醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件

分子生物學(xué)研究法DNA、RNA及蛋白質(zhì)操作技術(shù)分子生物學(xué)研究法1LENAEEDRecombinantLENAEE2ForeignDNAECORIEcoRIpLaTedcn.medum的感⑨→DNACloningintoaplasmidForeignDNA3DNA基本操作技術(shù)DNA基本操作技術(shù)41.核酸的凝膠電泳(Agarose&Polyacrylan將某種分子放到特定的電場中,它就會(huì)以一定的速度向適當(dāng)?shù)碾姌O移動(dòng)。某物質(zhì)在電場作用下的遷移速度叫作電泳的速率,它與電場強(qiáng)度成正比,與該分子所攜帶的凈電荷數(shù)成正比,而與分子的磨擦系數(shù)成反比(分子大小、極性、介質(zhì)的粘度系數(shù)等)。在生理?xiàng)l件下,核酸分子中的磷酸基團(tuán)是離子化的,所以,DNA和RNA實(shí)際上呈多聚陰離子狀態(tài)(Polyanions)。將DNA、RNA放到電場中,它就會(huì)由負(fù)極→正極移動(dòng)。1.核酸的凝膠電泳(Agarose&Polyacryla5Agarose的分離范圍在50bp數(shù)十kb(4.0%)(0.3%)Polyacrylamide(page),11000bp(20%(4‰)表21瓊脂糖及聚丙烯酰胺凝膠分辨DNA片段的能力凝膠類型及濃度分離DNA片段的大小范圍(bp)0.3%瓊閨糖50000~10.7%瓊脂糖20000~10001.4%琮脂糖6000~3004.0%聚丙烯酰胺1000~10010.0%聚丙烯酰肢500~2520,0%聚丙烯酰胺50~1Agarose的分離范圍在50bp數(shù)十kb6在凝膠電泳中,一般加入溴化乙錠(EB)ethidiumbromide染色,此時(shí),核酸分子在紫外光下發(fā)出熒光,肉眼能看到約50ngDNA所形成的條帶。在凝膠電泳中,一般加入溴化乙錠(EB)7GenomeDNATotalRNAGenomeDNA82.聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)在引物指導(dǎo)下由酶催化的對(duì)特定克隆或基因組DNA序列進(jìn)行的體外擴(kuò)增反應(yīng)2.聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)9號(hào)母母號(hào)號(hào)tiitiiittiiiPCR儀號(hào)母母號(hào)號(hào)10醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件11醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件12醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件13醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件14醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件15醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件16醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件17醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件18醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件19醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件20醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件21醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件22醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件23醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件24醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件25醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件26醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件27醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件28醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件29醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件30醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件31醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件32醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件33醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件34醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件35醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件36醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件37醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件38醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件39醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件40醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件41醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件42醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件43醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件44醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件45醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件46醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件47醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件48醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件49醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件50醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件51醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件52醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件53醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件54醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件55醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件56醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件57醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件58醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件59醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件60醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件61醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件62醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件63醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件64醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件65醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件66醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件67醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件68醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件69醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件70醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件71醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件72醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件73醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件74醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件75醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件76醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件77醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件78醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件79醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件80醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件81醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件82醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件83醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件84醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件85醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件86醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件87醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件88醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件89醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件90醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件91醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件92醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件93醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件94醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件95醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件96醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件97醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件98醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件99醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件100醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件101醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件102醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件103醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件104醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件105醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件106醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件107醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件108醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件109醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件110醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件111醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件112醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)研究法課件113