淋巴細胞課件

第九章淋巴細胞來源：是由哺乳動物骨髓或鳥類法氏囊中淋巴樣干細胞分化成熟而來。分布：骨髓中的淋巴細胞主要是B細胞脾中的淋巴細胞，50%淋巴結中的淋巴細胞，25%外周血淋巴細胞，5%-25%第一節(jié)B細胞的分化發(fā)育BCR是表達于B細胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白（membraneimmunoglobulin,mIg）。B細胞通過BCR識別抗原，接受抗原刺激，啟動體液免疫應答。

編碼BCR重鏈或輕鏈的基因是以數(shù)個分隔開的基因片段的形式成簇存在的。在B細胞的分化過程中，只有經(jīng)過基因重排，才能形成有功能的BCR。（一）BCR的基因結構、重排及其多樣性免疫球蛋白的基本結構443022q11.215402p111296254014q32.3HBCRCJDV染色體定位肽鏈

人BCR染色體定位和功能性基因片段編碼可變區(qū)編碼恒定區(qū)IL1、IL1、IL4(B細胞系)參與補體的溶細胞或溶菌作用B細胞雙重抗原識別模式圖V：人V基因片段為40個，根據(jù)同源性可分7個家族，編碼1-（一）重組信號序列(recombinationsignalsequence,RSS)多分子活化共受體，增強B細胞對抗原刺激的敏感性。diversity）分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層力與多種不同抗原表位結合的現(xiàn)象。VCVCTNF、LT(B細胞系)失敗另一條染色體H基因重排BCR多樣性產生的機制diversity）RAG-1/RAG-2復合物（重組激活酶復合物）抑制另一條染色體H基因重排(m:5/VpreB)表達preBCR表達輕鏈表達輕鏈先表達鏈基因，如鏈基因重排V：人V基因片段為40個，根據(jù)同源性可分7個家族，編碼1-VH（variable）:

人VH基因片段為40個，根據(jù)同源性分為7個家族，編碼H鏈的信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2

D（diversity）：

人D基因片段為25個，編碼V區(qū)中大部分CDR3

JH（joining）：

人JH基因片段為6個，編碼CDR3其余部分和第4個骨架，15-17aa重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJCBCR的基因結構（一）重鏈V區(qū)基因CH：人CH基因片段含多個外顯子，在大多數(shù)情況下C區(qū)中每個結構域和鉸鏈區(qū)是由單獨外顯子編碼。重鏈重鏈基因CDR1CDR2CDR3VCVDJC（二）重鏈C區(qū)基因V：人V基因片段為40個，根據(jù)同源性可分7個家族，編碼1-95aa，包括CDR1、CDR2和部分CDR3

J：人J基因片段為5個，編碼96-108aa,包括部分CDR3和第4個骨架區(qū)

C：人C基因片段為1個，編碼109-214aa輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（三）輕鏈的結構

人Vλ約有30個，根據(jù)同源性可分10個家族；Jλ和Cλ各4個，并成對排列輕鏈輕輕基因CDR1CDR2CDR3VCVJC（四）λ輕鏈的結構（一）重組信號序列(recombinationsignalsequence,RSS)

重排過程主要由一組重組酶來識別V、（D）、J基因片段兩側的重組信號序列，通過切斷、修復DNA而實現(xiàn)的

RSS

結構：回文結構七聚體富含A/T的九聚體分布：V片段3、J片段

5和D片段的兩側

RSS與重鏈VDJ基因重排：D+JDJV+DJVDJRSS與輕鏈VJ基因重排：V+JVJBCR的基因重排（二）V(D)J重組酶(recombinase)

RAG-1/RAG-2復合物（重組激活酶復合物）

性質：內切酶

表達：T/B淋巴細胞發(fā)育早期階段

作用：識別RSS，切斷七聚體一側末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）

表達：B細胞前體

作用：通過非模板的方式將數(shù)個核苷酸加到DNA斷端

其它：內切酶、DNA外切酶、DNA合成酶等（三）BCR重排順序

H重鏈可變區(qū)基因重排示意圖

BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首先是重鏈進行基因重排，隨后才是輕鏈重排。

經(jīng)過胚系基因的重排，B細胞的DNA序列與其他體細胞有很大不同，這是存在于B細胞和T細胞中非常獨特的現(xiàn)象。（四）等位排斥和同型排斥

等位排斥(allelicexclusion)：

在B細胞中的一對同源染色體上，只有一條染色體上的H或L基因可得到有效表達。抑制另一條染色體H基因重排14號染色體有效H基因重排啟動2號染色體鏈基因重排失敗另一條染色體H基因重排

同型排斥(isotypeexclusion)：

Ig和兩型中擇一表達；先表達鏈基因，如鏈基因重排失敗，才開始鏈基因表達。

小鼠：=95:5，人：=65:35BCR多樣性產生的機制

胚系中眾多V、D、J基因片段（組合多樣性，combinatorialdiversity）人重鏈：VH(40)D(25)JH(6)=6000人輕鏈：V(40)J(5)=200人輕鏈：V(30)J(4)=120

輕、重鏈不同配對6103

2.0102+6103

1.2102=1.92106

V（D）J連接的多樣性（junctionaldiversity）

體細胞高頻突變（somatichypermutation）（二）B細胞的發(fā)育和分化（二）V(D)J重組酶(recombinase)D-J重排V-DJ重排表達preBCR輕鏈V-J重排重鏈可變區(qū)基因重排示意圖分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層（二）B細胞的發(fā)育和分化末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）Ig(CD79b)第三節(jié)B細胞的亞群重鏈基因重鏈基因表達m鏈(胞漿和胞膜)表達m鏈表達m、d鏈RAG-1/RAG-2復合物（重組激活酶復合物）JH（joining）：末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）BCR是表達于B細胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白（membraneimmunoglobulin,mIg）。mIgM對自身抗原的識別導致RAG基因重新活化，發(fā)生輕鏈VJ的再次重排，合成新的輕鏈。等位排斥(allelicexclusion)：作用：識別RSS，切斷七聚體一側RAG-1/RAG-2復合物（重組激活酶復合物）（一）重組信號序列(recombinationsignalsequence,RSS)BCR胚系基因重排發(fā)生具有明顯的程序化形式，首先是重鏈進行基因重排，隨后才是輕鏈重排。胚系中眾多V、D、J基因片段（組合多樣性，combinatorialB細胞可捕獲可溶性抗原如重鏈或輕鏈基因重排失敗

結合抗原輸向外周B細胞庫細胞丟失克隆刪除自身免疫耐受mIgMmIgDmIgM骨髓早期祖B細胞晚期祖B細胞大前B細胞小前B細胞未成熟B細胞成熟B細胞

表達m鏈

重鏈基因重鏈基因表達m鏈(胞漿和胞膜)表達m鏈表達m、d鏈D-J重排V-DJ重排表達preBCR輕鏈V-J重排

(m:5/VpreB)表達preBCR表達輕鏈

表達輕鏈B細胞在中樞免疫器官的發(fā)育和分化B細胞的發(fā)育階段B細胞中樞免疫耐受的形成

克隆清除：

未成熟B細胞表面表達的mIgM與骨髓中的自身抗原結合，會導致該細胞的凋亡。

受體編輯：

mIgM對自身抗原的識別導致RAG基因重新活化，發(fā)生輕鏈VJ的再次重排，合成新的輕鏈。

失能：

mIgM與自身抗原的結合引起mIgM表達下調，進入外周淋巴器官后對抗原刺激不應答。第二節(jié)B淋巴細胞的表面分子及其作用B細胞的膜表面分子

B細胞抗原受體復合物

B細胞共受體協(xié)同刺激分子

其他表面分子一.B細胞抗原受體(BCR)復合物

mIgIg(CD79a)Ig(CD79b)BCR復合物結構模式圖BCR復合體介導的胞內信號轉導模式圖二、B細胞共受體（coreceptor）

CD19/CD21/CD81

多分子活化共受體，增強B細胞對抗原刺激的敏感性。

CD19：胞質區(qū)可傳遞活化信號；CD21(CR2)：可結合補體C3d；CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復合物結構。B細胞雙重抗原識別模式圖V（D）J連接的多樣性（junctionaldiversity）IL5(EBV轉化B細胞)、IL6信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層B細胞雙重抗原識別模式圖C：人C基因片段為1個，編碼109-214aaB細胞所分泌的細胞因子CD40：組成性表達，與活化T細胞CD40L結合，傳遞B細胞活化第二信號；表達：B細胞前體等位排斥(allelicexclusion)：（一）BCR的基因結構、重排及其多樣性D（diversity）：CD20：調節(jié)B細胞增殖與分化，B細胞特異性標志力與多種不同抗原表位結合的現(xiàn)象。BCR復合物結構模式圖自發(fā)分泌針對微生物脂多糖的天然抗體重鏈基因重鏈基因表達m鏈(胞漿和胞膜)表達m鏈表達m、d鏈B細胞抗原受體(BCR)復合物VCH成對排列重排過程主要由一組重組酶來識別V、（D）、J基因片段兩側的H信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2VCBCR復合體介導的胞內信號轉導模式圖VCVDJCB細胞可捕獲可溶性抗原參與補體的溶細胞或溶菌作用CD32：負反饋調節(jié)B細胞活化及抗體的分泌分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層在B細胞中的一對同源染色體上，只有一條染色體上的H或L多分子活化共受體，增強B細胞對抗原刺激的敏感性。CD81：連接CD19和CD21，穩(wěn)定復合物結構。一、產生抗體參與體液免疫VDJCVH（variable）:(m:5/VpreB)表達preBCR表達輕鏈表達輕鏈B淋巴細胞重要的表面分子示意圖（一）BCR的基因結構、重排及其多樣性VC三、協(xié)同刺激分子（co-stimulatorymolecules）

CD40：組成性表達，與活化T細胞CD40L結合，傳遞B細胞活化第二信號；

CD80/CD86：活化B細胞表達，與T細胞上CD28和CTLA-4結合，提供T細胞活化的第二信號；

其他黏附分子：ICAM-1（CD54），LFA-1等。ICAM-1LFA-1協(xié)同刺激分子B淋巴細胞重要的表面分子示意圖四、其他表面分子

CD20：調節(jié)B細胞增殖與分化，B細胞特異性標志CD22：胞漿含ITIM基序，負調節(jié)CD19/CD20/CD81CD32：負反饋調節(jié)B細胞活化及抗體的分泌一、B-1細胞

表面標記：CD5＋

分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層

功能：參與固有免疫第三節(jié)B細胞的亞群免疫應答特點：

多反應性（polyreactivity）—指B細胞抗原受體或其所產生的抗體，以相對較低的親和力與多種不同抗原表位結合的現(xiàn)象。產生IgM為主的低親和力抗體自發(fā)分泌針對微生物脂多糖的天然抗體無免疫記憶二、B-2細胞

產生各類（亞類）特異性Ig作為抗原提呈細胞對抗原進行加工處理及呈遞分泌細胞因子調節(jié)免疫應答B(yǎng)-1細胞與B-2細胞的異同B-1細胞B-2細胞表面標記CD5，mIgMCD19，mIgM和mIgD抗原識別譜多糖抗原蛋白質抗原作用特點快，IgM為主，不發(fā)生類別轉換沒有免疫記憶慢，IgG為主，有類別轉換有免疫記憶分布體腔和腸壁固有層淋巴結、脾臟參與應答非特異性免疫應答特異性免疫應答第四節(jié)B淋巴細胞的功能一、產生抗體參與體液免疫二、加工處理及提呈抗原三、分泌細胞因子調節(jié)免疫應答一、產生抗體參與體液免疫1.中和作用：中和毒素中和病毒2.調理吞噬作用3.參與補體的溶細胞或溶菌作用大量水份涌入細胞內內容物向外滲漏細菌細胞4.NK細胞介導的ADCC作用B淋巴細胞重要的表面分子示意圖脾中的淋巴細胞，50%VC輕、重鏈不同配對失敗另一條染色體H基因重排信號序列和V區(qū)1-98aa，包括CDR1和CDR2分布：腹腔、胸腔、腸壁固有層B細胞在中樞免疫器官的發(fā)育和分化個骨架區(qū)（二）V(D)J重組酶(recombinase)人VH基因片段為40個，根據(jù)同源性分為7個家族，編碼H鏈的BCR多樣性產生的機制早期祖B細胞晚期祖B細胞大前B細胞小前B細胞未成熟B細胞成熟B細胞（一）BCR的基因結構、重排及其多樣性B-1細胞與B-2細胞的異同CD19/CD21/CD81CD20：調節(jié)B細胞增殖與分化，B細胞特異性標志61032.RSS與重鏈VDJ基因重排：D+JDJV+DJVDJ分布：V片段3、J