2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試重點(diǎn)考察試題專家甄選帶答案

2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試重點(diǎn)考察試題專家甄選含答案（圖片大小可自由調(diào)整）第1卷一.綜合考核題庫(共90題)1.PCR反應(yīng)中常用的酶是______。2.黏性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點(diǎn)，但是也有一些不足，請(qǐng)指出這些不足之處。3.下面幾種序列中你認(rèn)為哪一個(gè)(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識(shí)別序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？為什么？4.利用DNA自動(dòng)測(cè)序時(shí)通常進(jìn)行標(biāo)記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP5.切口平移法標(biāo)記DNA探針時(shí)，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA連接酶D、限制酶6.同尾酶即識(shí)別位點(diǎn)不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。7._________成為國(guó)際國(guó)內(nèi)人體健康戰(zhàn)略的重中之重。8.對(duì)柯斯質(zhì)粒(cosmid)描述正確的是A、它具有COS位點(diǎn)，因而可進(jìn)行體外包裝B、它具有質(zhì)粒DNA的復(fù)制特性C、進(jìn)入受體細(xì)胞后，可引起裂解反應(yīng)D、進(jìn)入受體細(xì)胞后，可引起溶源化反應(yīng)E、能與有同源序列的質(zhì)粒進(jìn)行重組9.不是基因工程載體中的報(bào)告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori10.基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn)是：克隆基因的類型、受體的選擇和_________。11.一個(gè)完整的基因克隆過程應(yīng)包括：目的基因的獲取，克隆載體的選擇與改造，____________的連接，重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，篩選出轉(zhuǎn)化子。12.基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是：分子水平上的操作和_________。13.基因工程藥物的特點(diǎn)是高技術(shù)，短周期，高投入，高風(fēng)險(xiǎn)，高收益。14.T4DNA連接酶是從T4噬菌體感染的E．coli中分離的，這種連接酶A、催化連接反應(yīng)時(shí)既能以ATP又能以NAD作為能量來源B、既能催化平末端連接又能催化黏性末端連接C、是一種單肽酶，分子質(zhì)量為74kDaD、既能催化單鏈DNA

連接又能催化雙鏈DNA

連接

15.在______技術(shù)中，DNA限制性片段經(jīng)凝膠電泳分離后，被轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜(或尼龍膜)上，然后與放射性的DNA探針雜交。16.表達(dá)載體和基因工程克隆一般載體在元件構(gòu)成上有何差別？17.下列哪種克隆載體對(duì)外源DNA的容載量最大A、黏粒B、酵母人工染色體(YAC)C、λ噬菌體D、質(zhì)粒18.PCR反應(yīng)中引物長(zhǎng)度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp19.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動(dòng)子B、色氨酸啟動(dòng)子C、乳糖和色氨酸復(fù)合啟動(dòng)子D、乳糖啟動(dòng)子20._________是指真核生物基因組中能特異與核基質(zhì)結(jié)合并富含AT的DNA序列。21.寫出動(dòng)物基因工程的常用方法？22.在細(xì)菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫做A、基因文庫B、基因庫C、基因組文庫D、cDNA文庫23.DNA片段之間的連接方式有哪些？24.印跡是如何形成的？25.下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxedplasmid)性質(zhì)的描述不正確的是A、質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復(fù)制機(jī)制的制約，因而有較多的拷貝數(shù)B、可以在氯霉素作用下進(jìn)行擴(kuò)增C、通常具有較少的拷貝數(shù)D、同嚴(yán)緊型質(zhì)粒整合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子

26.關(guān)于黏粒載體的描述錯(cuò)誤的是A、是由λ噬菌體與質(zhì)粒DNA重組的載體B、既有質(zhì)粒的特性，又有噬菌體DNA的特性(如可體外包裝)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC載體那樣構(gòu)建大片段的基因組文庫

27.Ⅱ型限制性內(nèi)切核酸酶：A、有內(nèi)切核酸酶和甲基化酶活性且經(jīng)常識(shí)別回文序列B、僅有內(nèi)切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供C、限制性識(shí)別非甲基化的核苷酸序列D、有外切核酸酶和甲基化酶活性28.在引物存在的情況下才能發(fā)揮作用的酶是A、限制性核酸內(nèi)切酶B、末端轉(zhuǎn)移酶C、逆轉(zhuǎn)錄酶D、DNA連接酶29.Cre-loxP系統(tǒng)兩個(gè)loxP位點(diǎn)位于同一條DNA鏈上且方向相同，Cre重組酶敲除loxP間的序列30.在細(xì)菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫基因庫。31.請(qǐng)寫出基因工程的基本操作順序？32.Ti質(zhì)粒33.轉(zhuǎn)基因技術(shù)導(dǎo)致的生物安全威脅屬于生態(tài)環(huán)境破壞。34.催生基因工程技術(shù)誕生的關(guān)鍵技術(shù)是DNA轉(zhuǎn)化技術(shù)的突破。35.如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？36.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計(jì)一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。37.藍(lán)白斑篩選是A、表型檢測(cè)法B、核酸雜交檢測(cè)法C、序列鑒定法D、物理特性檢測(cè)法38.大部分限制性核酸內(nèi)切酶最適反應(yīng)溫度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃39.啟動(dòng)子從轉(zhuǎn)錄模式上可分為哪兩種？表達(dá)系統(tǒng)常選用哪一種？其機(jī)理是什么？40.核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和_______。41._________決定PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性與長(zhǎng)度。42.Watson和Crick兩位科學(xué)家于1953年提出來的DNA是以一種_______________形式存在。43.______________是所有已知DNA聚合酶中持續(xù)合成能力最強(qiáng)的一個(gè)，它的3’-5’核酸外切酶活性約為Klenow片段的1000倍。44._________是利用同源重組去改變內(nèi)源性基因，通過基因打靶可以成功剔除一個(gè)基因外顯子，增加一個(gè)基因和引起點(diǎn)突變。45.基因工程上常用的限制性內(nèi)切酶是III型酶。46.基因表達(dá)載體中啟動(dòng)子的本質(zhì)是_________。47.何謂基因工程？48.______________是應(yīng)用最廣也是研究最深入的DNA聚合酶。49.對(duì)外源基因進(jìn)行百萬倍的擴(kuò)增可采用________技術(shù)50.質(zhì)粒具有下列哪幾項(xiàng)生物學(xué)特性A、質(zhì)粒的復(fù)制B、拷貝數(shù)C、不相容性D、轉(zhuǎn)移性E、表達(dá)性51.分子雜交的化學(xué)原理是形成()A、疏水鍵B、配位鍵C、氫鍵D、共價(jià)鍵52.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最廣泛的選擇標(biāo)記，常用的抗生素抗性有哪幾種？53.原核表達(dá)系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動(dòng)子Trp又稱為A、乳糖啟動(dòng)子B、乳糖和色氨酸的雜合啟動(dòng)子C、噬菌體的左向啟動(dòng)子D、色氨酸啟動(dòng)子54.用Sanger雙脫氧法進(jìn)行DNA測(cè)序時(shí)，凝膠上讀出的序列是A、模板鏈的互補(bǔ)鏈B、mRNA的C、cDNA的D、模板鏈的55._________的編碼產(chǎn)物可用簡(jiǎn)單的生物化學(xué)反應(yīng)或借助特殊的儀器直接觀察。56.核酸分子雜交的探針只能是標(biāo)記的小片段DNA分子57.不同的表達(dá)載體需要不同的受體系統(tǒng)進(jìn)行基因表達(dá)，受體系統(tǒng)根據(jù)宿主細(xì)胞的性質(zhì)可以分為兩大類：________________和真核表達(dá)系統(tǒng)。58.試述基因組文庫的構(gòu)建流程。59.基因組文庫的構(gòu)建一般包括下列基本步驟A、細(xì)胞染色體大分子DNA的提取和大片段DNA的制備B、載體DNA的準(zhǔn)備C、載體與外源大片段DNA的連接D、體外包裝機(jī)基因組DNA文庫的擴(kuò)增E、重組DNA的篩選和鑒定60.Northern雜交時(shí)，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體61.下面關(guān)于多克隆位點(diǎn)MultipleCloneSite（MCS)的描述錯(cuò)誤的一項(xiàng)是A、僅位于質(zhì)粒載體中B、具有多種酶的識(shí)別序列C、不同酶的識(shí)別序列可以有重疊D、一般是人工合成后添加到載體中62.EcoRI的識(shí)別序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-363.YAC載體基本組成元件有_________，著絲粒，端粒，MCS，篩選標(biāo)記。64.如果PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的DNA增加了1倍，那么10個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了1000 倍，20個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了100萬倍，30個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了10億倍。65.進(jìn)行體外重組時(shí)，外源片段和載體分子之間的物質(zhì)的量比值一般為A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）66.細(xì)菌抗藥性基因一般存在于A、核酸DNAB、質(zhì)粒C、RNAD、小的直線型DNA67.Cohen等在_________年構(gòu)建了第一個(gè)有功能的重組DNA分子。68.一個(gè)質(zhì)粒含有四環(huán)素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr內(nèi)有一HindIII位點(diǎn)，LacZ中有一EcoRI

位點(diǎn)。如用這兩種切割載體一并連接入相應(yīng)的外源片段，則帶有該重組質(zhì)粒的細(xì)胞將A、對(duì)四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍(lán)色B、有四環(huán)素抗陛，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色C、對(duì)四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色D、有四環(huán)素抗性，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍(lán)色69.下列測(cè)序方法哪個(gè)是屬于經(jīng)典的DNA測(cè)序方法A、ABISOLID測(cè)序B、Illumina測(cè)序C、Roche454D、雙脫氧終止法70.基因治療通常采用哪種載體比較合適A、逆轉(zhuǎn)錄病毒B、Ti質(zhì)粒C、噬菌體D、質(zhì)粒pBR32271.基因工程的三大基本元件是供體基因、受體細(xì)胞、_____________。72.下列哪一項(xiàng)不屬于cDNA的第二條鏈的合成的方法A、自身引導(dǎo)合成法B、置換合成法C、引導(dǎo)合成法D、隨機(jī)引物合成法73.擴(kuò)增外源基因時(shí)需要DNA載體中的（）性質(zhì)A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我復(fù)制能力D、自我轉(zhuǎn)錄能力74.按照人們的意愿，改變基因中堿基的組成，以達(dá)到基因突變的技術(shù)稱為________。75.迄今所發(fā)現(xiàn)的限制性內(nèi)切核酸酶既能作用于雙鏈DNA，又能作用于單鏈DNA。76.下列哪一項(xiàng)不具有吸附DNA的功能A、經(jīng)特殊處理的濾紙B、尼龍膜C、玻璃膜D、硝酸纖維素膜77.________技術(shù)是基于互補(bǔ)的DNA單鏈分子能夠形成穩(wěn)定雙螺旋結(jié)構(gòu)的天然特性而發(fā)展起來的。78.下列哪一項(xiàng)不屬于遺傳表型檢測(cè)法A、抗藥性標(biāo)記基因B、LacZ基因藍(lán)白斑篩選C、GFPD、核酸分子雜交79._________是由磷脂組成的膜狀結(jié)構(gòu)，用它包裝外源DNA分子，然后與植物原生質(zhì)體共保溫。80.M1載體在多克隆位點(diǎn)的兩側(cè)引入了T7和T3兩個(gè)噬菌體的啟動(dòng)子，這樣增加了該載體的功能，下述四種功能中哪一種是不正確的?A、可以對(duì)插入到多克隆位點(diǎn)的外源片段進(jìn)行轉(zhuǎn)錄分析B、利用這兩個(gè)啟動(dòng)子的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增C、利用通用引物進(jìn)行序列分析D、利用這兩個(gè)啟動(dòng)子進(jìn)行定點(diǎn)突變81.按質(zhì)粒復(fù)制的調(diào)控及其拷貝數(shù)可分兩類：嚴(yán)緊控制型質(zhì)粒和_____________。82.通過基因敲除技術(shù)使生物體缺失一個(gè)或更多基因，從而判斷這些被敲掉基因的功能，常稱之為_______________。83.在基因工程中，堿性磷酸酶多與下列那種工具酶一起標(biāo)記DNA分子的5‘-末端A、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶B、核酸外切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶84.基因操作的兩大關(guān)鍵技術(shù)是A、工具酶與載體B、轉(zhuǎn)化細(xì)胞和供體細(xì)胞C、基因克隆和基因重組D、克隆載體和表達(dá)載體85.基因治療研究的基本程序不包括A、目的基因的選擇與制備B、靶細(xì)胞的選擇和培養(yǎng)C、基因的導(dǎo)入和表達(dá)D、大腸桿菌的培養(yǎng)86.Klenow大片段酶具有幾種酶活性A、1種B、2種C、3種D、4種87.質(zhì)粒作為載體使用時(shí)必須具備如下條件A、拷貝數(shù)較高B、分子量較小C、具有選擇標(biāo)記D、具有較多的限制性酶切位點(diǎn)E、具有復(fù)制起始點(diǎn)88.連接反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP89.cDNA克隆與基因組克隆有何不同？90.下列哪一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶蛋白分子組成只有一單一亞基A、II型B、III型C、IV型D、I型第1卷參考答案一.綜合考核題庫1.正確答案:TaqDNA聚合酶2.正確答案:(1)載體易自身環(huán)化；(2)若是用同一種限制性內(nèi)切核酸酶產(chǎn)生的黏性末端連接又不易定向克??；(3)難插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重組率較低，即使用堿性磷酸酶處理了載體，防止了載體的自身環(huán)化，載體也有成環(huán)的傾向；(5)用這種方法產(chǎn)生的重組體往往含有不止一個(gè)外源片段或不止一個(gè)載體連接起來的串聯(lián)重組體，增加篩選工作的困難。3.正確答案:GATATC；AAATTT；因?yàn)樗鼈兪腔匚男蛄小?.正確答案:A5.正確答案:A6.正確答案:正確7.正確答案:轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)8.正確答案:A,B,D,E9.正確答案:D10.正確答案:載體的選擇11.正確答案:目的基因與克隆載體12.正確答案:細(xì)胞水平上的表達(dá)13.正確答案:錯(cuò)誤14.正確答案:B15.正確答案:Southern雜交16.正確答案:表達(dá)載體：?jiǎn)?dòng)子、終止子、核糖體結(jié)合位點(diǎn)（SD序列）、篩選標(biāo)記、復(fù)制子、多克隆位點(diǎn)；克隆載體：篩選標(biāo)記、復(fù)制子、多克隆位點(diǎn)。17.正確答案:B18.正確答案:D19.正確答案:B20.正確答案:核基質(zhì)附著區(qū)21.正確答案:顯微注射技術(shù)構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠；基因打靶策略；病毒載體法；精子載體法；ZFN介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因；TALEN技術(shù)。22.正確答案:A23.正確答案:具黏性末端的DNA片段之間的連接、具平末端DNA片段之間的連接、DNA片段末端修飾后進(jìn)行連接、DNA片段加連桿（linker）后的連接。24.正確答案:DNA沿凝膠平面垂直方向移出并轉(zhuǎn)移到膜上，轉(zhuǎn)移后各個(gè)DNA片段在膜上的相對(duì)位置與凝膠中的相對(duì)位置一樣。25.正確答案:C26.正確答案:D27.正確答案:B28.正確答案:C29.正確答案:正確30.正確答案:錯(cuò)誤31.正確答案:目的基因的制備；目的基因與載體連接；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的表達(dá)與檢測(cè)。32.正確答案:是根癌農(nóng)桿菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為共價(jià)閉合雙鏈環(huán)狀DNA分子。33.正確答案:錯(cuò)誤34.正確答案:錯(cuò)誤35.正確答案:可以通過合成核苷酸探針或設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并PCR引物從cDNA文庫或基因組文庫中篩選。或者利用相應(yīng)的抗體從cDNA表達(dá)文庫中篩選相應(yīng)的克隆。36.正確答案:簡(jiǎn)并引物PCR37.正確答案:A38.正確答案:B39.正確答案:啟動(dòng)子從轉(zhuǎn)錄模式上分為：組成型啟動(dòng)子和誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，表達(dá)系統(tǒng)常選用誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，機(jī)理：指在某些特定的物理或化學(xué)信號(hào)的刺激下，該種類型的啟動(dòng)子可以大幅度的提高基因的轉(zhuǎn)錄水平。40.正確答案:RNA探針41.正確答案:引物42.正確答案:DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)43.正確答案:T7DNA聚合酶44.正確答案:基因打靶技術(shù)45.正確答案:錯(cuò)誤46.正確答案:一段DNA片段47.正