取小鼠腦組織培訓課件

品檔的。過近的：1.；2.；剪開皮膚，漏出顱骨；住剪；顱逐；出鑷管；向。3.；，容；時否腦；把輕要；要。微要。先醉小鼠，耳來了是4多）小僵硬小鼠只需要用注射器就行了，我做的2535g的小鼠一般用50mLN+30L體性離免。后子劍用剪胸剪側(cè)，露胸，提插針流聚孔同時刀頭剪皮手用科剪脊髓彎用顱顱可以取出整個固定24h后即。體作下：驗作驟：1)鼠0.0025ml4%用10%水合氯3-g腹注醉。2)將上。3)解。4)約0.c最針針。5)將灌流器的導管部開口放到生理鹽水中里，打開灌流器灌流，直到從右心耳流出的液體停止流流者都。品檔品檔6)將灌流器的導管小心的移至4或2.5%二醛中?？磸埫鳌?)灌約5分鐘，灌流液約150毫升）8）。9）將取定24小時后移至30%糖中4保。我們實驗切用%注saline2m，%多醛20ml經(jīng)左心室固定然在4度%定46浸20%30糖底就可以切片，切片首先需要的leica0的，不知道lz那有一種原始的自己刷凍臺的那種，比較麻煩，切片厚度大概選擇200um多大U平針后許輸開并剪盈右（見出，用管將心室和平頭針一起鉗夾固定再：作以留。試劑名稱%聚醛-鈉氫氧化鈉及：A：醛 40g水 lB：N4O .8g水300mlC：aH 3.86g水200m操過程A在50l，B和C將B液倒入C液中入A液，以1nNaOH或1NCl將pH調(diào)至7.27.4水至1000ml充混合二醛保存期限及4℃冰箱保存?zhèn)溆?，長期保存很個在問實希就說經(jīng)感位啻！首先約230250g標本，量PCR、nbot的存。問如下：熒光實量R方：1、標本需要灌注么，有？品檔品檔2、標本取下后液氮速凍，然后-0度冰箱，這？3中RNA放80易？nt方：4、標本用什么溶液灌注，溫度？5、于RT-PR和nt檢（注的）凍片面：6、灌注沖血用什么溶液，溫度？74甲灌毫？84甲是？9，PBS是B是15%到20%再30種？10后30%用0.1M的PBS配水3換過次糖溶。友議切后水會好果跟做的型是切？11或tips。血，？用的是含有肝素鈉的瓶50ml的生理鹽水入80mg的肝素鈉素光保存用4注射器推100l10min。每支肝每含12500U相于100mg用2l生理鹽水釋分成40毒存局肝，肝。純的素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100，0個抗凝l大23凝成1%取0.1ml加內(nèi)熱8℃烘干每管能使5～10ml血液不鼠2.53mg·(20～300g體重)-1兔或貓10mk1,狗50gg-大23。74甲灌毫？甲注2mi，10l。蛋白變性。84甲多？者24但在溶。9，PBS是B是15%到20%再30種？蔗糖用0.1M的PB般配20%和30兩個濃度糖48h。品檔品檔至少現(xiàn)24h是不夠的。沉糖必須完全沉底。10后30%用0.1M的PBS配水3換過次糖溶。友議切后水會好果跟做的型是如？囟1.40mm到前囟-60m右。提題個大概的原則自。T-PCE與B都是分子生物學都0是A那取A供血區(qū)域，嗅極后3m。不的影后，。至于你的腦組織灌注固定水3我一般在脫刀多休20糖1，30%蔗糖2總共3。頭鹽洗法沖掉腦內(nèi)血管的血吧？我現(xiàn)取-PCR和B而冰PBS50ml般1后取氮這是標灌，好的）冰標注已照醛方了會的。是PBS你能否沖干凈血管內(nèi)的血液，而且一般觀點認為灌注液最好在10于缺血在10的的細會大臟如放話微時是不過0大，針感。后固定我認為時間不宜太長，因為過多的甲醛會增加片子的背景顏色。以6到2時為佳。是30%（pbs就。會晶。切，切時的是易冰的解辦較單速，-0左組織不于5?？–M1850的它想白悉。凍片面：灌注沖血可以用生理鹽水、0.1M的PB0.01M的S都可以注調(diào)pH值我們實驗品檔品檔用冷快右耳流出的液體變白為止。固灌搐取，動的。我們后固定和沉糖都在4度進行4和蔗糖溶液也是4度保。多注對定是24小時，時間過1。對于大腦：放到4度多聚甲醛進行24時24h梯度脫水，那假如2天后已因做，的：第一：蔗糖溶液是否需要和多聚甲醛溶