前處理消除干擾，保護(hù)儀器。提高方法的準(zhǔn)確度、精密度、選擇性和靈敏度。分析檢測的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。前處理對象前處理方法樣品前處理含金屬（Ca、Fe、Zn、Hg）鹵素（F、Cl、Br、I）、N元素、P、S不經(jīng)有機(jī)破壞經(jīng)有機(jī)破壞樣品前處理1.不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法對藥物分子的有機(jī)結(jié)構(gòu)部分不進(jìn)行完全破壞，通過選用適當(dāng)溶劑溶解或經(jīng)簡單回流處理，使待測元素電離、離解，轉(zhuǎn)化為無機(jī)離子進(jìn)行測定，適用于含金屬有機(jī)藥物或結(jié)合不牢固的含鹵素藥物的分析。方法包括直接溶解法、提取分離法中的加熱回流、超聲處理、索氏提取、水蒸氣蒸餾法、冷浸或滲漏法、萃取濃集法化學(xué)分解法……樣品前處理2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法某些藥品中含有機(jī)氮、硫、磷及有機(jī)金屬離子與碳原子結(jié)合牢固，用上述方法難以成為無機(jī)的化合物，此時(shí)必須采用有機(jī)破壞的方法，使之轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)化合物，方可進(jìn)行測定。樣品前處理方法包括濕法破壞法和干法破壞法。破壞法2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法

（1）濕法破壞法1、硝酸—高氯酸方法2、硫酸—硫酸鹽方法3、硝酸—硫酸法方法4、其他濕法主要采用強(qiáng)酸進(jìn)行有機(jī)破壞，將有機(jī)結(jié)合的待測元素轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y定無機(jī)化合物。本法可用于生物制品中氮、磷或金屬元素的測定。以硫酸-硫酸鹽法為基礎(chǔ)的含氮有機(jī)藥物定量分析方法。適用于含氮有機(jī)藥物前處理。例：凱氏定氮法用濃硫酸進(jìn)行消解消解液加氫氧化鈉蒸餾，用2%硼酸溶液吸收生成硼胺再用稀硫酸滴定2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法

樣品前處理高溫?zé)胱品ㄑ跗咳紵?.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法

（2）干法破壞法適用于含鹵素、硫、磷等有機(jī)物的前處理，亦可用于含硒、砷鹽藥物的測定。樣品前處理主要用于含鹵素藥物的鑒別。本法將有機(jī)藥物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機(jī)結(jié)構(gòu)分解而待測元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)元素或可溶性的無機(jī)鹽。樣品前處理（1）高溫?zé)胱品▽⒂袡C(jī)藥物放入充滿氧氣的密閉燒瓶中進(jìn)行燃燒，將燃燒所產(chǎn)生的待測物質(zhì)吸收在適當(dāng)吸收液中，采用適當(dāng)分析方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測定。適用于含鹵素及硫、磷、硒等藥物的鑒別、檢查和含量測定。（2）氧瓶燃燒法樣品前處理2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法

分析方法的驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求。分析方法的驗(yàn)證對原分析方法進(jìn)行修訂

建立藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)AC制劑的組分變更BD

藥品生產(chǎn)工藝變更需要進(jìn)行方法驗(yàn)證的情況方法驗(yàn)證的理由、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明或修訂說明中。分析方法的驗(yàn)證質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需要驗(yàn)證的項(xiàng)目鑒別試驗(yàn)、限量或定量檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定、制劑中其他成分藥品溶出度、釋放度等檢查中溶出量等的測定方法。準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。在分析方法驗(yàn)證中，須采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)。分析方法的驗(yàn)證指標(biāo)分析方法的驗(yàn)證一、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指采用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定。

加樣回收率測定——向已知被測成分含量的供試品中精密加入一定量的被測成分對照品，用實(shí)測值與供試品中含有量之差，除以加入對照品量計(jì)算回收率。

數(shù)據(jù)要求：9個(gè)測定結(jié)果，3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各3份(80，100，120％)分析方法的驗(yàn)證在規(guī)定的條件下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測定所得結(jié)果在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測定所得結(jié)果二、精密度重現(xiàn)性中間精密度重復(fù)性分析方法的驗(yàn)證三、專屬性在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）存在下，采用的分析方法能正確測定被測物的能力。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查和含量測定方法，均應(yīng)考察其專屬性。對照品溶液供試品溶液空白溶液分析方法的驗(yàn)證檢測限檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。檢測限僅作為限度試驗(yàn)指標(biāo)和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。四、檢測限分析方法的驗(yàn)證定量限試樣中被測物能被定量測定的最低量，應(yīng)符合準(zhǔn)確度和精密度要求。適用于微量或痕量藥物分析、定量測定藥物雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。五、定量限分析方法的驗(yàn)證指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測定響應(yīng)值與試樣中被測物濃度呈比例關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系。以測得的響應(yīng)信號對應(yīng)被測物的濃度作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸?？捎猛粚φ掌焚A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱取對照品，制備一系列對照品溶液的方法進(jìn)行測定，至少制備5份不同濃度的對照品溶液。六、線性分析方法的驗(yàn)證必要時(shí)，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算；可采用描述濃度-響應(yīng)關(guān)系的非線性模型。六、線性數(shù)據(jù)要求：列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。分析方法的驗(yàn)證范圍能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性要求時(shí)的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用及其線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。分析方法的驗(yàn)證七、范圍八、耐用性在測定條件有小的變動時(shí)，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為所建立的方法用于日常檢驗(yàn)提供依據(jù)，開始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，應(yīng)在方法中寫明并注明可以接受變動的范圍，可先采用均勻設(shè)計(jì)確定主要影響因素，再通過單因素分析等確定變動范圍。分析方法的驗(yàn)證九、驗(yàn)證內(nèi)容的選擇

010203定量分析方法如原料藥或制劑的含量測定及含量