章抗原抗體反應(yīng)

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)

（ClinicalImmunoassay）昆明醫(yī)科大學(xué)附屬甘美醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)教研室田敏

(MinTian)

學(xué)好臨床免疫檢驗(yàn)，必須掌握“一個(gè)核心，三個(gè)要素與四個(gè)標(biāo)記”。一個(gè)核心：抗原抗體反應(yīng)(Antigen-antibodyinteraction)三個(gè)要素：抗原、抗體和免疫細(xì)胞四個(gè)標(biāo)記：酶標(biāo)記技術(shù)、放射免疫標(biāo)記技術(shù)、熒光素標(biāo)記技術(shù)與化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)。第二章抗原抗體反應(yīng)

目的掌握:

1.抗原抗體反應(yīng)原理及特點(diǎn)。

2.帶現(xiàn)象、前帶、后帶、親合力、親和力概念。熟悉:

影響抗原抗體反應(yīng)的因素。了解:

免疫學(xué)檢測(cè)的類(lèi)型。

（antigen-antibodyreaction）

概念：抗原抗體反應(yīng)是指抗原抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)體內(nèi)殺菌、溶菌、調(diào)理、中和毒素免疫病理?yè)p傷—超敏反應(yīng)、免疫性疾病等體外：凝集、沉淀、溶細(xì)胞、中和毒素、補(bǔ)體結(jié)合等曾稱(chēng)：serologicalreaction本章內(nèi)容：§1抗原抗體反應(yīng)的原理§2抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)§3影響抗原抗體反應(yīng)的因素§4免疫學(xué)檢測(cè)的類(lèi)型第一節(jié)

抗原抗體反應(yīng)的原理基本原理：特異性（AD----HVR）可見(jiàn)性（凝集、沉淀、溶血等）結(jié)合力(4種)高度互補(bǔ)（AD-HVR）緊密接觸產(chǎn)生結(jié)合力抗原

抗體帶電離子異性相吸靜電引力分子極化范德華引力形成氫鍵氫鍵引力形成疏水基團(tuán)

疏水作用力作用最小最具特異性作用最大抗原抗體結(jié)合可見(jiàn)反應(yīng)比例合適抗原抗體結(jié)合力1.靜電引力（electrostaticforces）或庫(kù)侖引力（Cou-lombicforces）指帶電離子基團(tuán)（如：—NH3+和—COO-）之間的引力，距離越近引力越大。2.范德華引力（VanderWaalsforces）

分子間（或原子間)相互接近，分子極化產(chǎn)生引力，其作用取決于分子空間構(gòu)型，如：凹槽與凸起互補(bǔ)，抗原與抗體，酶與底物。能量小于靜電引力。（3）氫鍵結(jié)合力（hydrogenboundingforce）

指供氫體氫原子與受氫體原子之間的引力—“氫鍵橋梁”，能量大于范德華引力。4.疏水作用力（hydrophobicforce）

指疏水基團(tuán)間排斥水分子，相互聚集的力。作用力最強(qiáng)，占總結(jié)合力的50％。

抗原抗體結(jié)合力大小都與兩分子間的距離密切相關(guān)只有兩分子表面密切接觸時(shí)，才能產(chǎn)生足夠的力使其結(jié)合抗原與抗體之間高度的空間互補(bǔ)結(jié)構(gòu)恰好為這些結(jié)合力的發(fā)揮提供了條件

結(jié)合力的大小

親和力（affinity）表示

親合力（avidity）一個(gè)抗體結(jié)合點(diǎn)與一個(gè)抗原表位間的結(jié)合強(qiáng)度?！埃╯inglepoint－－－singlepoint）”親和力用平衡常數(shù)表示：K=K1/K2親和力（affinity）：即：結(jié)合常數(shù)/解離常數(shù)

K值越大，親和力越高，與抗原的結(jié)合越牢固親合力（avidity）指整個(gè)抗體分子與抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度

“allpoints-------allpoints”與抗體的結(jié)合價(jià)直接相關(guān)。親合力高，與抗原結(jié)合牢固不易解離。第二節(jié)

抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)一、特異性（specificity）概念：一種抗原只能與其相應(yīng)的抗體結(jié)合起反應(yīng)（eg.）分子基礎(chǔ)：Ag-ADHVR-Ab空間結(jié)構(gòu)高度互補(bǔ)VH和VL各具三個(gè)HVR與AD互補(bǔ)意義免檢中常用已知Ag未知Ab，反之亦然。查相對(duì)性：當(dāng)抗原之間有相同或相似結(jié)構(gòu)的AD時(shí)（共同抗原）交叉反應(yīng)（crossreaction）干擾結(jié)果實(shí)驗(yàn)診斷如何解決？如何利用？?jī)煞N不同的抗原分子具有相同或類(lèi)似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖交叉反應(yīng)（crossreactions）二、比例性

(proportionality)指抗原抗體的量比關(guān)系，即只有當(dāng)抗原抗體的濃度比例適當(dāng)時(shí)，才出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。以沉淀反應(yīng)為例（Ab量固定,Ag量遞增）

圖Question：等價(jià)帶前帶后帶

抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖Why?抗原多價(jià)，抗體雙價(jià)二者比例合適Ag/Ab過(guò)剩網(wǎng)格學(xué)說(shuō)網(wǎng)格學(xué)說(shuō)（圖）抗體的兩個(gè)Fab段分別結(jié)合兩個(gè)Ag分子，相互交叉結(jié)合連接成巨大的網(wǎng)格狀立體聚合物，（可見(jiàn)）。二者比例合適：Ab/Ag過(guò)剩過(guò)剩方的結(jié)合價(jià)得不到飽和，大多數(shù)游離存在，只形成小分子復(fù)合物（不可見(jiàn)）。網(wǎng)格學(xué)說(shuō)（圖）切記！?。?！確定

的濃度非常重要，即在實(shí)驗(yàn)中需對(duì)Ag/Ab進(jìn)行適當(dāng)?shù)?/p>

，調(diào)整二者的比例，產(chǎn)生可見(jiàn)反應(yīng)。一般原則：固定

含量（Ag/Ab）的濃度，稀釋

含量的(Ab/Ag)。一般可溶性Ag稀釋

，顆粒性Ag，稀釋

。Ag/Ab稀釋低高AgAb三、可逆性（reversibility）或表面性解離1.Ag+AbAg—A