探索大鼠AA對金鐵鎖總皂苷抗炎作用反應(yīng)性

探索大鼠AA對金鐵鎖總皂苷抗炎作用反應(yīng)性

【摘要】目的通過實驗觀察和探討金鐵鎖總皂苷抗炎作用及其作用機理。方法建立佐劑性關(guān)節(jié)炎動物模型，通過觀察TSPT對AA大鼠足腫脹及炎性組織液中丙二醛水平的影響來探討其抗炎作用及其作用機制。結(jié)果TSPT能有效抑制AA大鼠足腫脹，降低炎性組織液中MDA的水平。結(jié)論TSPT具有良好的抗炎作用，其作用機制與降低MDA水平有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】金鐵鎖總皂苷佐劑性關(guān)節(jié)炎MDA

【Abstract】ObjectiveToobservetheanti-inflammationef，theTSPT’santi-inflammatoryeffectsandmechanismagainstAAwasstudiedthroughobservingchangesofthikelyrelatedtoTSPT’sdown-regulationofMDA.

【Keywords】TSPTAAMDA

金鐵鎖系苗族習(xí)用藥材［1］，首載于《滇南本草》，為石竹科植物金鐵鎖的干燥根。別名：獨定子、對葉

七、白馬分鬃等，主要含皂苷類成分。具有散瘀定痛、止血、消癰排膿之功，用于跌打損傷，風(fēng)濕痛、胃痛、創(chuàng)傷出血等的治療［2］。目前尚關(guān)于其抗AA研究的文獻報道，本文就關(guān)于金鐵鎖總皂苷抗AA作用的研究作一介紹。

1材料與方法

材料Freund’s完全佐劑，注射器，金鐵鎖總皂苷，地塞米松注射液，風(fēng)濕寧注射液，TSPT。

動物：70只雄性Wistar大鼠，體重：g，清潔級二級動物。

實驗方法

分組70只Wistar雄性大鼠，隨機分為7個組。分別為：生理鹽水組、模型組、西藥陽性對照組、中藥陽性對照組、TSPT大、中、小劑量組。

造模除NS組外，其余各組于每只大鼠右后足跖皮內(nèi)注射Freund’s完全佐劑致炎。第1天記錄大鼠的體重和兩側(cè)腳踝關(guān)節(jié)的周長。

給藥除NS組外，其余均按上述方法造模，于造模后第9天開始給藥，連續(xù)給藥12天。每隔3天，記錄各組大鼠體重，及踝關(guān)節(jié)腫脹，末次給藥1h后處死大鼠，觀察藥物對繼發(fā)性病變的影響。

2結(jié)果

對AA大鼠足腫脹的影響足腫脹的測量方法：用記號筆標(biāo)記腫脹踝關(guān)節(jié)周徑，每日以特制軟皮尺測量踝關(guān)節(jié)周長。實驗結(jié)果見表1。

統(tǒng)計結(jié)果分析：實驗結(jié)果表明，與生理鹽水比較，造模后第8天各組足均明顯腫脹，表明造模成功。用藥約1周后，TSPT大、中劑量對足腫脹均顯示出明顯的抑制作用，作用強度大于中藥陽性組，接近地塞米松組。提示：TSPT能有效抑制AA大鼠踝關(guān)節(jié)的炎癥反應(yīng)。

大鼠致炎足中丙二醛生成量的測定動物造模分組給藥同上。鼠致炎21天后處死，在致炎側(cè)關(guān)節(jié)上方處摘取腫脹足爪，縱向切開，放入5ml生理鹽水的試管中4℃浸泡過夜，離心取上清液，-20℃保存待測。

試劑與儀器：MDA試劑盒，可見分光光度計、恒溫水浴鍋、離心機。

測定方法及參數(shù)：硫代巴比妥酸結(jié)合法，于532nm處測定，實驗操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進行。

統(tǒng)計學(xué)方法實驗結(jié)果以表示，采用t檢驗。如表2。

表1TSPT對AA大鼠足腫脹的影響

注：與NS組比較：***P＜;與模型組比較：★★P＜，★★★P＜；與西陽組比較

：△△P＜，△△△P＜。與中陽組比較：※※P＜，※※※P＜

表2TSPT對AA大鼠炎性組織液中MDA的影響

注：與NS組比較：**P＜;***P＜;與模型組比較：★★P＜，★★★P＜;與西陽組比較：△△P＜，△△△P＜;與中陽組比較：※※P＜

圖1TSPT對MDA水平的影響圖

由圖表統(tǒng)計分析可知：與NS組比較，模型組炎性組織液中，MDA的含量顯著升高，這顯示出AA大鼠出現(xiàn)嚴(yán)重的炎性反應(yīng)。經(jīng)治療后，與模型組比較，各個給藥組AA大鼠炎性組織液中MDA含量均有不同程度的降低，B、D表現(xiàn)出差異有非常顯著性。

3討論

MDA通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，自由基可引起脂質(zhì)過氧化，影響一些基因的表達，在炎癥和免疫過程中起著中介作用［3］。因此自由基在生物體系中的作用正受到廣泛重視。在正常情況下，機體內(nèi)僅產(chǎn)生少量氧自由基，其產(chǎn)生、利用和清除保持一種動態(tài)平衡。一旦由于某種原因造成體內(nèi)自由基的堆積，便會損傷組織細(xì)胞，導(dǎo)致各種病理變化。

AA大鼠炎癥反應(yīng)中，模型對照組炎性組織液中ＭＤＡ含量顯著升高與AA大鼠足腫脹呈正相關(guān)，表明致炎因子使機體產(chǎn)生過量的氧自由基。這些活性氧可直接作用于一些細(xì)胞包括免疫細(xì)胞，與其脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸等發(fā)生反應(yīng)，引起脂質(zhì)過氧化，使ＭＤＡ增多，造成細(xì)胞毒性和功能受損。ＭＤＡ的增多會造成自由基連鎖反應(yīng)加強，使炎癥加重或發(fā)展。經(jīng)TSPT治療后，大鼠炎性組織中MDA的含量降低，表明TSPT能抑制或阻斷炎癥時氧自由基的過量產(chǎn)生與釋放，減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)與脂質(zhì)過氧化，使其終產(chǎn)物ＭＤＡ降低，并接近正常組水平，因而減少了對細(xì)胞的損傷，糾正體內(nèi)氧自由基代謝失衡或紊亂的作用，調(diào)整機體內(nèi)環(huán)境，起到消炎、抗氧化和細(xì)胞保護作用，促進了炎癥反應(yīng)的消退。TSPT抗炎免疫的作用機理是多方面的，本實驗結(jié)果提示，TSPT對AA大鼠炎癥時氧自由基代謝的調(diào)整作用，可能是其中一個重要環(huán)節(jié)，對AA大鼠的抗關(guān)節(jié)炎作用可能與其降低脂質(zhì)過氧化，恢復(fù)抗氧化酶活性和腹腔Mφ分泌功能等有關(guān)。

【參考文獻】

1包駿，冉懋雄.貴州苗族醫(yī)藥研究與開發(fā).貴陽：貴州科技出版社，1999，1