細(xì)菌負(fù)荷定量檢測(cè)的臨床意義演示文稿

細(xì)菌負(fù)荷定量檢測(cè)的臨床意義演示文稿本文檔共27頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分（優(yōu)選）細(xì)菌負(fù)荷定量檢測(cè)的臨床意義本文檔共27頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分PCR檢測(cè)技術(shù)簡介聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最重要的工具，PCR的出現(xiàn)為分離基因、DNA測(cè)序等提供了一種快捷、高效的方法PCR的原理和細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的DNA復(fù)制過程十分相像，可以使DNA分子在數(shù)小時(shí)(2-4小時(shí))內(nèi)擴(kuò)增230倍以上，使之達(dá)到可以檢測(cè)的水平在臨床實(shí)驗(yàn)中，PCR已用于病原體的檢測(cè)和流行病學(xué)研究，本法對(duì)于傳統(tǒng)培養(yǎng)等檢測(cè)方法繁復(fù)，靈敏度低，特異性差，或尚未建立可靠檢測(cè)方法的微生物尤為適用3本文檔共27頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分41.WatererGetal.CurrentOpinioninInfectiousDiseases2011;24:137–141MI:1.5627治療社區(qū)獲得性肺炎(CAP)時(shí)為何應(yīng)檢測(cè)細(xì)菌負(fù)荷量?本文檔共27頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量的檢測(cè)可預(yù)測(cè)患者預(yù)后既往研究提示，伴膿毒癥風(fēng)險(xiǎn)的CAP患者，其治療方案不同于其他患者最近研究表明細(xì)菌負(fù)荷量高的CAP患者愈后較差，這些發(fā)現(xiàn)改變了膿毒癥的治療模式，細(xì)菌負(fù)荷量與患者是否應(yīng)進(jìn)行膿毒癥相關(guān)治療、是否轉(zhuǎn)入ICU、是否需要進(jìn)行更多的侵入性操作等密切相關(guān)PCR檢測(cè)技術(shù)可準(zhǔn)確檢測(cè)血液中的細(xì)菌負(fù)荷量以及部分特殊病原體的負(fù)荷量細(xì)菌負(fù)荷量不僅能預(yù)示患者的預(yù)后，而且這些數(shù)據(jù)對(duì)重度膿毒癥的發(fā)病機(jī)理及臨床最佳抗生素的選擇具有重要的意義51.WatererGetal.CurrentOpinioninInfectiousDiseases2011;24:137–141本文檔共27頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分6肺炎鏈球菌肺炎疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)MI:6.03632.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分研究簡介研究目的評(píng)估社區(qū)獲得性肺炎(CAP)患者細(xì)菌負(fù)荷量與患者膿毒性休克及預(yù)后的相關(guān)性研究方法一項(xiàng)前瞻性研究，患者均為住院的CAP患者細(xì)菌負(fù)荷量檢測(cè)：采用rt-PCR技術(shù)測(cè)定血標(biāo)本中肺炎鏈球菌的細(xì)菌負(fù)荷量主要研究終點(diǎn)：膿毒性休克的發(fā)生率及需行機(jī)械通氣的患者比例次要研究終點(diǎn)：急性腎功能衰竭(AKI)、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的發(fā)生率及院內(nèi)死亡率72.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分患者細(xì)菌負(fù)荷量分布肺炎鏈球菌肺炎患者細(xì)菌負(fù)荷量分布8患者百分比(%)(log10拷貝/mL)2.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響患者膿毒性休克的發(fā)生率隨著肺炎鏈球菌細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者膿毒性休克的發(fā)生率明顯上升9膿毒性休克的發(fā)生率(%)P<0.05(log10拷貝/mL)2.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響需機(jī)械通氣的患者比例高細(xì)菌負(fù)荷量的患者需要機(jī)械通氣的比例明顯高于低負(fù)荷患者10需機(jī)械通氣的患者比例(%)P=0.001數(shù)據(jù)顯示，細(xì)菌負(fù)荷量每增加1log10拷貝/mL，需機(jī)械通氣的患者比例則增加2倍log10拷貝/mL可能需機(jī)械通氣的患者比例3/669/272.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后高細(xì)菌負(fù)荷量的患者出現(xiàn)AKI和ARDS的比例明顯高于低負(fù)荷患者11患者百分比(%)P<0.00110/6615/271/665/27P=0.0072.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響患者死亡率12患者死亡率(%)P=0.0124/667/27高細(xì)菌負(fù)荷量的患者死亡率明顯高于低負(fù)荷患者2.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分研究結(jié)論13隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，感染患者出現(xiàn)膿毒性休克的比例及需機(jī)械通氣的比例明顯上升感染患者細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后：高細(xì)菌負(fù)荷量的患者出現(xiàn)AKI、ARDS的比例及死亡率明顯高于低負(fù)荷患者2.RelloJetal.CHEST2009;136:832–840本文檔共27頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分14腦膜炎球菌感染疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)3.DartonTetal.ClinicalInfectiousDiseases2009;48:587–94MI:5.835本文檔共27頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分研究簡介研究目的評(píng)估腦膜炎奈瑟菌細(xì)菌負(fù)荷量與感染患者住院時(shí)間的相關(guān)性以及影響患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的高危因素研究方法一項(xiàng)為期3年的臨床研究，患者均為腦膜炎奈瑟菌感染的住院患者細(xì)菌負(fù)荷量檢測(cè)：采用rt-PCR技術(shù)測(cè)定血標(biāo)本中腦膜炎奈瑟菌的細(xì)菌負(fù)荷量評(píng)估宿主因素(如年齡、細(xì)菌負(fù)荷量等)對(duì)患者死亡率的影響153.DartonTetal.ClinicalInfectiousDiseases2009;48:587–94本文檔共27頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后研究顯示：細(xì)菌負(fù)荷量與患者住院時(shí)間、腎透析以及肢體缺失或皮膚移植密切相關(guān)16細(xì)菌負(fù)荷量(log10拷貝/mL)是否是否是否P<0.001P<0.001P=0.0013.DartonTetal.ClinicalInfectiousDiseases2009;48:587–94N=504本文檔共27頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分細(xì)菌負(fù)荷量影響患者死亡率死亡組患者的細(xì)菌負(fù)荷量明顯高于存活組患者17細(xì)菌負(fù)荷量(log10拷貝/mL)P<0.001n=950n=95多因素回歸分析顯示：隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯上升變量優(yōu)勢(shì)比(95%CI)P值年齡(每增加1歲)1.04(1.02–1.06)<0.001細(xì)菌負(fù)荷量(每增加1log10拷貝/mL)2.04(1.53–2.71)<0.0013.DartonTetal.ClinicalInfectiousDiseases2009;48:587–94本文檔共27頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分研究結(jié)論18腦膜炎奈瑟菌細(xì)菌負(fù)荷量與感染患者住院時(shí)間以及后遺癥的發(fā)生率密切相關(guān)隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者死亡風(fēng)險(xiǎn)隨之增加3.DartonTetal.ClinicalInfectiousDiseases2009;48:587–94本文檔共27頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分總結(jié)PCR檢測(cè)技術(shù)可準(zhǔn)確檢測(cè)血液中細(xì)菌負(fù)荷量以及部分特殊病原體的負(fù)荷量，對(duì)臨床具有重要的指導(dǎo)意義研究顯示，細(xì)菌負(fù)荷量可預(yù)示患者的預(yù)后：隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，感染患者出現(xiàn)膿毒性休克的比例及需機(jī)械通氣的比例明顯上升細(xì)菌負(fù)荷量與感染患者住院時(shí)間以及后遺癥的發(fā)生率密切相關(guān)隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者出現(xiàn)AKI、ARDS的比例及死亡率明顯高于低負(fù)荷患者19本文檔共27頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分可以解決的臨床問題幫助判斷高危因素和臨床預(yù)后指導(dǎo)抗生素選擇提示可能存在的“接種物效應(yīng)”20本文檔共27頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分實(shí)驗(yàn)室測(cè)定藥物敏感性時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)接種菌量為5×105CFU/ml。但專家指出，心內(nèi)膜炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎以及膿腫等深部組織感染，其病原體的負(fù)荷量常高達(dá)109-1010CFU/mL，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過實(shí)驗(yàn)室操作的標(biāo)準(zhǔn)接種菌量。正因?yàn)槿绱?，?dǎo)致實(shí)驗(yàn)室藥敏結(jié)果與體內(nèi)藥物敏感性不完全一致，出現(xiàn)病原體雖然對(duì)抗菌藥物敏感，但治療失敗率高的現(xiàn)象。而抗菌藥物在高接種菌量時(shí)對(duì)細(xì)菌的MIC值比標(biāo)準(zhǔn)接種菌量時(shí)明顯升高的現(xiàn)象稱之為接種物效應(yīng)。如果患者體內(nèi)的細(xì)菌載量比較高，產(chǎn)酶也會(huì)較高，導(dǎo)致使用的酶抑制劑不能中和細(xì)菌的產(chǎn)酶，臨床治療失敗。21接種物效應(yīng)（Inoculumeffect）本文檔共27頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分22對(duì)于細(xì)菌負(fù)荷量高的感染患者，是否應(yīng)避免使用存在接種物效應(yīng)的抗菌藥物？思考本文檔共27頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分β內(nèi)酰胺類(除外碳青霉烯類)存在接種物效應(yīng)4.THOMSONKSetal.ANTIMICROBIALAGENTSANDCHEMOTHERAPY.2001;45(12):3548–3554菌株酶MIC值碳青霉烯類三代頭孢四代頭孢單環(huán)內(nèi)酰胺類β內(nèi)酰胺類/β內(nèi)酰胺酶抑制劑105107105107105107105107105107PAB-C14SHV-20.030.0316328>1288644256PAB-CS7SHV-70.030.032561,0248>1281,0241,024264PAB-C43TEM-430.030.06641,0241321612824PAB-C12TEM-120.030.06325124>12821628PAB-C10TEM-100.030.03256>1,0244>12812851222PAB-C-4TEM-40.030.03321284>128326424PAB-C3TEM-30.030.06322564>128163224研究顯示，碳青霉烯類不存在接種物效應(yīng)，三代和四代頭孢菌素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及β內(nèi)酰胺類/β內(nèi)酰胺酶抑制劑均存在接種效應(yīng)碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟；單環(huán)β內(nèi)酰胺類：氨曲南；β內(nèi)酰胺類/β內(nèi)酰胺酶抑制劑：哌拉西林/他唑巴坦接種效應(yīng)的定義：在高接種菌量時(shí)(5*107CFU/ml)

MIC值比標(biāo)準(zhǔn)接種菌量時(shí)(5*105CFU/ml)升高≥8倍本文檔共27頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分頭孢菌素對(duì)大多數(shù)產(chǎn)ESBL腸桿菌顯示接種物效應(yīng)5.吳娜等.中國感染與化療雜志.2011;11(1):31-35β內(nèi)酰胺類/β內(nèi)酰胺酶抑制劑三代頭孢四代頭孢碳青霉烯測(cè)定不同抗菌藥物對(duì)22株產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在標(biāo)準(zhǔn)接種菌量(5*105CFU/ml)及高接種菌量(5*107CFU/ml)的MIC值，評(píng)估其接種效應(yīng)碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟；β內(nèi)酰胺類/β內(nèi)酰胺酶抑制劑：哌拉西林/他唑巴坦顯示接種效應(yīng)的菌株比例頭孢菌素對(duì)40-87%產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌顯示接種效應(yīng)本文檔共27頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分存在接種物效應(yīng)的抗菌藥物

治療敏感或中介菌株感染時(shí)臨床治療失敗率高治療失敗率(%)對(duì)32例產(chǎn)ESBL腸桿菌菌血癥患者的調(diào)查分析，體外藥敏試驗(yàn)顯示，致病菌株對(duì)頭孢菌素(頭孢噻肟、頭孢三嗪、頭孢唑肟、頭孢吡肟、頭孢他定)敏感或中介6.PATERSONDLetal.JOURNALOFCLINICALMICROBIOLOGY.2001;39(6):2206–2212頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL菌株感染時(shí)，雖然藥敏試驗(yàn)顯示敏感但治療失敗率高本文檔共27頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期一\18點(diǎn)54分隨著MIC值的增加，

頭孢菌素治療產(chǎn)