臨床技術操作規(guī)范病理部分

《臨床技術操作規(guī)范?病理學分冊》總

則一、為提高病理學診斷質量，促進臨床工作，依據《中華人民共和國執(zhí)業(yè)醫(yī)師法》精神，結合醫(yī)院病理科工作的特點，制定本規(guī)范。二、醫(yī)院病理科和承擔醫(yī)院病理科任務的醫(yī)學院校病理教研室的主要臨床任務是通過活體組織病理學檢查（簡稱活檢）、細胞病理學檢查（簡稱細胞學檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病的病理學診斷（或稱病理診斷）。具有一定規(guī)模的病理科，應積極開展教學、培訓病理醫(yī)師和科學研究等項工作。三、病理學診斷是病理醫(yī)師應用病理學知識、有關技術和個人專業(yè)實踐經驗，對送檢的患者標本（或稱檢材，包括活體組織、細胞和尸體等）進行病理學檢查，結合有關臨床資料，通過分析、綜合后，作出的關于該標本病理變化性質的判斷和具體疾病的診斷。病理學診斷為臨床醫(yī)師確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預后和總結診治疾病經驗等提供重要的、有時是決定性的依據，并在疾病預防，特別是傳染病預防中發(fā)揮重要作用。

四、病理學診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關于疾病診斷的重要醫(yī)學文書。當涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭議時，相關的病理學診斷報告書具有法律意義。病理學診斷報告書應由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準予條件適宜的高年資病理科住院醫(yī)師試行簽署病理學診斷報告書。低年資病理科住院醫(yī)師、病理科進修醫(yī)師和非病理學專業(yè)的醫(yī)師不得簽署病理學診斷報告書。五、病理學檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進行的合作行為，是有關臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫(yī)師和病理醫(yī)師雙方皆應認真履行各自的義務和承擔相應的責任。六、病理學檢查申請單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會診邀請單。病理學檢查申請單的作用是：臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關于患者的主要臨床信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結果和手術所見等）、診斷意向和就具體病例對病理學檢查提出的某些特殊要求，為進行病理學檢查和病理學診斷提供重要的參考資料或依據。病理學檢查申請單是疾病診治過程中的有效醫(yī)學文書，各項信息必須真實，應由主管患者的臨床醫(yī)師親自（或指導有關醫(yī)師）逐項認真填寫并簽名。七、臨床醫(yī)師應保證送檢標本與相應的病理學檢查申請單內容的真實性和一致性，所送檢材應具有病變代表性和可檢查性，并應是標本的全部。八、患者或患者的授權人應向醫(yī)師提供有關患者的真實信息（包括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息）。病理醫(yī)師應尊重和保護患者的隱私?；颊呋蚧颊叩氖跈嗳藨ＷC其自送檢材的真實性、完整性和可檢查性。九、病理科應努力為臨床、為患者提供優(yōu)質服務，遵照本規(guī)范的要求加強科室建設，制訂完善的科室管理制度，并實施有效的質量監(jiān)控。十、病理科工作人員應恪盡職守，做好本職工作。病理醫(yī)師應及時對標本進行檢查和發(fā)出病理學診斷報告書，認真對待臨床醫(yī)師就病理學診斷提出的咨詢，必要時應復查有關的標本和切片，并予以答復。病理科技術人員應嚴格執(zhí)行本規(guī)范的技術操作規(guī)程，提供合格的病理學常規(guī)染色片、特殊染色片和可靠的其他相關檢測結果，并確保經過技術流程處理的檢材真實無誤。

病理學檢查常規(guī)第一節(jié)

普通活體組織病理學檢查常規(guī)一、申請單和標本的驗收

(一)病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查(常規(guī)活檢)申請單和送檢的標本。(二)病理科驗收人員必須：1．同時接受同一患者的申請單和標本。2．認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯號條或其他寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送檢的微小標本，必須認真核對送檢容器內或濾紙上是否確有組織及其數量。發(fā)現疑問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。3．認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。4．認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門診號/住院號、送檢日期、取材部位、標本數量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗/影象學檢查結果、手術（包括內鏡檢查）所見、既往病理學檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。5．在申請單上詳細記錄患者或患方有關人員的明確地址、及號碼，以便必要時進行聯絡，并有助于隨訪患者。(三)驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。(四)下列情況的申請單和標本不予接收：1．申請單與相關標本未同時送達病理科；2．申請單中填寫的內容與送檢標本不符合；3．標本上無有關患者姓名、科室等標志；4．申請單內填寫的字跡潦草不清；5．申請單中漏填重要項目；6．標本嚴重自溶、腐敗、干涸等；7．標本過小，不能或難以制做切片；8．其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回，不予存放。(五)臨床醫(yī)師采取的標本應盡快置放于盛有固定液（4%中性甲醛，即10%中性福爾馬林）的容器內，固定液至少為標本體積的5倍。對于需作特殊項目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學、分子生物學等）的標本，應按相關的技術要求進行固定或預處理。(六)病理醫(yī)師只對病理科實際驗收標本的病理診斷負責。(七)病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續(xù)制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。二、申請單和標本的編號、登記(一)病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期并及時、準確編號（病理號），并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機內。嚴防病理號的錯編、錯登。(二)標本的病理號可按年編序，或連續(xù)性（不分年度）編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿（包括計算機錄入）、放置標本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號必須完全一致。(四)病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本的交接制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。(五)在病理科內移送標本時，必須確保安全，嚴防放置標本的容器傾覆、破損和標本的散亂、缺失等。三、標本的預處理標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器，補充足量的固定液；對于體積大的標本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的情況下，及時、規(guī)范地予以剖開，以便充分固定。四、標本的巨檢、組織學取材和記錄對于核驗無誤的標本，應按照下列程序進行操作：①肉眼檢查標本（巨檢）；②切取組織塊（簡稱取材）；③將巨檢和取材情況記錄于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取材的技術操作參見第3章第四節(jié)。

巨檢和取材時的注意事項：(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進行，應配備人員負責記錄。(二)巨檢和取材過程中，應嚴防污染工作人員和周圍環(huán)境。(三)標本一般應經適當固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結核病、病毒性肝炎等）的標本，應在不污染環(huán)境和／或不擴散傳染的原則下，經必要的初步巨檢或切開后，立即置于盛有足量固定液的專用容器內，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。(四)病理醫(yī)師在對每例標本進行巨檢和取材前，應與記錄人員認真核對該例標本及其標志與申請單的相關內容是否一致。若對申請單填寫的內容或／和標本有疑問（例如患者姓名有誤，標本內容、數量、病變特征與申請單填寫的情況不符等），應暫行擱置，盡快與送檢方聯系，查明原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關臨床醫(yī)師共同檢查標本和取材。對于有疑問的標本，在消除疑問前不得進行巨檢和取材，應將有關標本連同其申請單一并暫時妥存。(五)病理醫(yī)師進行巨檢和取材時，記錄人員應根據病理申請單內容，向巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術所見、標本情況（采取部位、數量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者應核對記錄內容。(六)具有醫(yī)學學術價值的標本可攝影存檔，并酌情妥為保存。(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結束后，應由專人立即對錄音內容進行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手錄或用計算機錄入、打?。Ｓ嘘P的錄音資料應保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩周。(八)細小標本取材時，可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。(九)每例標本取材前、后，應用流水徹底清洗取材臺面和所有相關器物，嚴防檢材被無關組織或其他異物污染，嚴防細小檢材被流水沖失。(十)巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進行操作（參見第3章第四節(jié)）。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應在其病理號之后再加編次級號（例如：－1，－2，－3，……；A,，B，C，……等）。(十一)巨檢／取材者和記錄人員應相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標簽準確地置于用于脫水的容器（脫水盒等）內。(十二)標本巨檢和取材后剩余的組織／器官應置入適當容器內，添加適量4%中性甲醛并附有相關病理號和患者姓名等標志，然后按取材日期有序地妥為保存。取材剩余的標本一般保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩周。(十三)病理醫(yī)師在每批標本巨檢和取材后，應與記錄人員共同核對取材內容，并在活檢記錄單／取材工作單上簽名和簽署日期。(十四)取材后剩余的病理標本屬于污染源，應遵照有關規(guī)定處理。(十五)巨檢／取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術人員認真辦理交接手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。五、組織切片制備的基本要求(一)組織制片過程中，應確保切片號與蠟塊號一致。(二)制片工作一般應在取材后2個工作日內完成（不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標本）。(三)制片完成后，技術人員應檢查制片質量，并加貼標有本病理科病理號的標簽。常規(guī)石蠟-HE染色片的優(yōu)良率應≥95%，優(yōu)秀率不<35％。不合格切片應立即重做。切片質量的基本標準參見第3章第一節(jié)的附表。(四)制片過程發(fā)生意外情況時，有關技術人員和技術室負責人應及時向科主任報告，并積極設法予以補救。(五)制片完成后，技術人員應將所制切片與其相應的活檢記錄單／取材工作單等進行認真核對，確認無誤后，將切片連同相關的活檢申請單／活檢記錄單／取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。(六)常規(guī)活檢組織切片制備技術的基本要求參見第3章第一節(jié)。六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理診斷(一)病理醫(yī)師進行病理診斷時：1．應認真閱讀申請單提供的各項資料，必要時（尤其是疑難病例），應向有關臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。2．應認真閱讀活檢記錄單中關于標本巨檢的描述；負責復檢的病理醫(yī)師必要時親自觀察標本，補充或訂正病變描述，指導或親自補取組織塊。3．應了解患者既往病理學檢查情況（包括切片的病理診斷和有關文字記錄）：①由本病理科既往受理者，必須及時調閱相關切片等病理學檢查資料；②非本病理科既往受理者，應積極協(xié)助患者從有關病理科商借相關切片等病理學檢查資料參閱。4．應在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術人員進行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關技術檢測。5．應全面、細致地閱片，注意各種有意義的病變。(二)進行初檢的病理醫(yī)師，應提出初診意見，送交主檢病理醫(yī)師復查。(三)主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例,可以：1．提請科內上級醫(yī)師會診或進行科內讀片討論（會診）；2．與有關臨床醫(yī)師進行臨床－病理會診；3．必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關人員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學診斷報告書的原因等；4．于簽發(fā)病理學診斷報告書前進行科外病理會診(“診斷報告前病理會診”)，應將各方面會診意見的原件（或復印件）作為檔案資料貼附于有關患者的活檢記錄單中備查；5．必要時，建議臨床醫(yī)師重復活檢，或密切隨查。(四)主檢病理醫(yī)師根據常規(guī)切片的鏡下觀察，結合標本巨檢、相關技術檢查結果、有關臨床資料和參考病理會診意見等，作出病理診斷或提出病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關欄目中、并親筆簽名。各方會診意見不一、難以明確診斷時，主檢醫(yī)師可參考會診意見酌情診斷，或在病理學診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫(yī)師參考。(五)對打印的病理學診斷報告書，主檢病理醫(yī)師應與活檢記錄單上的病理診斷文字進行核對，并親筆簽名。［參見本節(jié)下文：“八、常規(guī)活檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)”］七、相關診斷技術的選用病理醫(yī)師可借助于組織化學染色（包括特殊染色）、免疫組織化學染色、電子顯微鏡技術、分子生物學技術、流式細胞技術等相關診斷技術檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進行病理診斷。（參見第4章）八、病理學診斷報告書及其簽發(fā)(一)病理診斷表述的基本類型Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質明確和基本明確的病理診斷。Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質，或是對于擬診的疾病名稱／病變性質有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾?。∽兠Q之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病（即不能做出Ⅰ類或Ⅱ類病理診斷），只能進行病變的形態(tài)描述。Ⅳ類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

(二)病理學診斷報告書的基本內容1．患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢醫(yī)院／科室（住院／門診），住院號／門診號，送檢／收驗日期等。2．巨檢病變和鏡下病變要點描述（一般性病變和細小標本可酌情簡述或省略）。3．與病理診斷相關技術的檢查結果。4．病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類型”）。5．對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及其相關問題附加：①建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、科外病理學會診、密切隨診／隨訪等）；②注釋／討論。

6．經過本病理科或／和科外病理會診的病例，可將各方病理會診意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。(三)病理學診斷報告書的書寫要求

1．病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練、條理和層次清楚。2．病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學檢查申請單／病理學檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由他人代為簽名；主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。3．手書的病理學診斷報告書必須二聯復寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。4．手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關鍵性文字，例如“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數字等，要認真核對，不得有誤。5．計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準確，具有典型（代表）性，放大倍數適當。6．患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤，簽發(fā)報告書的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。7．病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學診斷報告書。(四)病理學診斷報告書的發(fā)送1．病理科自接受送檢標本至簽發(fā)該例病理學診斷報告書的時間，一般情況下為5個工作日以內；

2．由于某些原因（包括深切片、補取材制片、特殊染色、免疫組織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間等）延遲取材、制片，或是進行其他相關技術檢測，不能如期簽發(fā)病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)病理學診斷報告書的原因。3．病理科應有專人發(fā)送病理學診斷報告書。住院患者的病理學診斷報告書應發(fā)送至有關臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和外院患者病理學診斷報告書的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制訂。4．病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續(xù)。5．病理科已發(fā)出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發(fā)；必要時，經病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。九、資料管理

普通活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。十、會

診病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關規(guī)定參見本章第六節(jié)。第二節(jié)手術中快速活體組織病理學檢查常規(guī)

一、概

述(一)

手術中快速活體組織病理學檢查（快速活檢）是臨床醫(yī)師在實施手術過程中，就與手術方案有關的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進行的急會診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。(二)快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內，根據對切除標本的巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術醫(yī)師提供的參考性病理診斷意見。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確診斷。因此，應向臨床醫(yī)師說明快速活檢的：①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和④不宜應用范圍。(三)有關臨床醫(yī)師應于手術前向患者和／或患者授權人說明快速活檢的意義和局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解?；颊吆停蚧颊呤跈嗳藨谟舍t(yī)院制定的《手術中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。(四)主持手術的臨床醫(yī)師應在手術前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫患者的病史，重要的影象學、實驗室檢查結果和提請病理醫(yī)師特別關注的問題等。盡可能不在手術進行過程中臨時申請快速活檢。(五)手術中快速活檢應由經過該項工作訓練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應條件的病理科不應勉強開展手術中快速活檢。(六)負責快速活檢的主檢病理醫(yī)師應了解患者的①臨床情況，②手術所見，③既往有關的病理學檢查情況。二、適用范圍(一)

需要確定病變性質（如腫瘤或非腫瘤／良性腫瘤或惡性腫瘤等），以決定手術方案的標本。(二)了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結轉移等。(三)確定腫瘤部位的手術切緣有無腫瘤組織殘留。(四)確認切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。三、慎用范圍涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術切除的標本。需要此類手術治療的患者，其病變性質宜于手術前通過常規(guī)活檢確定。四、不宜應用范圍(一)疑為惡性淋巴瘤。(二)過小的標本（檢材長徑≤0.2cm者）。(三)術前易于進行常規(guī)活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據核分裂象計數判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據腫瘤生物學行為特征而不能依據組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標本（例如結核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。五、申請單和標本的驗收、編號和登記手術中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和登記參照本章第一節(jié)中“一”至“三”項的有關規(guī)定。六、標本的巨檢、取材和記錄(一)病理科驗收快速活檢申請單和標本后，應參照本章第一節(jié)中“四”項的有關規(guī)定，立即進行標本的巨檢、取材和記錄。(二)主持快速活檢的病理醫(yī)師應親自參與標本的巨檢和取材（或指導取材）。(三)通常選取具有代表性的病變組織1～2塊，需要時，增加取材塊數。七、組織切片的制備(一)冷凍切片1．完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應為20～25分鐘。2．恒冷箱切片機制片：至少應于切片前1小時開機預冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規(guī)開展冷凍切片快速病理學診斷的病理科，恒冷箱切片機宜處于24小時恒溫待機狀態(tài)。3．其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節(jié)。(二)快速石蠟切片1．完成快速石蠟－HE染色切片的時間通常為30分鐘。2．快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節(jié)。(三)制備好的冷凍／快速石蠟-HE染色切片，加貼標有本病理科病理號的標簽后，立即交由主檢病理醫(yī)師進行診斷。八、手術中快速活檢會診意見及其簽發(fā)(一)有條件的病理科宜由兩位中／高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手術中快速活檢，應由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40分鐘內發(fā)出；同一時間段內相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次標本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。(三)對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應向手術醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確病理診斷。(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形式報告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）?？焖倩顧z病理診斷意見報告書發(fā)出前應認真核對無誤。九、冷凍切片后剩余組織的處理(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱“凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍?！保?，均應保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。（二）“凍對”／“凍?！苯M織的蠟塊和切片需與同一病例手術后送檢的切除標本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。(三)當冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應以石蠟-HE片診斷為準。十、資料管理

手術中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。第三節(jié)

細胞病理學檢查常規(guī)一、申請單和標本的驗收、編號和登記(一)

病理科應參照本章第一節(jié)（常規(guī)活體組織病理學檢查常規(guī)）中“一”和“二”項的規(guī)定，進行細胞病理學檢查(細胞學檢查)申請單和標本的驗收、編號和登記。(二)用于細胞學檢查的標本必須新鮮，取材后應盡快送至病理科(或細胞病理學室,下同)；病理科核驗檢材無誤后，應盡快進行涂片和染色。(三)病理科驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內容進行改動。二、細胞涂片、組織印片和壓片的基本要求(一)細胞涂片、組織印片和壓片（參見第3章第二節(jié)）。(二)腫物細針穿刺物涂片1.應由掌握細針穿刺技術的注冊醫(yī)師或注冊助理醫(yī)師，按照細針穿刺技術操作常規(guī)，親自對確有適應癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。2.適應癥：通常為：(1)淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結、前列腺、皮下軟組織和骨等。(2)胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。(3)腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內、腹膜后和盆腔內等。(4)顱內腫物。3．禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進行性肺氣腫、出血性體質及“暈針史”等。（三）對于核驗無誤的送檢標本，應立即依序進行：①涂片、印片或壓片，②固定和③染色。三、細胞病理學診斷報告書及其簽發(fā)(一)

細胞病理學診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾?。ㄓ绕涫悄[瘤）提供重要參考依據。(二)細胞病理學診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫(yī)師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。(三)細胞病理學診斷表述的基本類型

1.直接表述性診斷：適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據形態(tài)學觀察的實際情況，對于某種疾?。∽冏龀隹隙ㄐ裕á耦悾⒉煌潭纫庀蛐裕á蝾悾┘毎麑W診斷，或是提供形態(tài)描述性（Ⅲ類）細胞學診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細胞學診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項：“病理學診斷表述的基本類型”]2.間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。Ⅰ級：未見惡性細胞Ⅱ級：查見核異質細胞Ⅱa：輕度核異質細胞Ⅱb：重度核異質細胞Ⅲ級：查見可疑惡性細胞Ⅳ級：查見高度可疑惡性細胞Ⅴ級：查見惡性細胞(四)細胞病理學診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）1.假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關標本中未能查見惡性細胞。假陰性率一般為10%左右。因此，細胞病理學檢查的陰性結果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。2.假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關標本中查見了“惡性細胞”。假陽性率通?！?%。因此，細胞病理學診斷應密切結合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細胞學診斷應持慎重態(tài)度。

(五)細胞病理學診斷報告書的基本內容1．患者的基本情況項目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗日期等。2.細胞病理學診斷的表述（參見上項“細胞病理學診斷報告表述的基本類型”）。3.必要時或條件允許時，可酌情就細胞病理學診斷及其相關問題附加：①某些建議（例如進行其他有關檢查、再做活檢、病理科外病理學會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4.經過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細胞病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。(六)細胞病理學診斷報告書的書寫要求1.參照本章第一節(jié)（“常規(guī)活體組織病理學檢查常規(guī)”）中“八（二）”項的有關規(guī)定。2.計算機圖文打印的細胞病理學診斷報告書提供的細胞學圖象應具有典型（代表）性，放大倍數適當。(七)細胞病理學診斷報告書的發(fā)送1.病理科自接受送檢標本至簽發(fā)細胞病理學診斷報告書的時間，一般情況下為1～2個工作日。2.因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等）不能如期簽發(fā)細胞病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)報告書的原因。3．病理科應有專人發(fā)送細胞病理學診斷報告書。住院患者的細胞病理學診斷報告書應發(fā)送至有關臨床科室；本院門診患者和外院患者的細胞病理學診斷報告書的發(fā)送方法由各醫(yī)院病理科自行制定。4．細胞病理學診斷報告書的經收人員（包括患方人員）必須履行病理科規(guī)定的簽收手續(xù)。5．已由病理科發(fā)出的細胞病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補發(fā)；必要時，經病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。四、資料管理

細胞病理學檢查的資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。五、會

診細胞病理學會診是細胞病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關規(guī)定參見本章第六節(jié)。第四節(jié)

尸體剖檢（尸檢）的診斷常規(guī)一、尸檢的受理(一)必須遵照國家有關規(guī)定受理尸檢。(二)受理尸檢范圍：①普通病理尸檢；②涉及醫(yī)、患爭議的尸檢（由衛(wèi)生行政主管部門指定的尸檢機構實施）。(三)受理尸檢部門：具備獨立尸檢能力的①醫(yī)院病理科，②醫(yī)學院校的病理學教研室，③經醫(yī)政部門注冊的病理診斷中心。(四)主持尸檢（主檢）人員：應是接受過尸檢訓練、具有中級以上專業(yè)職稱的病理學醫(yī)師或病理學教師。必要時，邀請法醫(yī)參與尸檢。(五)申請或委托尸檢方：①有關醫(yī)院，②衛(wèi)生行政部門，③司法機關，④死者的親屬或代理人，或⑤被受理尸檢方認可的其他申請或委托方。(六)申請或委托尸檢方必須向受理尸檢方遞交：①死者的死亡證明，②有申請或委托方當事人簽名、負責人簽名和加蓋委托單位公章的尸檢申請書或委托書，③逐項認真填寫的尸檢申請書（包括死者的臨床資料要點和其他需要說明的情況）。(七)死者親屬或代理人簽署說明尸檢有關事項的《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》（由受理尸檢方制定），確認以下事項：1．同意有關受理尸檢機構對于死者進行尸檢。2．授權主持尸檢人員根據實際需要確定尸檢的術式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式。3．主持尸檢人員負責遺體尸檢后的體表切口縫合，不參與尸檢后遺體的其他安置事項。4．明確新生兒和圍生期胎兒尸檢后的尸體處理方式。5．同意對尸檢過程進行必要的攝影、錄像，并確認是否同意教學示教。6．尸檢病理學診斷報告書可提供死者所患的主要疾病和死因；難以作出明確結論時，可僅提交病變描述性尸檢報告。7．尸檢病理學診斷報告書發(fā)送給委托尸檢方。(八)下列情況的尸檢可不受理：1．委托尸檢手續(xù)不完備者（包括未按規(guī)定交納尸檢費用者）；2．拒簽《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》者（包括對于尸檢的術式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式等持有異義從而影響尸檢實施和尸檢結論形成者）；3．委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達成協(xié)議者；4.死者死亡超過48小時未經冷凍、或冷凍超過7日者；5．疑因或確因烈性傳染病死亡的病例，尸檢方不具備相應尸檢設施條件者；6．因其他情況不能受理者。二、尸檢前的準備工作(一)尸檢室環(huán)境的準備。(二)尸檢基本器材和工作服的準備。(三)安排實施尸檢的專業(yè)人員和技術人員。(四)將擬行剖驗的尸體移送至尸檢室。(五)主持尸檢人員確認尸檢手續(xù)完備（死亡證明、尸檢申請書或委托書、死者的臨床資料要點等），并請死者親屬或委托代理人確認尸體。(六)主持尸檢人員認真閱讀、熟悉有關死者的臨床資料要點（必要時閱讀死者的生前病歷），了解申請或委托方對于尸檢的要求和尸檢時需要注意的問題。(七)進行尸檢編號并登錄于尸檢登記薄上。(八)尸檢過程現場文字（或語音）記錄、攝影或錄象工作的準備。三、尸檢的衛(wèi)生管理(一)制訂尸檢室衛(wèi)生管理制度并認真實施。(二)尸檢人員和尸檢室內其他人員必須認真做好個人和工作環(huán)境的衛(wèi)生防護。(三)疑為或確診為烈性傳染病死者的尸檢，必須遵照傳染病尸檢的有關規(guī)定進行操作。(四)尸檢結束后衛(wèi)生處置1．認真清洗尸檢臺和尸檢室，并進行環(huán)境消毒。2．認真清洗尸檢工作服和器械等，并進行消毒。3．按照有關規(guī)定認真處理尸檢污物。4．尸檢人員在專用衛(wèi)生間內淋浴。5．進行上述各項衛(wèi)生處置過程中必須嚴防污染有關人員和尸檢室內、外環(huán)境。四、尸檢的技術操作尸檢的技術操作規(guī)范參見第3章的第三節(jié)。五、尸檢組織的切片制備尸檢組織切片制備的技術操作規(guī)范參見第3章第一節(jié)。六、尸檢組織的病理學相關技術檢查尸檢組織病理學相關技術檢查的規(guī)范參見第4章。七、尸檢組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷(一)光鏡檢查切片，客觀地描述和記錄各系統(tǒng)、器官的病變要點；(二)在綜合鏡檢和巨檢（肉眼檢查）所見的基礎上，結合死者生前的臨床資料等形成尸檢的病理診斷。(三)有關鏡檢診斷的其他事項參見本章第一節(jié)的一（六）項（“組織切片的光學顯微鏡檢查和病理學診斷”）。八、尸檢檔案資料(一)基本內容1.一般資料：包括死者的尸檢號、姓名、性別、年齡、籍貫、民族、出生地、住址、死亡時間、尸檢時間和地點、相關醫(yī)院（臨床科室、住院號／門診號／急癥號）、委托或申請尸檢單位及主持尸檢人員和助手等。2.尸檢申請書或委托書。3.有關的臨床資料。4.由死者親屬或代理人簽署的《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》。5.尸檢所見（附有必要的圖像資料）。包括：

(1)對有關尸體及其死亡征象的確認。(2)體表檢查所見。(3)體腔（胸腔、心包腔、腹腔）檢查所見。(4)臟器檢查所見：依序逐個描述各臟器的肉眼檢查和光學顯微鏡檢查所見。(5)特殊檢查結果。例如毒物、病原生物學等檢查（附有關檢查報告）。

6.病理學診斷和尸檢病理學診斷報告書副本（參見下項“尸檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)”）。7.死亡原因。8.小結。9．討論。包括：(1)主要疾病及其診斷依據、發(fā)生和發(fā)展特點。(2)主要疾?。∽冎g、主要疾病與繼發(fā)／伴發(fā)疾病之間的相互關系。(3)從臨床與病理相結合的角度，參考有關文獻，進行討論。

10.其他資料。包括照片及其底片、幻燈片、圖表、臨床病理討論記錄、參考文獻和電子信息資料等。(二)受理尸檢單位，應積極實施尸檢檔案資料的計算機管理。九、尸檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)

(一)尸檢病理學診斷報告書(簡稱尸檢報告書或尸檢報告)是關于尸檢的正式病理學報告。(二)尸檢病理學診斷報告書的基本內容：①主要疾?。ㄅc死亡直接相關的疾病）；②繼發(fā)疾?。ㄅc主要疾病密切相關的疾?。?；③伴發(fā)疾?。ㄅc主要疾病無密切關系的疾病）?？勺们檫M行死因分析、小結和討論。疾病診斷力求使用國際醫(yī)學規(guī)范術語，并按各疾病的致死重要性和因果關系排序。(三)尸檢病理學診斷報告書必須由主檢人員簽名后發(fā)出。主檢人員簽名的字跡應能辨認。(四)尸檢病理學診斷報告書應一式兩份（正本和副本），兩份報告書具有同等效力。報告書的正本隨同其他尸檢資料一并歸檔，報告書的副本發(fā)給委托尸檢方。手書的尸檢病理學診斷報告書應二聯復寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得涂改。(五)尸檢病理學診斷報告書通常在尸檢后45個工作日內發(fā)出。由于病變復雜或其他原因不能按時發(fā)出尸檢病理學診斷報告書時，可酌情延遲發(fā)出并應向委托尸檢方說明遲發(fā)原因。十、尸檢資料的管理

尸檢資料必須妥善管理，有關規(guī)定參見本章第五節(jié)。第五節(jié)

病理學檢查資料的管理一、概

述(一)常規(guī)活檢、手術中快速活檢、細胞病理學檢查和尸檢等的文字資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片等）以及其他相關資料均為有價值的醫(yī)學資料，皆由受理病理學檢查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等），并有專人管理。應積極實行病理學檢查資料的計算機管理。(二)各種病理學檢查的文字資料應裝訂成冊保存。(三)據以做出常規(guī)活檢、快速活檢、尸檢病理學診斷的原始組織學切片和查見腫瘤細胞或可疑腫瘤細胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細胞的玻片，于診斷報告書發(fā)出后保存2周。二、患者查詢病理學檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。三、活檢、尸檢大體標本的保存期限(一)活檢：自簽發(fā)病理學診斷報告書之日起保存2～4周，具體保存期限由各醫(yī)院自行規(guī)定。(二)尸檢1.普通病理尸檢：自簽發(fā)病理學診斷報告書之日起保存3個月。2.涉及醫(yī)、患爭議的尸檢：按照尸檢前有關各方簽署的協(xié)議辦理。四、病理學檢查資料的借用

(一)醫(yī)院必須制訂關于借用病理學檢查資料的辦法并嚴格實施。

(二)關于患方借用病理組織學切片，應注意：1．患方人員申請借用有關患者的活檢切片、尸檢切片時，應按照醫(yī)院制定的有關規(guī)定辦理手續(xù)。2．申請借用切片的患方人員必須：①出示本人身份證等有效證件并保留其復印件；②填寫借片申請單并簽名；③支付規(guī)定的借片押金（待歸還切片時退還）。3．病理科據以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相關病例的復制切片。復制切片借出（或售出）前，應確認該切片的病變與原切片相同或基本相同。4.患方借出的切片應妥善保存，必須在規(guī)定的期限內歸還?；挤浇璩龅那衅粲衅茡p、丟失等，應按規(guī)定支付賠償金，并承擔相應責任。5．病理科因故不能向患方出借或出售有關切片時，由雙方協(xié)商解決病理學會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進行遠程病理會診。

(三)關于患方借用細胞病理學玻片1．一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù)參見上項(二)。2．一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協(xié)商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片。

(四)關于借用檢材組織的石蠟包埋塊1.活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復制的病理學檢查資料，屬于診斷病理學的重要基礎檔案，原則上不外借。必要時，可由病理科向患方提供未經染色的切片（通稱白片）。3.患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實需要有關病例病理檢材的蠟塊，可由有關病理科雙方協(xié)商解決。

第六節(jié)

病理學會診一、具有一定規(guī)模的病理科應定期舉行科內病理會診或讀片討論會。二、積極推動建立地域性病理會診中心。三、加強臨床－病理會診。四、應由具有高級職稱的病理醫(yī)師接受病理科內、外的病理學會診。

五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學會診咨詢意見書》，并在該《意見書》上寫明：“病理醫(yī)師個人會診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復印件貼附于有關患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。六、加做相關技術檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫(yī)師應在《意見書》中予以說明，并向患方進行適當解釋。七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應考慮到做出原診斷時期的診斷病理學理論、技術水平、相應病變／疾病的定性診斷標準和原診斷病理科當時的客觀條件。八、有條件的病理科可開展遠程病理會診。第七節(jié)

病理科的基本設施一、病理科基本設施的指導原則(一)保證病理科完成基本工作任務。(二)保護病理工作人員免受污染。(三)保護環(huán)境免受污染。二、病理科的基本工作空間(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨立的房間內進行：1．收發(fā)室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發(fā)放，病理資料查詢等）2．巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材）3．常規(guī)切片前的預處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）4．制片室（石蠟切片／冷凍切片／細胞學涂片的制做和染色）5．病理組織學診斷室6．細胞病理學診斷（酌情附設組織穿刺室）7．病理會診室8．病理檔案資料室9．大體標本制作室和陳列室10．尸檢室及其配套空間（三級醫(yī)院建立，包括準備室、尸檢室、肉眼檢查和取材室、更衣／淋浴室、標本儲藏室等）11．儲藏室12．淋浴室13．辦公室(二)較高技術層次的病理科還應設置：1．特殊染色和免疫組織化學染色實驗室2．細胞遺傳和分子病理學實驗室3．其他特殊檢測實驗室（例如超薄切片制備、電鏡檢測、細胞培養(yǎng)、流式細胞術和其他新技術實驗室）4．圖書／電子信息／學術活動室5．進修病理醫(yī)師教室。三、病理科常規(guī)活檢和快速活檢工作的基本設施(一)收發(fā)室1．辦公設施2．紫外線消毒柜（用于活檢申請單等消毒）3．合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)4．其他相關設備(二)病理標本巨檢和取材室1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2．室內紫外線消毒設備3．室內高效通風設施4．封閉式高效能通風柜廚(用于巨檢和取材，應便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設備)5．合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）6．流水沖洗裝置7．冷水和熱水供給系統(tǒng)8．自動錄音設備（酌情安裝，用于記錄醫(yī)師巨檢標本時的語言描述）9．標本儲存柜（安裝排風設備）10．隔離服裝（消毒后使用）11．其他相關設備。(三)常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室1．排放有毒物質的室內高效通風設施（用于組織塊和石蠟切片的(人工脫水流程）2．符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）3．室內紫外線消毒設備4．封閉式高效能通風柜廚（用于人工脫水流程）5．實驗臺6．脫水設備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機7．組織塊石蠟包埋機8．石蠟切片機*9．恒溫冷凍切片機*10．石蠟快速切片機［*9和10：兩項皆配備或配備一項］#11．一次性切片刀及其配套部件#12．切片刀和磨刀機

［#11和12：兩項皆配備或配備一項］13．冰箱14．恒溫箱15．烤箱16．有關試劑和試劑柜17．天平18．染色用器具19．普通光學顯微鏡（用于染色質量控制）20．其他相關設備(四)特殊染色和免疫組織化學染色實驗室1．用于染色的實驗室環(huán)境設施和染色的常規(guī)設備［參見上文：(三)常規(guī)切片的預處理室和制片室］2．微波爐或其他抗原修復設備3．有關試劑和試劑柜4．自動免疫組化染色儀（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）5．其他相關設備(五)病理組織學診斷室和病理會診室1．雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺）*2．雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓示教）*3．計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）*4．顯微攝影設備，計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備

[*2～4：具有一定規(guī)模的病理科配置]5．遠程會診系統(tǒng)（酌情）6．其他相關設備(六)病理檔案資料室1．用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具2．計算機和打印機（酌情連接局域網，用于病理學檢查資料的儲存和調閱）3．秘書辦公設施（具有一定規(guī)模的病理科）4．其他相關設備(七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的病理科應設立圖書資料室）(八)病理大體標本制作室和陳列室1．制作病理大體標本的工具2．用于陳列病理大體標本的展覽柜（配備照明裝置）3．其他相關設備(九)辦公室：必要的辦公設備(十)儲藏室：必要設施(十一)淋浴室：必備設施四、細胞病理學檢查工作的基本設施(一)腫物穿刺取材室：1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2．室內紫外線消毒設備3．用于實施穿刺術的檢查床、椅4．穿刺用器械和器械柜5．穿刺用、急救用藥物和藥品柜6．其他相關設備(二)細胞學涂片制片室：1．用于染色的實驗室環(huán)境設施和常規(guī)設備［參見本節(jié)的三(三)項：“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)／快速制片室”］)2．可調速離心機3．自動細胞病理學檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）4．其他相關設備(三)細胞病理學診斷室：參見本節(jié)的三(五)項（病理組織學診斷室和病理會診室）。(四)獨立設置（不隸屬于病理科）的細胞病理學科室：需要其他必要空間的基本設備（參見本節(jié)的“三、病理科常規(guī)和快速活檢工作的基本設備”）。五、尸檢工作的基本設施(一)

尸檢準備室1．尸檢專用器械和柜具2．參與尸檢人員用隔離用衣物和消毒器物3．辦公設施4.消毒設施5.其他相關設備(二)

通尸檢室1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2．室內紫外線消毒設備3．室內高效通風設施4．設計合理、適用的尸檢臺［具有合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池），便于清洗、消毒。］5．適宜的照明裝置6．冷水和熱水供給系統(tǒng)7．階梯式看臺（示教用）8．其他相關設備(三)傳染病用尸檢室：嚴格按照關于傳染病管理法規(guī)的要求建設。(四)更衣／淋浴室：必備設施(五)病理標本巨檢和取材室［參見本節(jié)的三(二)項：“病理標本巨檢和取材室”］(六)常規(guī)切片室：隸屬于病理科的尸檢室可不另設（參見本節(jié)的三(三)項：“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)／快速制片室”）(七)標本儲藏室：必要設施

六、病理學相關技術實驗室的基本設施應用特殊染色和組織化學、免疫組織化學、塑料包埋組織切片制備、電子顯微鏡超微病理診斷檢材制備、圖像分析、流式細胞分析（FCM）、聚合酶鏈反應（PCR）、細胞和分子細胞遺傳學、病理學攝影技術和其他新開發(fā)、引進的病理學相關技術的病理科，應個根據有關技術要求，建立具有必備基本設施的實驗室。第三章

病理學基本技術操作第一節(jié)

病理組織學診斷檢材的制備技術一、組織的固定㈠凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的5~10倍。置放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室切取的標本置放于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切片。㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應預先多量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為4~6小時，大標本為18~24小時或更久。㈢根據病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用其他適宜的固定液進行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。㈣器官、組織固定的基本方法［另參見本章第四節(jié)（病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術）］1．食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點暴露黏膜面或內表面的病變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。2．肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開，切成數片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。3．肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。4．腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達于腎盞），再行固定。5．淋巴結：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數片（厚2~3mm），繼續(xù)固定。6．骨組織：先鋸成小片（若是長骨應作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進行脫鈣。7．微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或濾紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內進行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。8．凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。㈤多數固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件下進行操作。㈥組織塊的切取和固定：①由較大標本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應與標本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3cm(不應>0.5cm)，面積一般在1~1.5×1~1.5以內。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應切片的核對。③固定組織塊的固定液量，一般應為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。㈦常用固定液

1．4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液甲醛（40%）100ml

無水磷酸氫二鈉

6.5g

磷酸二氫鈉

4.0g

蒸餾水

900ml2．乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液

甲醛（40%）100ml

95%乙醇900ml［說明］一般組織塊經乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內脫水。

3．Carnoy固定液

無水乙醇60ml

氯仿

30ml

冰醋酸

10ml［說明］組織化學染色的常用固定液，組織經Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。

4．Zenker固定液

升汞

5.0g

重鉻酸鉀2.5g

硫酸鈉

1.0g

蒸餾水（加至）100ml［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進行脫汞沉淀處理。

5．Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液（約1.22%）

75ml

甲醛（40%）

25ml

冰醋酸5ml［說明］本液臨用時配制。組織塊置于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數小時）。經Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）

6．過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）

A液：賴氨酸

1.827g

蒸餾水

50ml

0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)

50ml

B液：8%多聚甲醛水溶液

100ml［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細胞結構和抗原性保存較好。7．B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液

無水醋酸鈉1.25g

升汞

6.0g

蒸餾水

90ml［說明］將以上物質混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100ml）。8．丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備㈠組織塊依序進行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內不得有明火，局部環(huán)境應有良好的通風和消防設施。㈢常規(guī)切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間）1．水洗：用流水沖洗已經固定的組織塊30min。2．脫水（常溫下）（1）乙醇－甲醛（AF）液固定

60~120min（2）80%乙醇

60~120min（3）95%乙醇Ⅰ

60~120min（4）95%乙醇Ⅱ

60~120min（5）無水乙醇Ⅰ60~120min（6）無水乙醇Ⅱ60~120min（7）無水乙醇Ⅲ

60min［注意事項］①未經充分固定的組織不得進入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進脫水。④脫水試劑應及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應將兩者分開進行脫水。⑥組織置于無水乙醇內的時間不宜過長（以免硬化）。⑦丙酮脫水性能強，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。3．透明（1）二甲苯Ⅰ

20min（2）二甲苯Ⅱ

20min（3）二甲苯Ⅲ

20min［注意事項］①二甲苯的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應及時過濾、更換。④組織經二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應查找原因并妥善處理。4．浸蠟

（1）石蠟Ⅰ（45~50℃）

60min（2）石蠟Ⅱ（56~58℃）

60min（3）石蠟Ⅲ（56~58℃）60min［注意事項］①熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內或水浴中（70℃）進行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經二甲苯適度透明后方可轉入浸蠟過程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應及時過濾、更換。5．包埋（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。（2）將與組織塊相關的病理號小條置入包埋模具內熔蠟的一側。（3）待包埋模具內的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側（編號應清晰可見）。（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。（7）使用包埋機的方法按有關廠商的說明書操作。（8）注意事項

①應將組織塊嚴格分件包埋。包埋時一定要首先認真核對組織塊的病理號（包括亞號）、塊數和取材醫(yī)師對包埋面的要求，準確地包入相應的病理號小條。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當班負責人取得聯系，及時處置。②必須嚴防各種異物污染，勿將無關組織（包括縫線、紙屑或其他異物（尤其是硬質異物）埋入蠟塊內。③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟凝固。④包埋用的熔蠟應純凈，熔點適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點為56~58℃）。⑤包埋用熔蠟使用前應將先靜置沉淀、過濾。⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應<65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。

6．切片（1）切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應及時更新。（2）載玻片必須潔凈、光亮。（3）將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。（4）將蠟塊固定于持支持器上，并調整蠟塊和刀刃至適當位置（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。（5）細心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。（6）修塊（粗切）：用右手勻速旋轉切片機輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μm。［注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現了有意義病變而進行的深切片），應盡量少修塊，以盡量好地獲得有關病變的連續(xù)性。］（7）調節(jié)切片厚度調節(jié)器（一般為4~6μm），進行切片，切出的蠟片應連續(xù)成帶，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。（8）以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。［注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認真清理水面，不得遺留其它病例的組織碎片，以免污染。］（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。蠟片應置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。（10）必須立即在置放了蠟片的載玻片一端（待貼標簽的一端），用優(yōu)質記號筆或刻號筆準確、清楚標記其相應的病理號（包括亞號）。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］（11）將置放了蠟片的載玻片呈45℃角斜置片刻；待載玻片上的水分流下后，將其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可進行染色。（12）注意事項①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質量直接影響切片制備。切片過程中遇到的困難首先應注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。②切片機的質量是制備優(yōu)質切片的重要前提。要使用質量好的切片機，規(guī)范地切片，精心維護切片機。③經由內窺鏡、穿刺等獲取的細小組織，應間斷性連續(xù)切片多面（一般至少制備6張蠟片，必要時制備更多張）。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預制蠟片備用。④切片人員應細心操作，防范被切片刀具割傷。㈣常規(guī)切片的自動組織處理機操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間，總計需要14小時）1．乙醇－甲醛（AF）固定液2×60min2．95%乙醇Ⅰ

2×60min3．95%乙醇Ⅱ

2×60min4．無水乙醇Ⅰ

60min5．無水乙醇Ⅱ

60min6．二甲苯Ⅰ

30min7．二甲苯Ⅱ

30min8．石蠟Ⅰ

30min9．石蠟Ⅱ

60min10．石蠟Ⅲ

90min11．包埋（1）手工常規(guī)包埋：參見上述的“㈠手工操作”項。（2）用組織包埋機時，按有關廠商說明書的規(guī)定操作。

13．切片：參見上述的“㈠手工操作”項。14．注意事項（1）必須按有關說明書的規(guī)定，使用和維護自動組織處理機、包埋機、磨刀機、封蓋玻片機等儀器等。（2）要嚴防因停電、機械故障等造成的組織塊損壞。一旦發(fā)生此類事故，必須及時向科主任報告，盡快采取應急措施妥善處置。（3）使用自動組織處理機時：①合理設定的運行時間（充分利用夜間）。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應經常過濾，保持清潔；應經常檢查試劑的濃度，及時更新。④對于多量組織塊，可按其大小分批進行處理；小塊組織可適當縮短處理時間。三、快速石蠟包埋組織切片的制備㈠煮沸固定切片法1．固定：切取大小適宜（厚度<2mm）的組織塊，盡快置入裝有5~8ml10%中性4％甲醛的試管中煮沸1min，然后已入冷水中。2．脫水（1）將已經煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至<1.5mm，隨即置入盛有5~8ml丙酮的試管中，煮沸2min，然后將丙酮傾棄。（2）再向該試管中重新加入5~8ml丙酮并煮沸2min。如此重復3~4次。3．浸蠟：將已經丙酮脫水的組織塊由試管中取出，用吸水紙去除其表面液體，隨即置入75~80℃熔化的石蠟中，待組織塊下沉、不再出現氣泡時（約需30s），即可包埋。4．包埋、切片和染色。（1）用熱鑷子將預制的蠟塊表面熔化，埋入已經浸蠟的組織塊。（2）待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后，即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻，使蠟塊表面平整。（3）將蠟塊置入冰水中，使其變硬。（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。（5）將載玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。（6）迅速進行HE染色。5．注意事項（1）為了盡量縮短制片時間，必須預先作好有關準備工作，備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴（或其他引火器）、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等，放在固定部位待用。（2）全部制片過程一般在20~25min內完成。（3）制片后剩余組織塊應作常規(guī)石蠟包埋切片染色，進一步診斷。（4）含脂肪較多的組織，須經多次丙酮處理。（5）用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應及時過濾、更換。（6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進行上述各項流程時，2m距離內不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應用隔水溫箱，不得使用干烤箱操作。㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法（參照有關廠商的說明書操作）。四、冷凍組織切片的制備㈠應用恒冷箱切片機制備切片：是目前最適用方法。恒冷箱切片機種類較多，應嚴格按有關廠商的說明書操作。用于切片的標本必須未曾固定。㈡應用開放式冷凍切片機制備切片1．二氧化碳制冷切片

（1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機上的切片刀接近組織塊表面。（2）間斷開放液態(tài)二氧化碳桶的開關，噴凍組織塊和切片刀，使組織塊凍結和切片刀制冷。（3）迅速移動切片刀進行切片：先將組織塊修平，然后調節(jié)厚度至8~12μm處進行切片。（4）用毛筆將切片展開，貼附于載玻片上，稍干后，置于冷凍切片固定液中固定1min，隨即進行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。（5）組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷凍切片。2．半導體致冷切片（1）切片刀與持刀器之間要間隔一層云母片或硬紙片。將冷刀致冷器粘在刀面上。（2）將組織冷凍臺安裝在半導體切片機上。（3）將冷凍臺和切片刀致冷器上的導線連接在控制臺直流電源上（注意：正負電極不可接反）。（4）連接致冷器的冷卻水管并開始放水，然后開啟電源；冷卻水管中的水流量不宜過大，在使用過程不得斷水。（5）調整冷凍溫度調節(jié)器，至切片刀和冷凍臺呈現霜凍。（6）將新鮮組織塊或已固定的組織放在冷凍臺中央，滴加水或OCT，或用水調成糊狀的甲基纖維素于組織塊周圍（將組織塊包埋）。（7）待組織塊冷凍適當后，進行切片。（8）對于未經固定的新鮮組織，用毛筆將制作滿意的切片展平，立即裱貼于蓋玻片或載玻片上，待冷凍的切片剛要融化時，立即將其置于冷凍切片固定液中固定1min。對于已經固定的組織塊，可用毛筆將制作滿意的切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進行染色。（9）切片完畢后，先關閉電源，再關閉冷卻水，待冰霜融化后擦干機器，加罩。3．甲醇致冷切片（按有關廠商的儀器說明書操作）。4．氯乙烷致冷切片（1）將新鮮的或已經固定的組織塊置于支持器中央，加少許水或OCT。（2）連續(xù)噴射氯乙烷于組織塊上，待組織塊凍結后，改為間歇噴射，使凍結適度，立即切片。使用氯乙烷時應注意防火、防爆。（3）進行組織切片的裱貼、固定和染色（與上述方法相同）。㈢注意事項1．制作冷凍切片所需的試劑和設備等應處于隨時可供使用狀態(tài)。2．切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快置于冷凍組織切片機上制備切片。3．調節(jié)冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度切片易碎。4．冷凍切片固定液（1）乙醚-乙醇液

無水乙醚

1份

95%乙醇

1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇

100ml冰醋酸

3～5滴五、脫鈣方法骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進行切片。骨組織脫鈣前需先行固定。㈠常規(guī)脫鈣法：1.將骨組織鋸成薄片（約1×1×0.3cm）。2.在AF中或4％中性甲醛中固定6～12h。3.將骨片置于5%硝酸（急需時可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可入時為止，約需12~24h（小塊骨組織脫鈣僅需2~3h），其間可更新脫鈣液2～3次。4.流水沖洗1~2h。5．移入5%甲明礬液，2~4h。6．流水沖洗2~3h。7．按常規(guī)脫水。

8．石蠟包埋。㈡電解脫鈣法：將骨片置于裝有8%硝酸和10%甲酸混合液的電泳槽（有蓋的方形玻璃標本缸或燒杯）內的陽極處，6V直流電源下持續(xù)電解30min~3h，至用針輕刺可入時為止。㈢骨髓組織脫鈣：可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85%）、甲醛（占10%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同時進行固定和脫鈣）。㈣注意事項1．骨片等脫鈣組織的厚度適宜。2．脫鈣組織與脫鈣液的體積比>1:30。3．脫鈣過程中應不時搖動，多次更換脫鈣液。4．脫鈣時間不可過長。5．微波處理可加速脫鈣過程。6．脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。7．用于包埋的石蠟硬度適中（不要過軟或過硬）。六、蘇木素－伊紅（HE）染色HE染色是應用最廣泛的組織病理學常規(guī)染色技術。㈠染色程序1．石蠟切片HE染色（常規(guī)HE染色）（1）二甲苯Ⅰ

5～10min（2）二甲苯Ⅱ

5～10min（3）無水乙醇Ⅰ

1～3min（4）無水乙醇Ⅱ

1～3min（5）95%乙醇Ⅰ

1～3min（6）95%乙醇Ⅱ

1～3min（7）80%乙醇

1min（8）蒸餾水

1min（9）蘇木素液染色

5～10min（10）流水洗去蘇木素液

1min（11）1%鹽酸-乙醇

1～3s（12）稍水洗

1～2s

（13）返藍（用溫水或1%氨水等）5～10s

（14）流水沖洗

1～2min（15）蒸餾水洗

1～2min（16）0.5%伊紅液染色

1～3min（17）蒸餾水稍洗

1～2s（18）80%乙醇

1～2s（19）95%乙醇Ⅰ

2～3min（20）95%乙醇Ⅱ

2～3min（21）無水乙醇Ⅰ

3～5min（22）無水乙醇Ⅱ

3～5min（23）石炭酸-二甲苯

3～5min（24）二甲苯Ⅰ

3～5min（25）二甲苯Ⅱ

3～5min（26）二甲苯Ⅲ

3～5min（27）中性樹膠封固注：①（12）和（13）項可省去，但（14）的沖水時間需延長至10～15min（細胞核顯示更清晰）。②（23）項可用無水乙醇代替；北方地區(qū)可省略。2．冰凍切片HE染色（1）冰凍切片固定

10～30s（2）稍水洗

1～2s（3）蘇木素液染色（60℃）

30～60s（4）流水洗去蘇木素液

5～10s（5）1%鹽酸-乙醇

1～3s（6）稍水洗

1～2min（7）返藍（用溫水或1%氨水等）5～10s（8）流水沖洗

15～30s

（9）0.5%伊紅液染色

1～2min（10）蒸餾水稍洗

1～2min（11）80%乙醇

1～2min（12）95%乙醇

1～2min（13）無水乙醇Ⅰ

1～2min（14）無水乙醇Ⅱ

1～2min（15）石炭酸-二甲苯

2～3min（16）二甲苯Ⅰ

2～3min（17）二甲苯Ⅱ