膠體金免疫層析技術課件

膠體金免疫層析技術莊捷膠體金免疫層析技術1什么叫膠體金免疫層析技術膠體金免疫層析技術就是以膠體金為顯色媒介，利用免疫學中抗原抗體能夠特異性結合原理，在層析過程中完成這一反應，從而達到檢測的目的。什么叫膠體金免疫層析技術膠體金免疫層析技術就是以膠體金為顯色2膠體金免疫層析中的三大技術膠體金技術：為診斷提供肉眼可見的顯色媒介膜技術

原料的固化載體，層析的動力來源免疫學技術

特異性的檢測樣本中需要檢測物質(zhì)膠體金免疫層析中的三大技術膠體金技術：3膠體金技術什么叫膠體金：

膠體金是一群以膠體狀態(tài)，粒徑在微米級以下的懸浮于水溶液中的金的顆粒。膠體金技術什么叫膠體金：4膠體金發(fā)展歷史古代：用于提煉長生不老藥物；

玻璃染色。近現(xiàn)代：19世紀50年代由MichaelFaraday第一次人工合成純膠體金1971年膠體金被第一次用于電鏡免疫膠體金染色法(IGS)觀察沙門氏菌1974年Romano將膠體金標記在第二抗體（馬抗人IgG）上，建立了間接免疫膠體金染色法

1978年geoghega發(fā)現(xiàn)了膠體金標記物在光鏡水平的應用膠體金發(fā)展歷史古代：5膠體金的結構：膠體金結構：

膠體金顆粒由一個基礎金核（原子金Au）及包圍在外的雙離子層構成，緊連在金核表面的是內(nèi)層負離子（AuC12－），外層離子層H+則分散在膠體間溶液中，以維持膠體金游離于溶膠間的懸液狀態(tài)。膠體金的結構：膠體金結構：6膠體金的性質(zhì)?染色—不同粒徑，不同顏色?膠體的特性—充分的溶解性，良好的流動性?吸附能力—在不改變蛋白性質(zhì)的情況下，穩(wěn)

定迅速的吸附蛋白粒徑顏色2～5nm橙色的10～20nm酒紅色30～80nm紫紅色膠體金的性質(zhì)?染色—不同粒徑，不同顏色粒徑顏色2～5nm橙色7膠體金的應用膠體金在電鏡水平的應用膠體金在光鏡水平的應用膠體金在流式細胞儀中的應用免疫印跡技術膠體金的應用膠體金在電鏡水平的應用8膜技術什么叫硝酸纖維素膜？

以硝酸纖維素為基質(zhì)，經(jīng)過勻漿，滾筒鋪膜，烘制成型從而制的一定孔徑的硝酸纖維素膜。勻漿配方?jīng)Q定硝酸纖維素膜的性質(zhì)。烘制速度決定硝酸纖維素膜的孔徑。

膜技術什么叫硝酸纖維素膜？9硝酸纖維素膜的結構和性質(zhì)硝酸纖維素膜的性質(zhì)：?微孔性：層析動力的來源?多孔性：樣本流動性?蛋白吸附能力：?樣本過濾：孔徑（μM）流速(S/4cm)0.21800.451350.875硝酸纖維素膜的結構和性質(zhì)硝酸纖維素膜的性質(zhì)：孔徑（μM）流速10硝酸纖維素膜的應用?濾膜?分子雜交?核酸、蛋白轉(zhuǎn)印?免疫層析硝酸纖維素膜的應用?濾膜11免疫學的定義是機體識別“自身”與“非己”抗原，對自身抗原形成天然免疫耐受，對“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能。正常情況下，這種生理功能對機體有益，可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護作用免疫學的定義是機體識別“自身”與“非己”抗原，對自身12免疫學的發(fā)展?經(jīng)驗免疫學時期在實踐中創(chuàng)造性地發(fā)明了人痘苗?經(jīng)典免疫學時期由人體現(xiàn)象的觀察進入了科學實驗時期?近代免疫學時期出現(xiàn)了全新的免疫學理論?現(xiàn)代免疫學時期從分子水平對免疫系統(tǒng)進行研究免疫學的發(fā)展?經(jīng)驗免疫學時期13抗原抗體的結合抗原抗體——鑰匙和鎖的關系抗體能夠特異性的結合抗原的活性位點?？乖贵w的結合抗原抗體——鑰匙和鎖的關系14基因工程—人造蛋白的誕生及意義基因工程指按人們意愿設計，通過改造基因或基因組而改變生物的遺傳特性，從而獲得新的品種貨或產(chǎn)品。意義：可以穩(wěn)定的獲得人類所要的蛋白?；蚬こ獭嗽斓鞍椎恼Q生及意義基因工程指按人們意愿設計，通過15膠體金免疫層析技術的誕生和發(fā)展

?20世紀90年代初，第一個免疫層析產(chǎn)品誕生——用于人絨毛膜促性腺激素(HCG)的測定。?在其后的20年中，免疫層析產(chǎn)品得到了快速的發(fā)展：項目所占百分比早孕檢測90%以上毒品檢測80-90%疾病檢測30-40%膠體金免疫層析技術的誕生和發(fā)展?20世紀90年代初，第一16膠體金免疫層析技術的特點?快速，定性10分鐘以內(nèi)就可得到檢測結果。?無需設備

一根檢測條就能完成檢測?準確、靈敏

靈敏度可以達到10-9數(shù)量級膠體金免疫層析技術的特點?快速，定性17膠體金免疫層析技術的發(fā)展?應用范圍不斷擴大

疾病診斷，食品安全，藥物檢測，DNA檢測?特異性，靈敏度不斷提高?半定量，定量檢測：

銀染色膠體金免疫層析技術；

免疫熒光技術；

時間分辨熒光技術

HCG檢測靈敏度特異性樣本早