抗原抗體反應的原理

關于抗原抗體反應的原理第1頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三緒言第2頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第一節(jié)免疫學技術的范疇與應用一、免疫學技術的范疇二、免疫學技術的應用特點第3頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三免疫學技術的范疇1、對具有免疫活性物質(zhì)的定性、定量測定2、對免疫系統(tǒng)的組成成分的數(shù)量、狀態(tài)的測定第4頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

免疫學技術的應用特點1、對象——“包羅萬象”2、方法——“兼容并蓄”第5頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第二節(jié)有關免疫學基本概念一、抗原的概念與屬性二、免疫細胞的概念與分類三、免疫應答的概念與過程第6頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三免疫原性——可識別、可反應性（誘導機體產(chǎn)生免疫應答的特性）免疫反應性

——選擇結合性（和免疫應答產(chǎn)物特異性結合的特性）抗原的概念與屬性第7頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三免疫細胞的概念與分類免疫細胞（Immunecells）泛指所有參與免疫應答及與免疫應答活動相關的細胞。免疫活性細胞（Immunecompetentcell，ICC）能夠接受抗原刺激、產(chǎn)生特異性的活化、增殖、分化并形成效應產(chǎn)物的淋巴細胞。第8頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

免疫細胞的類型

紅細胞血小板肥大細胞中性粒細胞巨噬細胞樹突狀細胞漿細胞T細胞NK細胞第9頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三免疫應答的概念與過程免疫應答（immuneresponse）免疫系統(tǒng)接觸抗原后，免疫細胞對抗原進行識別；并使特異性淋巴細胞活化、增殖；表現(xiàn)出免疫效應的過程。免疫應答的階段1、抗原識別階段（antigen-recognizingphase）2、淋巴細胞活化階段（lymphocyte-activatingphase）

3、抗原清除階段（antigen-eliminatingphase）第10頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第三節(jié)抗原抗體反應的基本原理一、抗原抗體反應的原理二、抗原抗體反應的特點三、影響抗原抗體反應的因素第11頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原抗體反應的原理1、抗原抗體結合的作用力2、抗原抗體結合物析出原因第12頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三引起抗原抗體結合的作用力1、電荷引力（庫侖引力）2、電子云引力（VanderWaals力）3、氫鍵結合力4、疏水作用力第13頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原抗體結合物析出的原因析出+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—電解質(zhì)+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—+——++——+—++—+—+—第14頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

抗原抗體反應的特點1、特異性2、可逆性3、適合比例性第15頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三特異性抗原A抗原C抗原B特異性反應交叉反應無反應第16頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三可逆性K（親和常數(shù)）=Ag+AbAgAb第17頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三適合比例性抗體含量抗原含量前帶后帶等價帶第18頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三網(wǎng)格學說（latticetheory）抗體過?？乖^?？贵w抗體比例合適第19頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

抗原抗體反應的影響因素1、電解質(zhì)2、酸堿度（pH值6-8）3、溫度（37-42。C）第20頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第四節(jié)免疫學檢測技術的評價一、評價標準

二、特異性與敏感性的關系第21頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三評價標準Specificity（特異）Sensitivity（敏感）Simplicity（簡便）Safety（安全）Saving（節(jié)約）第22頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三特異性與敏感性的關系特異性高、敏感性低

敏感性高、特異性低第23頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原的提取與制備第24頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第一節(jié)抗原/免疫原制備的基本概念一、抗原制備的目的二、抗原的“純度”三、抗原制備的主要技術途徑第25頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原制備的目的免疫原：激活T、B細胞半抗原：檢測相應抗體第26頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原的“純度”免疫原：保留足夠的可被T、B細胞識別的抗原決定簇半抗原：盡可能減少影響反應特異性的抗原決定簇第27頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原制備的主要技術途徑天然抗原——分離、純化半抗原——人工合成、載體聯(lián)接抗原肽——合成、基因工程制備第28頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第二節(jié)完全抗原/免疫原的制備方法一、顆粒性抗原的制備二、可溶性抗原的制備第29頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三顆粒性抗原的制備1、采集、分離抗原2、無害化處理第30頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三可溶性抗原的制備與純化1、處理與粉碎2、蛋白質(zhì)分離3、單一組分提取4、抗原純度鑒定

第31頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三處理與粉碎組織粉碎：機械、生物

細胞破碎：物理、化學、生物

第32頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三蛋白質(zhì)分離選擇性沉淀：鹽析有機溶劑沉淀水溶性非離子型聚合物沉淀

透析技術：超濾技術：

第33頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三單一組分提取層析技術：凝膠過濾離子交換親和層析

離心技術：差速離心密度梯度離心電泳技術：電泳洗脫等電聚焦第34頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三凝膠層析（分子篩）第35頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三離子交換層析+++———————++++++++——+++——++第36頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三親和層析第37頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三抗原純度鑒定方法：層析性質(zhì)測定電泳法免疫法指標：電泳純免疫純第38頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三

第三節(jié)半抗原免疫原制備的方法一、載體的選擇二、半抗原與載體的聯(lián)接第39頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三載體的選擇蛋白質(zhì)載體：BSA、HAS、OVA、KLH聚合多肽載體：多聚賴氨酸高分子聚合物載體：PVP、羧甲基纖維素第40頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體的聯(lián)接1、連接方式：物理法（吸附）化學法2、化學連接方法：直接聯(lián)接法：間接聯(lián)接法：第41頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體直接聯(lián)接碳化二亞胺法蛋白質(zhì)-COO—+R-N+=CN-R`

H-N+-R蛋白質(zhì)-COO-C-NH-R`+半抗原-NH2

O蛋白質(zhì)-C-NH-半抗原+R-NH-CO-NHR`第42頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體直接聯(lián)接

戊二醛法蛋白質(zhì)-NH2

+半抗原-NH2+COH-（CH2）

3-

COH蛋白質(zhì)-N=CH-（CH2）

3–

CH=N-半抗原第43頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體直接聯(lián)接

氯甲酸異丁酯法半抗原-COOH

+Cl-COO-CH2CH（CH3）2

OO半抗原-C-O-C-O-CH2CH（CH3）2+蛋白質(zhì)-NH2

半抗原-CO-NH-蛋白質(zhì)+HO-CH2CH（CH3）2

第44頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體間接聯(lián)接琥珀酸酐法

OO半抗原-CH2–OH+C-O-CCH3CH3O半抗原-CH2–O-C-(CH2)2-COOH第45頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體間接聯(lián)接O-（羥甲基）羥胺法半抗原-C=O

+H2N-O-CH2-COOH

半抗原-C=N-O-CH2-COOH

第46頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體間接聯(lián)接一氯醋酸鈉法半抗原--OH

+Cl-CH2-COONa半抗原--CH2-COOH第47頁，講稿共50頁，2023年5月2日，星期三半抗原與載體間接聯(lián)接重氮化的對氨基苯甲酸法HOOC--NH2

+NaNO2HOOC-