何宣鵬-答辯(定稿)201101020132課件

姓名：何宣鵬專業(yè)：化學(xué)學(xué)號(hào)：201101020132指導(dǎo)教師：吳娜（講師）草果GC-MS指紋圖譜研究姓名：何宣鵬草果GC-MS指紋圖譜研究目錄實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容結(jié)論Clicktoaddtitleinhere2344Clicktoaddtitleinhere論文研究背景及意義1參考文獻(xiàn)5研究內(nèi)容及技術(shù)路線13結(jié)果與討論目錄實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容結(jié)論Clicktoad1論文研究背景及意義

草果為姜科豆蔻屬多年生草本植物，全株有辛香味。目前，研究者對草果的研究主要集中在基源植物、栽培技術(shù)研究、生藥材鑒定、中藥化學(xué)成分、炮制的研究、藥理作用、臨床用藥、生理功能研究等方面，對草果GC-MS指紋圖譜研究的文章很很少報(bào)道。論文通過對HS-GC-MS條件優(yōu)化，對草果不同部位（果、殼、仁、莖、葉、芽）揮發(fā)性成分進(jìn)行測定，同時(shí)建立草果不同部位、不同產(chǎn)地（紅河、楚雄、麗江、大理、玉溪、文山）、不同炮制方法（炒制、鹽制、姜制、凈制、醋制）的揮發(fā)性GC-MS指紋圖譜，采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2004A版”軟件對指紋圖譜進(jìn)行相似度計(jì)算，采用SPSS19.0軟件對指紋圖譜進(jìn)行聚類分析、主成分分析，為草果的快速鑒別、品質(zhì)的評價(jià)、質(zhì)量的控制、生產(chǎn)工藝提供參考。1論文研究背景及意義草果為姜科豆蔻屬多年生草本植物，全2實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容

凈制：除去外殼，搓散，篩去膜質(zhì)的假種皮。炒制：取原藥材放入鍋內(nèi)，用文火炒至外表黑褐，發(fā)泡，有香氣時(shí)取出，放冷，篩去灰屑，用時(shí)搗碎。鹽制：每草果100Kg，用食鹽2Kg。姜制：每草果仁100Kg，用生姜10Kg或干姜3Kg。醋制：醋煮。

草果的炮制國樣品預(yù)處理

將草果不同部位（殼、仁、果、莖、葉、芽）、不同產(chǎn)地（紅河、楚雄、麗江、大理、文山、玉溪）、不同炮制方法（凈制、炒制、鹽制、姜制、醋制）的草果于萬能中藥粉碎機(jī)中粉碎，過100目中藥篩，并儲(chǔ)存在密封袋中，貼上標(biāo)簽。草果的莖、葉、芽放入放入電熱鼓風(fēng)干燥箱中，于50℃下烘60h，再粉碎。2實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容凈制：除去外殼，搓散，篩去膜質(zhì)的假種皮2實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容

準(zhǔn)確稱取三份1.00g的草果干粉樣品，其中兩份置于50mL的具塞三角燒瓶中，加入15.00mL正己烷溶劑，超聲處理30min，超聲功率：200W，過濾，加5.00mL的正己烷洗滌殘?jiān)^濾，合并濾液，取適量體積的溶液分別加入直接進(jìn)樣瓶和頂空進(jìn)樣瓶；另一份草果干粉樣品直接加入頂空進(jìn)樣瓶，待測。

樣品的制備國儀器條件

GC條件：柱箱溫度80℃；進(jìn)樣口溫度220℃；分流比20:1；柱流量1.0ml/min；載氣：He（純度≥99.999%氣相毛細(xì)管色譜柱HP-FFAP（30m×0.250mm×0.25um）；程序升溫：初始溫度80℃，保持3min，以6℃/min升至180℃，保持2min；總運(yùn)行時(shí)21.67min。MS條件：離子源溫度200℃；接口溫度220℃；檢測器電壓0.88KV；溶劑延遲時(shí)間2min2實(shí)驗(yàn)研究的主要內(nèi)容準(zhǔn)確稱取三份1.00g的草果干粉樣實(shí)驗(yàn)流程圖實(shí)驗(yàn)流程圖3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上分流比分別為不分流、10:1、20:1、50:1不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜分流比選擇3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同分流比對草果超聲3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不不同柱流量對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上柱流量分別為0.5、1.0、1.5不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜柱流量比較3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不不同柱流量對草果超3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同色譜柱對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上色譜柱分別為Rtx-5MS、DB-1701、HP-FFAP不同色譜柱對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜色譜柱的優(yōu)化3結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同色譜柱對草果超聲3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩溫度分別為120℃、130℃、140℃、150℃不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜超聲提取頂空進(jìn)樣振蕩溫度選擇3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩溫度對草果超聲提取頂3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩時(shí)間對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩時(shí)間分別為10min、15min、20min、25min不同振蕩時(shí)間對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜超聲提取頂空進(jìn)樣振蕩時(shí)間選擇3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩時(shí)間對草果超聲提取頂3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩溫度對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩溫度分別為80℃、100℃、120℃、150℃不同振蕩溫度對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜干粉頂空進(jìn)樣振蕩溫度選擇3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩溫度對草果干粉頂空進(jìn)3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩時(shí)間對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩時(shí)間分別為10min、15min、20min不同振蕩時(shí)間對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜干粉頂空進(jìn)樣振蕩時(shí)間選擇3結(jié)果與討論3.2HS條件選擇不同振蕩時(shí)間對草果干粉頂空進(jìn)3結(jié)果與討論3.3提取和進(jìn)樣方式的優(yōu)化不同提取進(jìn)樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上提取進(jìn)樣方式分別為超聲提取直接進(jìn)樣、超聲提取頂空進(jìn)樣、干粉頂空進(jìn)樣不同提取進(jìn)樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的時(shí)間、信號(hào)三維圖譜

提取進(jìn)樣方式的優(yōu)化3結(jié)果與討論3.3提取和進(jìn)樣方式的優(yōu)化不同提取進(jìn)樣方式對優(yōu)化結(jié)果

基線平穩(wěn)、出峰較多、峰形對稱、重疊峰少、雜峰少、峰形高大。

優(yōu)化方式國優(yōu)化結(jié)果

GC-MS的優(yōu)化條件為：分流比為20:1、柱流量為1.0ml/min、色譜柱為HP-FFAP；草果超聲提取頂空進(jìn)樣的振蕩溫度為140℃，振蕩時(shí)間為20min；草果干粉頂空進(jìn)樣振蕩溫度為150℃，振蕩時(shí)間為10min；草果的最佳提取進(jìn)樣方式為：干粉頂空進(jìn)樣。優(yōu)化結(jié)果基線平穩(wěn)、出峰較多、峰形對稱、重疊峰少、雜峰少結(jié)果與討論國揮發(fā)性成分

草果不同部位共鑒定出86個(gè)化合物，草果的果中鑒定出43個(gè)化合物，無特征化合物；草果果殼中鑒定出55個(gè)化合物，有7個(gè)是特征化合物；草果果仁中鑒定出44個(gè)化合物，有5個(gè)是特征化合物；草果的莖中鑒定出35個(gè)化合物，有4個(gè)是特征化合物；草果的葉中鑒定出50個(gè)化合物，有13個(gè)為特征化合物；草果芽中鑒定出31個(gè)化合物，無特征化合物；草果的果、殼、仁、莖、葉、芽中都含有的化合物有13個(gè)，這13個(gè)化合物中，又以1,8-桉葉素（1,8-cineole）含量最大，含量都在4.00%以上。結(jié)果與討論國揮發(fā)性成分草果不同部位共鑒定出86個(gè)化合結(jié)果與討論揮發(fā)性成分測定結(jié)果（局部）結(jié)果與討論揮發(fā)性成分測定結(jié)果指紋圖譜建立指紋圖譜建立相似度計(jì)算結(jié)果不同部位果殼仁莖葉芽R果1.0000.8910.5510.6170.5500.3180.884殼0.8911.0000.5020.7900.6970.4260.872仁0.5510.5021.0000.4120.4780.2560.843莖0.6170.7900.4121.0000.6320.3730.685葉0.5500.6970.4780.6321.0000.4470.707芽0.3180.4260.2560.3730.4471.0000.408R0.8840.8720.8430.6850.7070.4081.000產(chǎn)地紅河楚雄麗江大理玉溪文山R紅河1.0000.8640.7220.5500.8050.7780.924楚雄0.8641.0000.7200.6260.9180.9320.958麗江0.7220.7201.0000.4330.7000.6000.825大理0.5500.6260.4331.0000.6180.6650.698玉溪0.8050.9180.7000.6181.0000.9070.931文山0.7780.9320.6000.6650.9071.0000.905R0.9240.9580.8250.6980.9310.9051.000炮制方法凈制炒制鹽制姜制醋制R凈制1.0000.8450.9570.8770.8720.960炒制0.8451.0000.8500.9920.7280.944鹽制0.9570.8501.0000.8940.8570.964姜制0.8770.9920.8941.0000.7590.966醋制0.8720.7280.8570.7591.0000.883R0.9600.9440.9640.9660.8831.000相似度計(jì)算結(jié)果不同部位果殼仁莖葉芽R果1.0000.8910相似度分布曲面圖相似度分布曲面圖聚類分析樹狀圖聚類分析樹狀圖主成分碎石圖主成分碎石圖主成分三維投影圖主成分三維投影圖4結(jié)論

草果不同部位樣品差異大，分布不穩(wěn)定；不同產(chǎn)地的草果揮發(fā)性成分和含量雖然有差異，但是分布比較穩(wěn)定；不同炮制方法的草果揮發(fā)性成分很相近，而且樣品分布很穩(wěn)定，說明草果通過炮制后藥性很穩(wěn)定。

相似度評價(jià)結(jié)果國聚類、主成分分析結(jié)果

聚類分析結(jié)果：草果果不同部位樣品可以分為2類；草果不同產(chǎn)地樣品可以分為2類；草果不同炮制方法樣品可以分為3類。主成分分析結(jié)果：草果不同部位樣品共提取了3個(gè)主成分；草果不同部位共有化學(xué)成分共提取了4個(gè)主成分；草果不同產(chǎn)地樣品共提取了3個(gè)主成分；草果不同炮制方法樣品共提取了3個(gè)主成分。4結(jié)論草果不同部位樣品差異大，分布不穩(wěn)定；不同產(chǎn)地參考文獻(xiàn)1

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