第十一章癌基因與抑癌基因課件

癌基因與抑癌基因

Oncogeneandtumorsuppressorgene

劉玲生物化學(xué)教研室癌基因與抑癌基因

Oncogeneandtumo1

細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與增殖受兩類(lèi)基因調(diào)控：

正調(diào)節(jié)信號(hào)：促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，并阻止其發(fā)生終末分化，調(diào)控失常時(shí)表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞的惡性生長(zhǎng)，多數(shù)癌基因起作用；

負(fù)調(diào)節(jié)信號(hào)：抑制增殖，促進(jìn)分化、成熟和衰老，最后凋亡，抑癌基因發(fā)揮作用。癌基因與抑癌基因的作用機(jī)制涉及基因表達(dá)調(diào)控及細(xì)胞分裂、分化過(guò)程。癌基因編碼類(lèi)生長(zhǎng)因子多肽及其受體分子，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)信息傳遞系統(tǒng)刺激細(xì)胞增殖。細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與增殖受兩類(lèi)基因調(diào)控：2負(fù)調(diào)信號(hào)抑制增殖，促進(jìn)分化、成熟、衰老和凋亡正調(diào)信號(hào)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,阻止分化細(xì)胞正常抑制增殖，促進(jìn)分化、成熟、衰老和凋亡促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖,阻止3第一節(jié)癌基因(正調(diào)因素)癌基因概念病毒癌基因細(xì)胞癌基因癌基因產(chǎn)物及功能第一節(jié)癌基因(正調(diào)因素)癌基因概念4癌基因概念癌基因（Oncogenes）：指細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化的基因，當(dāng)它的結(jié)構(gòu)異常或表達(dá)異常時(shí)，可以引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。一般是指編碼生長(zhǎng)因子、生長(zhǎng)因子受體、細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)信息傳遞分子，以及與生長(zhǎng)分裂有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子等的基因。癌基因概念癌基因（Oncogenes）：指細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生5癌基因的分類(lèi)病毒癌基因（virusoncogenes，v-onc.）：是一類(lèi)存在于腫瘤病毒（大多數(shù)是逆轉(zhuǎn)錄病毒）中的、能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。如v-src等。細(xì)胞癌基因（cellular-oncogene,c-onc）又稱(chēng)原癌基因（Proto-oncogenes）：與病毒癌基因具有同源性，存在于正常組織細(xì)胞基因組中的靜止或非活化狀態(tài)的癌基因。如c-myc、c-ras、c-src等。癌基因的分類(lèi)病毒癌基因（virusoncogenes，v-6一、病毒癌基因(virusoncogenes)Rous

Peyton

：The1966NobelPrizeinPhysiologyorMedicineRous肉瘤病毒（RSV）一、病毒癌基因(virusoncogenes)RousP7雞肉瘤病毒（RSV）基因組結(jié)構(gòu)圖

長(zhǎng)末端重復(fù)序列正常的病毒基因癌基因

調(diào)節(jié)和啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生病毒核心蛋白產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄酶和整合酶

gag

LTR

pol

env

src

LTR產(chǎn)生病毒外膜蛋白產(chǎn)生酪氨酸激酶

在逆轉(zhuǎn)錄病毒的雙鏈cDNA合成過(guò)程中，病毒5＇端和3＇端的獨(dú)特序列重復(fù)復(fù)制，兩末端各增加了另一端的U序列，從而形成長(zhǎng)末端重復(fù)序列LTR（longterminalrepeat）。LTR中含有病毒的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子.雞肉瘤病毒（RSV）基因組結(jié)構(gòu)圖長(zhǎng)末端正常的病毒基因癌基8Proto-oncogenes再感染宿主細(xì)胞攜帶癌基因的病毒顆粒宿主細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制整合轉(zhuǎn)錄病毒RNARNA-DNA前病毒DNA細(xì)胞基因組DNA病毒RNA-癌基因RNA病毒顆粒癌變逆轉(zhuǎn)錄病毒的水平傳播Proto-oncogenes再感染宿主細(xì)胞攜帶癌基因宿主細(xì)9二、細(xì)胞癌基因存在于正常細(xì)胞中，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)，增殖，分化和發(fā)育等生理功能，為了與被激活后能使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的癌基因區(qū)分開(kāi)來(lái)，而將正常細(xì)胞內(nèi)未激活的癌基因稱(chēng)為原癌基因。二、細(xì)胞癌基因存在于正常細(xì)胞中，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)，增殖，10（一）病毒癌基因與細(xì)胞癌基因的比較

病毒癌基因在兩端通常有序列的丟失；病毒癌基因無(wú)內(nèi)含子，細(xì)胞癌基因通常有內(nèi)含子或插入序列;病毒癌基因常會(huì)出現(xiàn)堿基取代或堿基缺失；病毒癌基因與同源的細(xì)胞癌基因在外顯子序列有一定程度的差異；病毒癌基因表達(dá)的蛋白質(zhì)往往有較強(qiáng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化活性。（一）病毒癌基因與細(xì)胞癌基因的比較

病毒癌基因在兩端通常有序11細(xì)胞癌基因的特點(diǎn)

普遍性：廣泛存在于生物界中；保守性：在進(jìn)化過(guò)程中，基因序列呈高度同源性；重要性：表達(dá)產(chǎn)物精密調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡；危害性：表達(dá)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)和數(shù)量上的變化，可致細(xì)胞癌變或腫瘤生成。

c-onc在正常細(xì)胞中表達(dá)水平很低，也不具有使靶細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的功能，當(dāng)其受到某些因素的作用而“活化”或過(guò)度表達(dá)時(shí)，才會(huì)引起細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。細(xì)胞癌基因的特點(diǎn)

c-onc在正常細(xì)胞中表達(dá)水平很低12（二）細(xì)胞癌基因的功能1.參與細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)：如AP-1（Jun/Fos二聚體），受到生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號(hào)而活化，小G蛋白（ras表達(dá)產(chǎn)物，轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖）、酪氨酸蛋白激酶（src家族的基因產(chǎn)物，生長(zhǎng)因子受體）。2.與某些細(xì)胞分化有關(guān)：如c-src是在神經(jīng)元分化過(guò)程中起作用，與增殖無(wú)關(guān)。

（二）細(xì)胞癌基因的功能1.參與細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)：如AP-1（J13癌基因分類(lèi)按癌基因家族分類(lèi)按功能分類(lèi)癌基因分類(lèi)14

家族成員產(chǎn)物作用產(chǎn)物定位src家族：src、abl、fgr、fes、TPK活性膜內(nèi)側(cè)或跨膜

yes、fps、lck、kek、

fym、lyn、tklras家族：H-ras、K-ras、N-ras

小G蛋白，膜內(nèi)側(cè)

myc家族：c-myc、N-myc、L-myc核內(nèi)DNA核內(nèi)結(jié)合蛋白jun、fos轉(zhuǎn)錄因子（AP-1）核內(nèi)

sis家族：僅sis類(lèi)似PDGF，能刺激胞外間葉組織的細(xì)胞分裂繁殖。

myb家族：myb、myb-ets轉(zhuǎn)錄因子核內(nèi)

按家族體系分類(lèi)家族成員產(chǎn)物作15按功能的分類(lèi)

類(lèi)別名稱(chēng)定位生物學(xué)功能生長(zhǎng)因子

c-sis

分泌到胞外血小板源生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子受體

c-erbB細(xì)胞膜表皮生長(zhǎng)因子受體

c-fms

細(xì)胞膜集落刺激因子-1受體

c-trk

細(xì)胞膜神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體胞內(nèi)傳遞蛋白

c-src、c-abl

細(xì)胞質(zhì)酪氨酸蛋白激酶

c-raf、c-mos

細(xì)胞質(zhì)Ser/Thr蛋白激酶

c-ras

細(xì)胞膜GTP/GDP結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

c-myc

細(xì)胞核內(nèi)DNA結(jié)合蛋白

c-jun、c-fos

細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子（AP-1）

c-erbA細(xì)胞核內(nèi)甾體激素受體類(lèi)蛋白按功能的分類(lèi)類(lèi)別名稱(chēng)16（三）細(xì)胞癌基因活化原癌基因的活化：從正常的原癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂惺辜?xì)胞轉(zhuǎn)化功能的癌基因的過(guò)程。激活因素：在某些條件下，如病毒感染、化學(xué)致癌物或電離輻射等，癌基因可被相繼激活而異常表達(dá)，致細(xì)胞惡變以及腫瘤生成。不同的原癌基因在不同情況下，可通過(guò)不同的途徑被激活，成為“活化癌基因”。癌基因活化后的結(jié)果：1.表達(dá)時(shí)機(jī)改變2.過(guò)量表達(dá)3.產(chǎn)物異常（三）細(xì)胞癌基因活化原癌基因的活化：從正常的原癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榫?7原癌基因惡性激活的機(jī)制（一）獲得啟動(dòng)子與增強(qiáng)子（二）基因易位(genetranslocation)或重排（三）細(xì)胞癌基因擴(kuò)增(amplication)（四）點(diǎn)突變(pointmutation)（五）原癌基因甲基化程度降低而激活(六)癌基因的協(xié)同作用原癌基因惡性激活的機(jī)制（一）獲得啟動(dòng)子與增強(qiáng)子18（一）獲得啟動(dòng)子與增強(qiáng)子雞（禽）白細(xì)胞增生病毒（avianleucosisvirus，ALV）逆轉(zhuǎn)錄病毒正常宿主細(xì)胞病毒DNA的LTR被整合到宿主細(xì)胞c-myc癌基因附近成為其啟動(dòng)子和增強(qiáng)子c-myc癌基因表達(dá)為正常的30-100倍

細(xì)胞癌基因不但由于逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的啟動(dòng)子插入原癌基因的附近而被激活，甚至還會(huì)因獲得正常細(xì)胞的強(qiáng)啟動(dòng)子而活化。如ALV引起的淋巴瘤細(xì)胞中，c-myc的表達(dá)增加上百倍，導(dǎo)致雞B細(xì)胞淋巴瘤。（一）獲得啟動(dòng)子與增強(qiáng)子雞（禽）白細(xì)胞增生病毒正常宿主細(xì)胞病19（二）基因重排或染色體易位

染色體基因的易位和重排，可使原癌基因移至某些強(qiáng)啟動(dòng)子或增強(qiáng)子附近而被活化，表達(dá)增強(qiáng)，致使腫瘤生成。

（二）基因重排或染色體易位染色體基因的易位和重排20慢性粒細(xì)胞白血病的Philadelphia染色體為t（9：22），使c-abl從9號(hào)染色體易位到22號(hào)染色體上的bcr基因旁，組成融合基因，表達(dá)bcr-abl融合蛋白，該產(chǎn)物有較高的蛋白酪氨酸激酶活性。q3495’3’5’3’22q11.2ablder9Ph’abl9q3422q11.222q11.29q34Der(22)DNARNAProtein慢性粒細(xì)胞白血病的Philadelphia染色體為t（9：21

人Burkitt淋巴瘤中，位于8號(hào)染色體上的c-myc移到14染色體免疫球蛋白重鏈（IgH）基因的調(diào)節(jié)區(qū)附近，與此區(qū)活性很強(qiáng)的增強(qiáng)子連接而受到活化c-myc被免疫球蛋白增強(qiáng)子所激活免疫球蛋白基因染色體14染色體8c-myc不表達(dá)c-myc基因Ec-myc高表達(dá)易位E人Burkitt淋巴瘤中，位于8號(hào)染色體上的c-my22伯基特淋巴瘤細(xì)胞的染色體易位t（8：14），致使c-myc激活

伯基特淋巴瘤細(xì)胞的染色體易位t（8：14），23（三）原癌基因的拷貝數(shù)增加

即細(xì)胞癌基因擴(kuò)增。染色體的一部分過(guò)度復(fù)制，成為多拷貝基因。如：乳腺癌——erbB-2基因神經(jīng)母細(xì)胞瘤——N-myc基因，擴(kuò)增與疾病進(jìn)展或臨床階段相關(guān)。小細(xì)胞肺癌——myc家族基因（三）原癌基因的拷貝數(shù)增加即細(xì)胞癌基因擴(kuò)增。染色24（四）點(diǎn)突變

在輻射和（或）致癌物作用下，細(xì)胞原癌基因發(fā)生點(diǎn)突變，可能造成其表達(dá)產(chǎn)物中氨基酸組成或結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致活化，至使腫瘤生成。如：1982年，美國(guó)3家研究機(jī)構(gòu)（麻省理工大學(xué)、國(guó)立癌癥研究所和哥倫比亞大學(xué)）幾乎同時(shí)發(fā)表實(shí)驗(yàn)結(jié)果：人膀胱癌細(xì)胞株EJ的惡性轉(zhuǎn)化是由于其原癌基因c-H-ras

發(fā)生點(diǎn)突變，導(dǎo)致Ras與GTP的結(jié)合不易分解而持續(xù)激活。H-ras

正常細(xì)胞GGC(12Gly)

腫瘤細(xì)胞GTC(12Val)（四）點(diǎn)突變?cè)谳椛浜停ɑ颍┲掳┪镒饔孟拢?xì)胞原癌25（五）原癌基因甲基化程度降低

（基因抑制消除）

DNA分子甲基化有穩(wěn)定雙螺旋結(jié)構(gòu)，阻抑轉(zhuǎn)錄的作用。如結(jié)腸腺癌和小細(xì)胞肺癌中，c-ras基因比鄰近正常組織中的甲基化程度明顯降低，導(dǎo)致原癌基因激活。（五）原癌基因甲基化程度降低

26(六)癌基因的協(xié)同作用

實(shí)驗(yàn)證明，用ras或myc同時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞，可使細(xì)胞長(zhǎng)期增殖，但不能轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞，在裸鼠體內(nèi)也不能形成腫瘤。但用ras+myc同時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞，則使細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞。

說(shuō)明：致癌至少需要2種或以上的onc協(xié)同作用，2種onc在2條通路上發(fā)揮作用，由于細(xì)胞增殖調(diào)控是多因子，多階段影響的結(jié)果。而影響增殖分化的onc達(dá)幾十種之多，所以大多數(shù)人認(rèn)為：癌發(fā)生是多階段多步驟的。(六)癌基因的協(xié)同作用

實(shí)驗(yàn)證明，用ras或myc同27第二節(jié)抑癌基因

（anti-oncogenes，tumorsuppressorgenes）抑癌基因的基本概念抑癌基因作用機(jī)制Rb基因—“控制細(xì)胞周期的重要基因”p53基因—“基因組的衛(wèi)士”第二節(jié)抑癌基因

（anti-oncogenes，tum28一、抑癌基因的基本概念概念：是指存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一類(lèi)可抑制細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)、增殖的基因，具有潛在抑癌作用，當(dāng)一對(duì)等位基因都明確失去功能時(shí)可導(dǎo)致腫瘤的形成。抑癌基因表達(dá)產(chǎn)物：主要包括跨膜受體，胞質(zhì)調(diào)節(jié)因子，結(jié)構(gòu)蛋白，轉(zhuǎn)錄因子，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，細(xì)胞周期因子，DNA損傷修復(fù)因子等發(fā)現(xiàn)：1986年，美國(guó)加州大學(xué)的Geiser等用正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)并提出抑癌基因。一、抑癌基因的基本概念概念：是指存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一類(lèi)可抑制29第十一章癌基因與抑癌基因ppt課件30細(xì)胞雜交試驗(yàn)正常細(xì)胞腫瘤細(xì)胞非腫瘤型雜交細(xì)胞雜交融合腫瘤細(xì)胞1腫瘤細(xì)胞2雜交融合非腫瘤型雜交細(xì)胞正常細(xì)胞失去某些基因腫瘤細(xì)胞細(xì)胞雜交試驗(yàn)正常細(xì)胞腫瘤細(xì)胞非腫瘤型雜交細(xì)胞雜交融合腫瘤細(xì)胞31確定抑癌基因的條件在某些特定惡性腫瘤的相應(yīng)正常組織中有正常表達(dá)；在惡性腫瘤細(xì)胞中發(fā)生變異或缺失，如點(diǎn)突變、DNA片段或全基因的缺失等；將此基因?qū)霅盒阅[瘤細(xì)胞中能部分或完全抑制其惡性表型。確定抑癌基因的條件在某些特定惡性腫瘤的相應(yīng)正常組織中有正常表32抑癌基因的功能1.

編碼轉(zhuǎn)錄因子，參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)。如Rb、P53、WT1（Wilms’瘤）。2.參與DNA損傷修復(fù)后的復(fù)制，保證DNA遺傳的穩(wěn)定性。當(dāng)損傷嚴(yán)重時(shí)誘發(fā)細(xì)胞調(diào)亡。如P53。3.與細(xì)胞間的黏連有關(guān)。如直腸癌缺失(DCC)基因

。4.連接細(xì)胞與細(xì)胞骨架，維持細(xì)胞的形態(tài)，防止細(xì)胞的異常生長(zhǎng)。如神經(jīng)纖維瘤（neurofibromatosisⅡ，NF2）基因

。5.GTP酶的活化因子，通過(guò)失活癌基因蛋白（Ras）而發(fā)揮抑癌效應(yīng)。如NF-1。抑癌基因的功能1.編碼轉(zhuǎn)錄因子，參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)。33常見(jiàn)的抑癌基因有Rb基因，p53基因，p16基因等。其中，Rb基因編碼P105Rb轉(zhuǎn)錄因子，p53基因編碼P53轉(zhuǎn)錄因子，p16基因編碼一種P16蛋白。常見(jiàn)的抑癌基因常見(jiàn)的抑癌基因有Rb基因，p53基因，p16基因等。常見(jiàn)的抑34常見(jiàn)的抑癌基因

基因定位相關(guān)腫瘤作用跨膜受體類(lèi)：

DCC18q21結(jié)直腸癌編碼表面糖蛋白（細(xì)胞粘附分子）

PTCH9q22.3HEDGEHOG受體胞質(zhì)調(diào)節(jié)因子或結(jié)構(gòu)蛋白：

APC5p21結(jié)直腸癌可能編碼G蛋白

NF17q12.2神經(jīng)纖維瘤GTP酶激活劑

NF222q神經(jīng)鞘膜瘤、腦膜瘤連接膜與細(xì)胞骨架轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子：

P5317P多種腫瘤編碼P53蛋白（轉(zhuǎn)錄因子）

Rb13q14視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、骨編碼P105Rb1蛋白（轉(zhuǎn)錄因子）肉瘤、肺癌、乳癌

DPC418q21.1胰腺癌TGF-調(diào)節(jié)的MAD相關(guān)蛋白

MADR218q21結(jié)直腸癌TGF-調(diào)節(jié)的MAD相關(guān)蛋白

VHL3P小細(xì)胞肺癌、宮頸瘤轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白

WT111P13腎母細(xì)胞瘤編碼鋅指蛋白（轉(zhuǎn)錄因子）細(xì)胞周期因子：

P169p21黑色素瘤編碼P16蛋白，CDK4,6抑制劑

P159p21交質(zhì)母細(xì)胞瘤編碼P15蛋白，CDK4,6抑制劑

P216q21前列腺癌編碼P21蛋白，CDK2,3,4,6抑制劑

常見(jiàn)的抑癌基因基因定位35（一）Rb基因(Retinoblastomagene)

——“控制細(xì)胞周期的重要基因”Rb是成視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因，為一種腫瘤抑制基因。在許多不同的腫瘤中處于突變狀態(tài)，首次報(bào)導(dǎo)是它在眼部惡性腫瘤發(fā)生。這種病通常發(fā)生在幼兒中。Rb基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物是一種轉(zhuǎn)錄因子，可控制驅(qū)使細(xì)胞進(jìn)入分裂過(guò)程的重要基因表達(dá)。Rb基因即是世界上第一個(gè)被克隆和完成全序列測(cè)定的抑癌基因。retinoblastoma（一）Rb基因(Retinoblastomagene)36基因結(jié)構(gòu)：

Rb基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物約4.7kb，表達(dá)產(chǎn)物為928個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，分子量約105kDa，稱(chēng)為P105-Rb。Rb蛋白分布于核內(nèi)，是一類(lèi)DNA結(jié)合蛋白。Rb基因的表達(dá)產(chǎn)物為P105Rb，在細(xì)胞內(nèi)存在低磷酸化型（活性型）和高磷酸化型（非活性型）兩種類(lèi)型。不同類(lèi)型的P105Rb對(duì)轉(zhuǎn)錄因子E2F有不同的親和力。基因結(jié)構(gòu)：Rb基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物約4.7kb，表達(dá)產(chǎn)物為928個(gè)37

Rb蛋白的磷酸化/去磷酸化是其調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的主要形式。非/低磷酸化的Rb具有抑制細(xì)胞增殖的活性，是Rb的活性形式。在細(xì)胞周期的G。,G1期，它表現(xiàn)為低磷酸化，在S、M期則處于磷酸化狀態(tài)。

pRb105活性調(diào)節(jié)：高磷酸化無(wú)活性型和非/低磷酸化活性型，由Cyclin-CDK來(lái)調(diào)節(jié)。pRb105功能：參與調(diào)節(jié)E2F等多種轉(zhuǎn)錄因子來(lái)控制細(xì)胞周期，影響細(xì)胞增殖和分化。Rb蛋白的磷酸化/去磷酸化是其調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的主要形38（一）視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因（Rb基因）作用機(jī)制G0G1期Rb蛋白E-2FS期E-2FDNAmRNADNAPRb蛋白c-myc×Rb基因失活后，其表達(dá)產(chǎn)物不能與E2F形成復(fù)合物，E2F處于持續(xù)激活狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞增殖。（一）視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因（Rb基因）作用機(jī)制G0G1期Rb39（二）p53基因—

“基因組的衛(wèi)士”1.p53基因的發(fā)現(xiàn)曾錯(cuò)誤把P53基因定為癌基因---因當(dāng)初從腫瘤細(xì)胞分離得到的P53基因如同myc基因一樣，能和ras基因協(xié)同轉(zhuǎn)化胚胎成纖維細(xì)胞，又依據(jù)癌基因?yàn)榧?xì)胞顯性表型的原則而被定為癌基因，后發(fā)現(xiàn)實(shí)為其突變型。1989年，才確認(rèn)為“抑癌基因”。p53基因與人類(lèi)50%的腫瘤有關(guān)。P53基因突變型在血液系統(tǒng)腫瘤、膀胱癌、肝癌、肺癌、結(jié)腸癌以及口腔癌等的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)。（二）p53基因—

“基因組的40基因：位于17p13.1，20kb，11外顯子，mRNA：2.5kb，編碼393氨基酸殘基，分子量為53kDa的多肽鏈。2.p53的結(jié)構(gòu)

基因：位于17p13.1，20kb，11外顯子，mRNA：241P53蛋白可分為三個(gè)結(jié)構(gòu)域：N端的酸性區(qū)、中段疏水核心區(qū)與C端的堿性區(qū)，分子中有一核定位信號(hào)，所以它一般都位于核內(nèi)。酸性區(qū)核心區(qū)堿性區(qū)P53蛋白酸性區(qū)核心區(qū)堿性區(qū)P53蛋白42P53蛋白可與特異的DNA片段結(jié)合，其酸性區(qū)域具有許多轉(zhuǎn)錄因子的共同特征，并與寡聚體的形成有關(guān)。P53蛋白能以四聚體的形式與DNA結(jié)合，調(diào)節(jié)其它基因的表達(dá)。

P53蛋白可與特異的DNA片段結(jié)合，其酸性區(qū)域具有許多轉(zhuǎn)錄因43P53蛋白的生物學(xué)功能較為復(fù)雜，目前已知的功能有：①轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)及抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用：P53蛋白促進(jìn)WAF1/CIP1基因表達(dá)產(chǎn)生一種分子量為21kD的蛋白質(zhì)（p21WAF1/CIP1），誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯于G1期。P53蛋白的生物學(xué)功能較為復(fù)雜，目前已知的功能有：44②抑制DNA復(fù)制：P53蛋白可與復(fù)制蛋白A(RPA)結(jié)合，而RPA與解鏈狀態(tài)的DNA單鏈的結(jié)合可能是DNA復(fù)制的起始步驟。P53蛋白與RPA結(jié)合后可抑制RPA與單鏈DNA的結(jié)合，從而抑制了RPA與DNA復(fù)制起始點(diǎn)的結(jié)合，阻止細(xì)胞進(jìn)入S期。P53蛋白還可通過(guò)抑制解鏈酶的活性，以抑制DNA復(fù)制。

②抑制DNA復(fù)制：45③參與程序性細(xì)胞凋亡：P53蛋白使損傷細(xì)胞停留在G1期，以便使DNA損傷修復(fù)后再進(jìn)入細(xì)胞周期。若損傷不能修復(fù)，則啟動(dòng)細(xì)胞進(jìn)入程序性凋亡（細(xì)胞自殺）。

③參與程序性細(xì)胞凋亡：46P53蛋白的作用機(jī)制（演示）P53蛋白解鏈酶復(fù)制因子AP21蛋白細(xì)胞停滯于G1期細(xì)胞自殺DNA損傷P21基因P53蛋白抑制P53蛋白成功修復(fù)修復(fù)失敗P53蛋白的作用機(jī)制（演示）P53蛋白解鏈酶復(fù)制因子AP2147二、癌基因激活與腫瘤的發(fā)生腫瘤發(fā)生學(xué)說(shuō)：多階段假說(shuō)

正常細(xì)胞中含有多種原癌基因，當(dāng)受到某些理化因素，生物因素等致癌因子作用后，經(jīng)過(guò)啟動(dòng)階段（initiatingstage）、促癌階段（promotingstage）、演進(jìn)階段（progressingstage）最終轉(zhuǎn)變成癌細(xì)胞。二、癌基因激活與腫瘤的發(fā)生腫瘤發(fā)生學(xué)說(shuō)：多階段假說(shuō)48多階段假說(shuō)1.啟動(dòng)階段(InitiatingStage)：細(xì)胞受癌性啟動(dòng)因子作用，DNA發(fā)生改變，成為癌前