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微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室沙雷菌屬標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.概述沙雷菌屬包括粘質(zhì)沙雷菌、液化沙雷菌、氣味沙雷菌、普城沙雷菌、深紅沙雷菌、無(wú)花果沙雷菌、嗜蟲沙雷菌、居泉沙雷菌、格里蒙沙雷菌和變形沙雷菌等10種。在臨床標(biāo)本中以粘質(zhì)沙雷菌最為常見。2.標(biāo)本類型痰液、腦脊液、穿刺液、膿液、血液等標(biāo)本。3.鑒定3.1形態(tài)與染色:革蘭陰性桿菌。3.2培養(yǎng)特性經(jīng)35℃培養(yǎng)18-24小時(shí),在血瓊脂平板上菌落較大,呈紅色;在麥康凱瓊脂平板上菌落呈紅色,部分菌株呈無(wú)色菌落。3.3生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)陰性,TSI為K/A;發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇水楊苷和肌醇,不發(fā)醇乳糖、衛(wèi)矛醇和鼠李糖;IMViC--++,DNA酶、脂酶、明膠酶、賴氨酸脫羧酶和鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)均為陽(yáng)性。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.1本菌特征:大部分菌株產(chǎn)生紅色色素,發(fā)酵葡萄糖,不發(fā)酵乳糖,DNA酶、脂酶、明膠酶、賴氨酸脫羧酶和鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)均為陽(yáng)性。3.4.2粘質(zhì)沙雷菌與深紅沙雷菌和普城沙雷菌的鑒別:三者均能產(chǎn)生兩種不同的紅色色素(靈菌紅素和吡羧酸),但粘質(zhì)沙雷菌發(fā)酵山梨醇,不發(fā)酵阿拉伯糖和棉子糖,鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性;深紅沙雷菌則相反。普城沙雷菌發(fā)酵阿拉伯糖,賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性,可與粘質(zhì)沙雷菌相鑒別。3.5操作步驟3.5.1氧化酶試驗(yàn)參見氧化酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。3.5.2從麥康凱瓊脂平板上挑取可疑菌落,用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化法進(jìn)行菌鑒定。4.藥敏參見藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及CLSIM100-S20最新版本文件。5.質(zhì)量控制參見質(zhì)量管理程序。檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析粘質(zhì)沙雷菌易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶,臨床上使用三代頭孢菌素治療的過(guò)程易產(chǎn)生耐藥性,通常在治療3-4日左右即轉(zhuǎn)化為耐藥菌株,因此應(yīng)定期復(fù)查菌株的敏感性。臨床意義粘質(zhì)沙雷菌長(zhǎng)期以來(lái)認(rèn)為對(duì)人體無(wú)害,但由于該菌具有侵襲性并對(duì)許多常見抗生素有耐藥性,已成為臨床感染的標(biāo)本中一種重要的病原菌??蓪?dǎo)致肺炎、泌尿道感染、敗血癥和外科手術(shù)感染等。此菌可導(dǎo)致醫(yī)院感染爆發(fā)流行。鑒定流程尿、痰、血液等尿、痰、血液等麥康凱瓊脂平板呈紅色或無(wú)色菌落儀器或手工鑒定并做藥敏試驗(yàn)沙雷菌屬氧化酶-參考文獻(xiàn)[1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).CNAS-CL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明.2008編寫人:
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