生物學(xué)活性檢測(cè)

生物學(xué)活性檢測(cè)第一頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三2023/6/12第二頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三2023/6/12第三頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三2023/6/12第四頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三1.生物學(xué)活性檢測(cè)必要性藥品有效性必須是療效確切，且含有特定的有效活性成分和一定濃度含量凡是不能用理化方法測(cè)定其含量或有效成分或雖有理化方法測(cè)定但不能真實(shí)反映臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的藥物效價(jià)測(cè)定，可用生物測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定生物學(xué)活性測(cè)定是生物測(cè)定的重要內(nèi)容2023/6/12第五頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三2.生物技術(shù)藥物的生物學(xué)活性檢測(cè)方法體內(nèi)：動(dòng)物模型分析體外：細(xì)胞（組織、器官）培養(yǎng)分析酶促反應(yīng)法、免疫學(xué)法（體外）2023/6/12第六頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三

蛋白藥物的細(xì)胞學(xué)活性檢測(cè)原理：相同條件下通過(guò)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組對(duì)特定細(xì)胞生理或生存狀況的影響程度來(lái)判斷藥物的活性例：抗腫瘤藥物活性檢測(cè)2023/6/12第七頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三例：抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測(cè)腫瘤細(xì)胞（對(duì)數(shù)期）胰蛋白酶處理細(xì)胞懸液稀釋96孔板培養(yǎng)24h實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組設(shè)置培養(yǎng)4~5d棄去上清液加MTT，37℃繼續(xù)培養(yǎng)4

h小心棄上清，加

DMSO37℃繼續(xù)培養(yǎng)4

h測(cè)定光密度值腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率％＝(1-

OD實(shí)驗(yàn)/OD對(duì)照)

×100％

在酶標(biāo)儀上以實(shí)驗(yàn)波長(zhǎng)為570

nm，參比波長(zhǎng)為450

nm2023/6/12第八頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三細(xì)胞培養(yǎng)分析優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間較短（1~3d）成本低、重復(fù)性好缺點(diǎn)：不精確如：MTT顯色反應(yīng)2023/6/12第九頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三酶促反應(yīng)、免疫學(xué)法優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單、靈敏、快速、精確缺點(diǎn)：不一定反應(yīng)整體活性2023/6/12第十頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三3.藥物生物學(xué)活性檢測(cè)的意義

2023/6/12第十一頁(yè)，共十二頁(yè)，編輯于2023年，星期三

思考題:1.重組蛋白藥物的生物學(xué)活性檢測(cè)方法主要有哪些？2.抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測(cè)一般步驟？