如何做好動(dòng)物實(shí)驗(yàn)_第1頁
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第四章如何做好動(dòng)物實(shí)驗(yàn)主要內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇“I’msoproud!Allofmykidsaregoingintoresearch”實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇恰當(dāng)與否關(guān)系到課題質(zhì)量的高低、經(jīng)費(fèi)開支的多少、研究途徑正確與否以及實(shí)驗(yàn)方法的簡(jiǎn)單與繁瑣問題,甚至?xí)绊懙秸n題的成敗及研究結(jié)果正確性。1、選用與人體結(jié)構(gòu)、功能、代謝和疾病特征相似的動(dòng)物進(jìn)化程度愈高,結(jié)構(gòu)、功能、代謝等愈接近人類,根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物

是最接近于人類

的動(dòng)物,如,獼猴?;驹瓌t2、盡量選用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本原則3、選用解剖、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

的要求的動(dòng)物適當(dāng)使用能降低實(shí)驗(yàn)操作難度,實(shí)驗(yàn)更順利。開胸和心臟實(shí)驗(yàn)----適宜選用兔做實(shí)驗(yàn);觀察藥物對(duì)排卵的影響,進(jìn)行避孕藥研究-----適宜選用兔、貓;肝外科實(shí)驗(yàn)研究------適宜選用大鼠;膽囊功能研究------不能選用大鼠;基本原則發(fā)熱、解熱和檢查致熱源實(shí)驗(yàn)-----適宜選用兔做實(shí)驗(yàn);變態(tài)反應(yīng)、Vc缺乏癥研究----適宜選用豚鼠;犬、猴、貓的嘔吐反應(yīng)敏感,大鼠無嘔吐反應(yīng);基本原則4、充分利用不同品系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的某些特殊反應(yīng)5、選用與實(shí)驗(yàn)要求適應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物規(guī)格年齡----年齡不同,其生物學(xué)特性往往不同,一般選性成熟后的青壯年動(dòng)物。太小的動(dòng)物的生理功能未達(dá)到成年水平。太老的動(dòng)物的各器官老化,代謝功能下降,只在老年醫(yī)學(xué)研究中使用;體重----在正常營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和飼養(yǎng)條件下,體重與年齡有一定的相關(guān)性;性別----許多實(shí)驗(yàn)證明,同一品種(系)不同性別的動(dòng)物對(duì)外界刺激的反應(yīng)不一致?;驹瓌t二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)于任何研究課題,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)都是成功的關(guān)鍵。涉及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的更是如此。步驟睬和內(nèi)存容1、查意閱文粉獻(xiàn),若根據(jù)照初始豈想法將或前讀期研壩究基蛾礎(chǔ)的裳新思截路廣應(yīng)泛查狗閱文固獻(xiàn)。明確躁研究懶問題沃的背調(diào)景明確辦相關(guān)再研究帳使用刻的方伐法明確涉選擇釀的動(dòng)六物模量型排除各不必屢要的慌重復(fù)好研究這個(gè)退階段遣應(yīng)考山慮3R,通釀過文黑獻(xiàn)查元閱了添解替維代動(dòng)頭物實(shí)猾驗(yàn)的庸方法船是否烈可行軍、引富起動(dòng)擺物疼叼痛的顫操作戚已經(jīng)掛得到?jīng)_評(píng)估聯(lián)認(rèn)可浪并提端供證御據(jù)。2、提每出假組設(shè)觀察她和記離錄信直息喚分讀析和找歸類書信息醒提贊出假拆設(shè)3、實(shí)裙驗(yàn)設(shè)滿計(jì)研究核方案撐,細(xì)吳心計(jì)拜劃所列有操卷作并薯記錄怒在案墳。方案疏應(yīng)包毫括可雪控實(shí)壤驗(yàn)變黨量的轎實(shí)驗(yàn)仁操作遙、適剩合測(cè)類定的痕變量高參數(shù)似、獲筐得樣撿品和般產(chǎn)生購實(shí)驗(yàn)爺數(shù)據(jù)嫂的最堵適方年法。(確嶄定所晶有實(shí)耽物、告數(shù)據(jù)臉的收晨集和色測(cè)定型的時(shí)屯間安年排表隱)實(shí)驗(yàn)陷操作鏈包括丈動(dòng)物煙模型分持續(xù)層的時(shí)獸間(劑慢性刑研究奇),半模型喬預(yù)期怠疾病垂和或渡轉(zhuǎn)歸餐的進(jìn)獎(jiǎng)程(機(jī)決定偉測(cè)定風(fēng)的最頸適時(shí)肆間點(diǎn)慰),砍參加臉人員漲的時(shí)木間和縮慧分工主,實(shí)昆驗(yàn)花祥費(fèi)。(明工確已間知和梢潛在息的危戰(zhàn)害因扮子,戒適當(dāng)率預(yù)防煌措施軋)實(shí)驗(yàn)味單元研究脆的實(shí)蜓體是云實(shí)驗(yàn)表單元持,可勢(shì)以是騙一個(gè)縣動(dòng)物周個(gè)體丸,也冊(cè)可以是是一飛組動(dòng)腸物群鈔體。實(shí)驗(yàn)勁組別吊的動(dòng)臟物只票數(shù)是單實(shí)驗(yàn)但設(shè)計(jì)甜的重像要環(huán)盞節(jié)。每一幸實(shí)驗(yàn)甜組的居動(dòng)物蜘數(shù)量沃一般冰可通化過預(yù)左期各憲組檢役結(jié)果遭差異孝的可刃能程雷度統(tǒng)放計(jì)而蘆定。一個(gè)完標(biāo)準(zhǔn)征籠所垮能容靠納動(dòng)妖物的值數(shù)量慚也是潛確定閥因素對(duì)照消除摩外來起變量夠或可惹能未湖知的倚變量陽性恢對(duì)照陰性妹對(duì)照空白察對(duì)照媒介壓物對(duì)參照比擬道物對(duì)預(yù)照隨機(jī)斜化,動(dòng)物刊分組礙時(shí)必鴨須隨撓機(jī)分報(bào)配動(dòng)物初標(biāo)號(hào)佩,隨耐機(jī)抽兵取利用狼隨機(jī)殘數(shù)字毛表或凡計(jì)算間機(jī)隨掉機(jī)程縱序設(shè)計(jì)避中還病應(yīng)注侮意的牽問題實(shí)驗(yàn)喬人員痛的培昏訓(xùn)和負(fù)資格援認(rèn)可預(yù)實(shí)椒驗(yàn),拋驗(yàn)證荒設(shè)計(jì)伍合理觀性、矮完善渣操作再步驟臉、練慰習(xí)實(shí)球驗(yàn)技禮術(shù)、決檢驗(yàn)旬儀器能設(shè)備挑、估辜計(jì)變稱量參震數(shù)測(cè)壞定的嚇誤差制。實(shí)驗(yàn)裕室和嚴(yán)飼養(yǎng)誕管理怪條件三、粘動(dòng)物民實(shí)驗(yàn)妹技術(shù)動(dòng)物堪實(shí)驗(yàn)摧:是遮用實(shí)鐮驗(yàn)動(dòng)短物作允人的悼替身票進(jìn)行砌各努種生莫命科纏學(xué)實(shí)遭驗(yàn)的侵過程即。動(dòng)物當(dāng)實(shí)驗(yàn)糠技術(shù)澤是實(shí)僵施動(dòng)詠物實(shí)萄驗(yàn)的零重要僅手段1、儀童器設(shè)兵備的降準(zhǔn)備根據(jù)禁實(shí)驗(yàn)惑方案涂和要堵求準(zhǔn)劑備相噸應(yīng)的狀儀器少。并屆檢查葵儀器貪的功僑能是咬否符務(wù)合,拐是否螞能正產(chǎn)常運(yùn)碌行;測(cè)檢查蘿儀器識(shí)所需紛的耗例材是逝否夠道用。2、器裙械物驢品的版準(zhǔn)備根據(jù)儉實(shí)驗(yàn)輸?shù)牟侥倔E準(zhǔn)悲備器史械物珠品。備需仔蔑細(xì)閱葉讀試確驗(yàn)步草驟,慌認(rèn)真品準(zhǔn)備價(jià)器械慚物品師,不出要遺陶漏,祝尤其咽是細(xì)拴小物黎品,腳以免駛影響默試驗(yàn)嘩的正蘇常進(jìn)標(biāo)行。3、試是品的要準(zhǔn)備在實(shí)煌驗(yàn)前彈試品榮的準(zhǔn)賤備非跑常重錯(cuò)要,稀試品之的準(zhǔn)業(yè)備和渣實(shí)驗(yàn)酬動(dòng)物怠的訂亮購在竭時(shí)間蠢上必反須統(tǒng)擋一,禍否則抗會(huì)因她試品情已準(zhǔn)失備而撈無實(shí)設(shè)驗(yàn)室必或動(dòng)宮物,蘋造成零試驗(yàn)刻延期銹;或去者動(dòng)絡(luò)物已糾備好釋卻沒給有試濃品造鈔成動(dòng)偶物浪懇費(fèi)和畫經(jīng)費(fèi)籍損失蓮。動(dòng)物怖實(shí)驗(yàn)廈前的戶準(zhǔn)備4、實(shí)垂驗(yàn)動(dòng)嚴(yán)物的茅購入根據(jù)瓜實(shí)驗(yàn)吃設(shè)計(jì)麥,在珠實(shí)驗(yàn)叼前預(yù)傲訂實(shí)暢驗(yàn)動(dòng)抄物,咱預(yù)定翻時(shí)將娃動(dòng)物裕的種血、系景、日療齡、余體重翁、性市別、傅數(shù)量鏡等規(guī)汗格寫枯清楚環(huán)。接乏收動(dòng)拉物時(shí)后向生削產(chǎn)供紙應(yīng)單株位索遼取實(shí)瓜驗(yàn)動(dòng)程物的吳質(zhì)量還合格嫂證明劇,根穗據(jù)實(shí)架驗(yàn)時(shí)偽間的破長(zhǎng)短及,同尸時(shí)購緣瑞入適情量的購飼料墨和墊潔料。堪如果扔從外毅地購嚷買動(dòng)己物,彎應(yīng)考爐慮運(yùn)鑰輸中座的各港種因任素對(duì)時(shí)實(shí)驗(yàn)酷動(dòng)物頃的影兇響,胳并察佳看運(yùn)濫輸檢粒疫證哨明;鍛從國(guó)聰外引錢進(jìn)實(shí)床驗(yàn)動(dòng)龍物時(shí)歉,必芹須到膝動(dòng)物雜進(jìn)口啊檢疫耗局辦掩理相購關(guān)手槳續(xù),晨隔離曠檢疫債期較邊長(zhǎng)(2個(gè)月鳥),者應(yīng)充庸分考爬慮時(shí)溉間對(duì)襯動(dòng)物煤的影菌響。實(shí)驗(yàn)團(tuán)動(dòng)物間質(zhì)量乒合格好證明5、實(shí)炕驗(yàn)動(dòng)公物的撫一般康檢查首先米要根蔽據(jù)實(shí)沙驗(yàn)要眠求檢穿查實(shí)沖驗(yàn)動(dòng)摩物的揪種、羅系、雄日齡體記錄年是否備符合遼,再勻次要滿對(duì)實(shí)投驗(yàn)動(dòng)嗓物的永體重燥、性川別、饞數(shù)量隙進(jìn)行束一一純核對(duì)默,最甩后要債查看盲實(shí)驗(yàn)障動(dòng)物磨的被肝毛、供飲食炎狀況島、用族藥史宰、病撥史、蓬免疫齡情況縣。6、實(shí)唇驗(yàn)動(dòng)校物的醫(yī)背景僅資料財(cái)復(fù)合實(shí)驗(yàn)脂前需符核對(duì)鐵實(shí)驗(yàn)天動(dòng)物禾質(zhì)量果合格墻證明鏟、近愿期微涼生物艦和寄搖生蟲悉檢測(cè)揮報(bào)告搬、近南期遺歡傳檢珠測(cè)報(bào)華告,元如果怕是國(guó)煩家保僻護(hù)動(dòng)佳物,騙需查看看野還生動(dòng)矛物保論護(hù)機(jī)斬構(gòu)的淺批準(zhǔn)綠文件習(xí)。運(yùn)輸或會(huì)對(duì)替動(dòng)物竭產(chǎn)生黨應(yīng)激可能店誘發(fā)費(fèi)處于埋亞臨神床感險(xiǎn)染狀駁態(tài)的輩動(dòng)物撇感染毀發(fā)作7、隔伸離檢彩疫和園安定檢疫嗚就是誕將新榆接收患的動(dòng)呼物與膛設(shè)施賊中原讓有的齒動(dòng)物饅隔離清,直潛至確夏定該笨新進(jìn)但動(dòng)物再的健石康和鼠可能繪的微踩生物駝狀況鈔。。有效找的檢顏疫計(jì)承劃能居夠最妙大限稀度的逐降低罰外來偉病原凡體引留入既馬定群逼體的店風(fēng)險(xiǎn)病。有效伍的檢雜疫程將序特郊別有閣助于慈限制宇人員曲暴露嬸在非辟人靈造長(zhǎng)類狗所攜樓帶的赴人畜雄共患?xì)v病感謙染中府。。將嚙乓齒類?;蚱渌闼鼊?dòng)貪物移槐出動(dòng)汽物設(shè)組施用恒于實(shí)主驗(yàn)(圈如影覽像學(xué)柴或行愁為學(xué)北實(shí)驗(yàn)乞)時(shí)斧,根姐據(jù)動(dòng)照物群頃體的南健康漸狀況個(gè),并離且遵喂照已魚有的忌動(dòng)物若生物淋安全石計(jì)劃蘋,需說要將戀移出說的動(dòng)昆物與餓原群射體分咬開飼孝養(yǎng)。穩(wěn)定顆期,莊不管染動(dòng)物撤是否鈔需要荒被隔典離,把新進(jìn)客動(dòng)物鎖在使酷用前粒,都啦應(yīng)有童一段邪生理犯、心策理和忽營(yíng)養(yǎng)直條件靈的穩(wěn)葉定期塌。穩(wěn)定壺期根篇據(jù)動(dòng)古物運(yùn)忌輸?shù)奈绞教?hào)和時(shí)齡間、舞種類刊和預(yù)啞定用精途而斬定。動(dòng)物躺實(shí)驗(yàn)義基本綠技術(shù)1、辨杠別雌址雄根據(jù)均排泄柿孔和霧生殖哄孔的鐮距離診辨別軌。距離長(zhǎng)近的架為雌掉性,袍距離尋遠(yuǎn)的醬為雄減性2、標(biāo)濟(jì)記方盞法(1)染蔑色法紗:染寬料有尾:苦墻味酸往(黃幟)、婚堿性煙品紅(薪紅)忍、亞泛甲蘭旺(蘭校)、阿龍膽侄紫(誰紫)(2)耳胡標(biāo)法凱:(3)掛牌慌法(4)剪毛北法(5)烙印粉法(6)電子完芯片爐(玻顏璃管寸標(biāo)簽鏡)植粘入法3、實(shí)導(dǎo)驗(yàn)動(dòng)見物的波抓取捎與固甘定在采顫集樣兆品、亭更換色籠具叢、轉(zhuǎn)病移動(dòng)鍵物時(shí)挨,必馳須要格抓取施并保跳定動(dòng)拴物??蓪W(xué)習(xí)嚴(yán)抓取神與保悼定動(dòng)系物的挽目的謎是為申了便編于操陣作、過保證坊實(shí)驗(yàn)摸人員盜安全席、防疏止動(dòng)類物意換外損繞傷。據(jù)實(shí)驗(yàn)暖人員熄在進(jìn)晉行動(dòng)繡物實(shí)蒙驗(yàn)時(shí)坦,必敲須正燈確抓受取動(dòng)療物,聰禁止易對(duì)動(dòng)園物采部取突模然、蘭粗暴焰的方壇法,玩以免逢被動(dòng)央物咬起傷或蟲造成薪動(dòng)物服傷亡震和應(yīng)堅(jiān)激反滔應(yīng)。串在抓豬取與球固定久時(shí),箱首先字應(yīng)慢栽慢友存好地料接近碎動(dòng)物像,注踏意觀部察動(dòng)埋物的救表情捆,等男動(dòng)物搜安靜籃下來技時(shí)抓儲(chǔ)取,染抓取己動(dòng)作抹應(yīng)準(zhǔn)身確、籮迅速罷、熟妙練、敞溫柔缺。必宏要時(shí)障實(shí)驗(yàn)旦人員切應(yīng)戴旗上防涉護(hù)用曬具。小鼠礎(chǔ)的抓刪取與碎固定大鼠趕的抓柳取與懂固定家兔密的抓哄取與壟固定犬的校抓取拼與固健定猴的旁抓取鋸與固辮定小型象豬的澆抓取財(cái)與固譽(yù)定4、麻特醉疼痛筒與止披痛痛:飲因組族織傷挎害導(dǎo)圖致真膠實(shí)的喜或潛淋在的袍官感只上的銷不愉賭快。止痛里:用袍藥物堆或其泉他方齡法使綱動(dòng)物期沒有豬痛的思感覺“Well,thatexplainsthepain!”Ga惠ry拼L茫ar鎮(zhèn)so島n屯~睡19絡(luò)85動(dòng)物在會(huì)否特有疼辜痛?沒有益直接談的證長(zhǎng)據(jù)行為穗反應(yīng)在人駐類能柜引起嚷疼痛犁的類絨推給看動(dòng)物為何其要處名理疼土痛法規(guī)柏及道項(xiàng)德的毒理由動(dòng)物極利益有利關(guān)于研騎究成拐果快速挽回復(fù)摟正常棗的生聚理功轉(zhuǎn)能較高絡(luò)的生技活率對(duì)生來理狀婆態(tài)的校影響扭減少疼痛狹存在秩:抓取儲(chǔ)固定實(shí)驗(yàn)柜操作實(shí)驗(yàn)服后恢老復(fù)麻醉里概述麻醉抓:顯圓著抑跌制感廢覺意傲識(shí)和絨運(yùn)動(dòng)役反射絡(luò),使寺感覺心處于剛遲鈍架狀態(tài)也,是饑可控汗制或副有可浪逆性今。鎮(zhèn)痛悔:短精暫地評(píng)消除甚或降目低痛廁苦的她感覺麻醉掘一般宅分為壇全身削麻醉競(jìng)和局答部麻償醉。全身凳麻醉傅分四么期:溫隨意案興奮癢期、剩不隨每意興艱奮期身、外熊科麻賊醉期伯、延雷髓麻睛痹期實(shí)驗(yàn)鵲動(dòng)物含的麻唐醉方癢法和訓(xùn)麻醉扁藥平衡-復(fù)合穩(wěn)鎮(zhèn)痛扣,種來屬差漿異,訪個(gè)體征差異性情音,脂晝肪,距病史昌,營(yíng)秀養(yǎng)及恩健康凈狀況藥物扎劑量爛與濃苗度,晉動(dòng)物銀大小筆,年床齡,腫健康司狀況濱,操膚作需河要,趕嚴(yán)密洪監(jiān)控麻醉無前的掀準(zhǔn)備螞:減爬輕壓回力,夠精確惜劑量急,禁艱食,蔥麻醉兄方案剃,術(shù)間前用墻藥/麻醉廟誘導(dǎo)/維持注意播手術(shù)邀合并貍癥術(shù)后準(zhǔn)監(jiān)控島疼痛款及痛撤苦,有麻醉歡后興尾奮,妨關(guān)懷根據(jù)砍動(dòng)物體重、麻初醉劑哀量、輛麻醉烘藥濃劇度計(jì)狼算麻廁醉藥睡用量記錄女給藥懶、進(jìn)盤入興僚奮期工、麻莖醉期摸的時(shí)前間。小鼠敲常用線麻醉疏藥的梳劑量辯及注浮射途燒徑動(dòng)物給藥途徑鹽酸氯胺酮戊巴比妥硫噴妥鈉水合氯醛小鼠i.vi.Pi.m22~4435502550400單位剪:mg螺/k膝gi.蘆v-靜印脈注隔射;i.努p-腹循腔注酒射;i.愚m-肌體肉注氣射大鼠密常用竊麻醉辭藥的廈劑量咬及注淋射途材徑動(dòng)物給藥途徑鹽酸氯胺酮戊巴比妥硫噴妥鈉水合氯醛烏拉坦大鼠i.Vi.Pi.m22~44255020404001100單位屋:mg是/k許gi.幕v-靜光脈注絲式射;i.毫p-腹襪腔注慮射;i.推m-肌臭肉注盜射5、供餐試品填的給妖予方斯法(1)經(jīng)其口給麗藥自動(dòng)輪口服強(qiáng)給藥灌胃扯給藥(2)注夏射法煩給藥皮下斗注射皮內(nèi)喜注射肌肉款注射腹腔蜻注射靜脈霜注射尾靜底脈注悄射大鼠績(jī)、沙加鼠、雄豚鼠都后肢厚淺背丹側(cè)足患中靜隊(duì)脈注休射兔耳努緣靜突脈注類射犬前堅(jiān)肢頭謝靜脈館和后鏡肢小粱隱靜詢脈注偉射猴前每臂橈今側(cè)皮默靜脈盆、下偵肢隱參靜脈豬的牛耳靜詞脈腦內(nèi)趴注射鮮:額管部椎管餓內(nèi)注沿射:亂第七音腰椎杰間隙關(guān)節(jié)膛腔注堵射6、各緞種檢角驗(yàn)標(biāo)稅本的私采集并方法采血①尾移尖采欲血:答大小然鼠②眼沃眶靜辛脈叢夠采血貓:大皆小鼠姻、沙竄鼠③眼朽眶動(dòng)辦靜脈唉采血俗:小階鼠④腹驕腔靜舒脈采容血⑤心哭臟采展血⑥兔須耳緣貸靜脈屠采血⑦頸斃靜脈從采血卷:兔雖、犬道、猴尺、小虹型豬采尿①代賢謝籠建法②導(dǎo)糖尿法③壓駕迫膀拌胱法采糞①代壺謝籠木法:鑼大小臣鼠、聞兔②壓騙迫肛旨門③自階然排姑出的深糞便帶:犬樣、猴往、小筋型豬7、安冤樂死“安愉樂死睡”(eu喘th蓬an汽as呢ia框)源自心希臘王文,感由安猾逸(eu)和押死(th窯an驚at押os午)兩個(gè)希詞素件構(gòu)成澡,安虹樂死農(nóng)的原丘始定缸義是扎“安拆詳無窗痛的著死亡拿”它識(shí)是一局種非餃自然酒的,掉由外度力所剛造成迷的死胸亡。實(shí)驗(yàn)廢動(dòng)物慣的安令樂死是指閃在不晌影響打動(dòng)物授實(shí)驗(yàn)艱結(jié)果直的前稻提下昆,使故實(shí)驗(yàn)?zāi)I動(dòng)物傘短時(shí)乖間內(nèi)娛無痛查苦的倍死亡泡。不愚會(huì)由漆刺激純產(chǎn)生脖的肉逐體疼派痛及路由于斧刺激針引起它精神要上的機(jī)痛苦擔(dān)、恐偶怖、歡不安壇及抑扁郁。安樂胡死注黨意事朋項(xiàng):死亡司時(shí)盡仿可能貿(mào)減少浸驚恐突、疼苦痛。使其槍在最爛短時(shí)泰間內(nèi)病失去要意識(shí)詞迅速舌死亡俱。方法惜可靠麻。對(duì)操只作人瓦員安撞全。采用與的方捉法要牢與研畜究的伸要求團(tuán)和目患的一耕致。對(duì)觀濁察者籌和操摩作者犧的情客緒影并響最屢小。對(duì)環(huán)挎境污抓染的盛影響棕最小烤。需要抽的機(jī)專

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