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文檔簡介
實驗四硅膠薄層層析
實驗四---硅膠薄層層析ppt課件1掌握薄層硬板的制備方法。掌握薄層色譜的一般操作方法。了解薄層色譜在中藥分析中的應用。目的掌握薄層硬板的制備方法。目的2儀器與試劑雙槽層析缸玻璃板10*20cm(厚3mm)毛細管0.5mm研缽電吹風天平(0.1mg)硅膠G(薄層層析用)生藥當歸、丹參層開劑:正已烷:乙酸乙酯(9:1)20ml儀器與試劑雙槽層析缸3硅膠G薄層板的制備:
稱取硅膠G10g和0.5%的羧甲基纖維素鈉溶液30ml在研缽中向一方向研磨混勻,去除表面的氣泡后,在玻璃板上平穩(wěn)移動進行涂布鋪好后于室溫下,置水平臺上晾干,在反射光和透射光下檢視,表面應均勻,平整,無麻點,無氣泡,無損壞及污染,于110℃烘30min,冷卻后立即使用或置于干燥箱中備用。注意:兩人做三塊薄層板??!硅膠G薄層板的制備:4
硅膠G薄層板的制備(已完成)樣品的制備當歸、丹參各2g,分別加10ml乙醇,置于50ml錐形瓶中.超聲振蕩10分鐘,取上清液.點樣用毛細管吸取上述二種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上。1.點樣一般為圓點,點樣基線距底邊2cm2.點樣直徑一般不大于2mm3.點間距離大于0.8cm4.點樣時必須注意勿損傷薄層表面。硅膠G薄層板的制備(已完成)樣品的制備當歸、丹參各2g,分5展開點好樣的薄層板放入展開缸的展開劑中,以正已烷:乙酸乙酯(9:1)20ml為展開劑,浸入展開劑的深度為距原點5mm為宜,密封,待展開至6-8cm,取出薄層板,晾干,用電吹風熱風吹薄層板,至有斑點出現(xiàn)觀察記錄日光下紫外分析儀展開點好樣的薄層板放入展開缸的展開劑中,以正已烷:乙酸乙酯(6點樣層析7cm2cm點樣層析7cm2cm7畫展開后的層析圖.并記算各斑點的Rf值.Rf值=斑點到原點的距離原點到溶劑前沿的距離畫展開后的層析圖.并記算各斑點的Rf值.Rf值=斑點到原點的8思考題
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