生物學(xué)實驗離體蛙心灌流

生物學(xué)實驗離體蛙心灌流第一頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)離體蛙心灌流的方法；觀察鈉、鉀、鈣三種離子對心臟活動的影響。觀察腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。第二頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三實驗原理作為蛙心起搏點的靜脈竇能按一定節(jié)律自動產(chǎn)生興奮。因此，只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中，在一定時間被仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮。另一方面，心臟正常的節(jié)律性活動有賴于內(nèi)環(huán)境理化因素的相對穩(wěn)定，所以，改變灌流液的成分，則可以引起心臟活動的改變。第三頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三實驗原理

工作細(xì)胞：普通的具有收縮能力的心肌細(xì)胞

自律細(xì)胞：組成特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)的心肌細(xì)胞心肌收縮力：Ca2+心率：自律細(xì)胞4期自動除極速度RP或MDP與閾電位之差第四頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三動物與器材牛蛙斯氏蛙心套管、套管夾、常用手術(shù)器械、任氏液、張力換能器、蛙心夾、0.65%NaCl溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000腎上腺素溶液、1:10000乙酰膽堿溶液、300u/ml肝素溶液第五頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三方法與步驟離體蛙心的制備：雙毀髓→左主動脈結(jié)扎→左右兩主動脈下方活結(jié)備用→剪口，插管（管內(nèi)盛任氏液與肝素）→結(jié)扎備用線（套管＋左右主動脈）→剪斷動脈→結(jié)扎并剪斷靜脈。固定套管并用任氏液換洗血液；進(jìn)入RM6240系統(tǒng)。第六頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三第七頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三方法與步驟觀察并記錄正常心搏曲線；向套管內(nèi)分別加入以下溶液（0.65%NaCl溶液置換任氏液、0.5%NaCl溶液1-2d、1%KCl溶液1-2d、2%CaCl2溶液1d、1:5000腎上腺素溶液1-2d、1:10000乙酰膽堿溶液1-2d），觀察并記錄曲線變化。第八頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三第九頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三0.65%第十頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三0.5%NaCl競爭性抑制Ca內(nèi)流胞漿內(nèi)[Ca]↓心肌細(xì)胞收縮力↓第十一頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三第十二頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三第十三頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三腎上腺素：主要與心肌的β1受體結(jié)合，產(chǎn)生正性變時、變力和變傳導(dǎo)效應(yīng)。乙酰膽堿：與心肌細(xì)胞的M2受體結(jié)合，產(chǎn)生負(fù)性變時、變力和變傳導(dǎo)效應(yīng)。具體作用機制見《大學(xué)生理學(xué)》P236~239、P248第十四頁，共十六頁，編輯于2023年，星期三注意事項制備蛙心標(biāo)本時，勿傷靜脈竇；各溶液作用一旦出現(xiàn)，應(yīng)立即用新鮮任氏液換洗，以免心肌受損，而且待心跳恢復(fù)正常后方能進(jìn)行下一步實驗；蛙心插管內(nèi)液面應(yīng)保持恒