杏仁核腦片場電位的記錄及其應(yīng)用

杏仁核腦片場電位的記錄及其應(yīng)用杏仁核腦片場電位的記錄及其應(yīng)用

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杏仁核腦片場電位的記錄及其應(yīng)用

1.2.3藥物加入試驗過程中應(yīng)用的藥物均加入到灌流腦片的人工腦脊液中.

統(tǒng)計學(xué)處理:采納SPSS10.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入和整理，試驗數(shù)據(jù)用x±s表示，組間采納方差分析.P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義.

2結(jié)果

2.1杏仁核與海馬場電位的比較海馬CA1區(qū)場電位的幅度為(1.46±0.10)mV（n=10，圖1）.BLA的電位為(0.13±0.05)mV（n=9），其放大倍數(shù)為海馬的10倍，杏仁核的場電位只有海馬CA1場電位的1/10.

2.2杏仁核場電位的藥理學(xué)特性在灌流的人工腦脊液中加入0.1μmol/L谷氨酸,可見場電位明顯增大，洗去谷氨酸后場電位基本恢復(fù)至基線的水平(圖2A).灌流液中加入α氨基羥甲基惡唑丙酸(AMPA)受體拮抗劑CNQX10μmol后

，場電位的幅度顯著下降，進(jìn)一步加入N甲基D天冬氨酸(NMDA)受體阻斷劑APV100μmol后，場電位幾乎消逝,洗去CNQX和APV后，場電位基本恢復(fù)至加藥前的水平(圖2B).

2.3杏仁核LTP的誘導(dǎo)在場電位記錄穩(wěn)定10min后，間隔10min應(yīng)用兩串高頻刺激外囊，同時觀看場電位幅度和斜率的變化狀況.BLA場電位的幅度和斜率的變化趨勢全都(表1)，兩串高頻刺激后，場電位明顯增大，之后場電位漸漸下降，高頻刺激15min后場電位基本穩(wěn)定，但仍顯著大于基礎(chǔ)值（n=9,P0.01）,這種增加作用持續(xù)30min以上.通過對場電位斜率用基礎(chǔ)值標(biāo)準(zhǔn)化后，可見兩串高頻刺激后30min增加的場電位的斜率仍舊維持在基礎(chǔ)值的(146.1±6.9)％(n=9,P0.01，圖3).表1兩串高頻刺激前后場電位幅度和斜率的變化

3爭論

杏仁核又稱杏仁復(fù)合體，是大多數(shù)哺乳類動物共有的結(jié)構(gòu)，位于顳葉內(nèi).杏仁核可分為很多大小不等的核團(tuán)，通常將這些核群分為皮質(zhì)內(nèi)側(cè)群、基底外側(cè)核群和前杏仁區(qū)、皮質(zhì)杏仁移行區(qū)兩大過渡區(qū)［4］.杏仁核與皮層和皮層下結(jié)構(gòu)有著廣泛的纖維聯(lián)系，隨著神經(jīng)科學(xué)的進(jìn)展，杏仁核的功能倍受關(guān)注［5］.然而由于解剖結(jié)構(gòu)的關(guān)系，很難通過電生理的手段直接記錄到在體動物杏仁核的神經(jīng)細(xì)胞的活動，而且在體試驗易受到血壓、呼吸和血腦屏障等的影響.腦片標(biāo)本具有有序的神經(jīng)元和纖維排列及比較完整的神經(jīng)解剖通路，可在解剖顯微鏡下直接定位，便于電生理操作，腦片能夠復(fù)制出整體動物大多數(shù)電生理現(xiàn)象，模擬在體試驗，因而腦片是討論杏仁核功能的比較抱負(fù)的標(biāo)本.

腦片上應(yīng)用場電位記錄的方法討論神經(jīng)細(xì)胞的活動多數(shù)是在海立刻進(jìn)行［6］.有討論［7］報道，通過記錄杏仁核的場電位討論杏仁核功能，然而這類討論都是在國外的討論室開展，而且試驗儀器都是國外生產(chǎn)，價格昂貴.我們應(yīng)用國產(chǎn)SWF2W微電極放大器和RM6240記錄系統(tǒng)，價格廉價，而且可以穩(wěn)定地記錄到杏仁核的場電位.杏仁核的神經(jīng)細(xì)胞分布較稀疏，場電位小，大約只有海馬的1/10，試驗中要求信號的放大倍數(shù)為記錄海馬CA1的10倍.由于信噪比小，因此記錄穩(wěn)定的杏仁核場電位難度極大.在腦片保持良好活性的前提下，記錄系統(tǒng)要求抗干擾強(qiáng)，噪音的幅度應(yīng)小于0.01mV.記錄系統(tǒng)具有良好的屏蔽和接地后，假如還有比較大的50Hz的噪音，可使用噪音消退器去除該頻率的干擾，但又不影響信號本身的提取.在腦片保持良好活性及記錄系統(tǒng)具有很強(qiáng)的抗干擾作用的狀況下，只要信號放大到肯定程度，就可以在杏仁核記錄到場電位.

在杏仁核的腦片上，刺激外囊可以在BLA記錄到突觸后反應(yīng)，來自皮層的神經(jīng)纖維經(jīng)外囊投射至BLA，刺激外囊可模擬皮層的興奮輸入［8］.由皮層投射到BLA的纖維主要是谷氨酸能神經(jīng)元，BLA記錄到的主要是興奮性的突觸后電位.在灌流液中加入谷氨酸，場電位明顯增大；加入AMPA受體阻斷劑CNQX后，場電位的幅度顯著降低，進(jìn)一步加入NMDA受體拮抗劑APV后，場電位幾乎完全被阻斷，洗去阻斷劑后場電位基本恢復(fù)，提示外囊至BLA的突觸聯(lián)系主要以谷氨酸為神經(jīng)遞質(zhì)，由AMPA受體和NMDA受體介

杏仁核腦片場電位的記錄及其應(yīng)用

導(dǎo)，以前者為主.也提示在灌流液中加入藥物，通過觀看藥物對場電位的作用探討藥物對杏仁核功能的影響.

腦片場電位常用于討論海馬的突觸可塑性如LTP和LTD，LTP和LTD被認(rèn)為是學(xué)習(xí)記憶的基本機(jī)制［9］.討論表明杏仁核參加心情情感相關(guān)的學(xué)習(xí)與記憶過程，提示杏仁核的場電位有可能誘導(dǎo)出LTP.結(jié)果表明，我們的試驗系統(tǒng)在杏仁核可以誘導(dǎo)出LTP,試驗中相隔10min予以外囊高頻刺激，觀看到記錄的BLA場電位的幅度和斜率均明顯增大，而且持續(xù)時間在30min以上.杏仁核的LTP可能參加了學(xué)習(xí)與記憶的過