高中生物-2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)課件設(shè)計(jì)

2.2

動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.2

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)目標(biāo)了解動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、過(guò)程和意義。理解單克隆抗體制備的過(guò)程和應(yīng)用材料:1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么，如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合，動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？人-鼠(想像圖)一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念：

動(dòng)物細(xì)胞融合（cellfusion）也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。

融合形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。2、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性誘導(dǎo)方法：物理方法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒電激等聚乙二醇（PEG)3.融合過(guò)程：

為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？3.融合過(guò)程：滅活喪失感染性保留融合活性4.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能最主要用途：制造單克隆抗體小結(jié)：植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理融合前處理使用的酶誘導(dǎo)方法主要用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性纖維素酶、果膠酶胰蛋白酶

物理方法（離心、振蕩、電激）化學(xué)方法（PEG）物理、化學(xué)方法滅活的病毒獲得雜種植株獲得雜交細(xì)胞、制備單克隆抗體去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合【例1】能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是（）A.離心B.滅活的病毒C.電刺激D.振動(dòng)【例2】融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（）A.具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息B.能無(wú)限增殖C.可形成新個(gè)體D.培養(yǎng)過(guò)程會(huì)貼壁【例3】動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞

BB初試牛刀A強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞）。溫故知新二、單克隆抗體B淋巴細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞記憶B淋巴細(xì)胞分化抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：

產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種效應(yīng)B細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原

讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。

1.單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。2.單克隆抗體的制備

提示3：有什么方法能使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體

的能力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能

力同時(shí)具備呢？一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)①為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白？②會(huì)有哪幾種融合方式？③雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來(lái)的？有何特點(diǎn)？④是否所有的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生專一性抗體？⑤如何大規(guī)模進(jìn)行培養(yǎng)得到大量的單克隆抗體？BB

、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞√體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備。3、單克隆抗體的應(yīng)用（1）作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速（如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物（治療癌癥）(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)單抗制備過(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是？

你學(xué)會(huì)了嗎？?jī)蓚€(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法－－滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞－－雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)課堂小結(jié)重點(diǎn)1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒(méi)經(jīng)過(guò)免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞D3.單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C4.“生物導(dǎo)彈”是指 （）A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物

D有夢(mèng)想，才會(huì)有創(chuàng)造！