抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)

抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)

移植后的排斥反應(yīng)仍然是學(xué)術(shù)界面臨的難題。隨著各種免疫抑制劑的應(yīng)用，移植后的排斥反應(yīng)得到了有效控制。這些免疫抑制劑主要針對(duì)T細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)，因?yàn)榧韧J(rèn)為細(xì)胞性排斥反應(yīng)是移植物發(fā)生排斥的直接原因，然而臨床數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)器官移植術(shù)后即使應(yīng)用了足量的T細(xì)胞免疫抑制仍然有排斥反應(yīng)發(fā)生。1968年，Morris等首次報(bào)道腎移植排斥前后受體血清內(nèi)存在抗體，即供體特異性抗體（donor-specificantibody,DSA），隨后導(dǎo)致由抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)（antibody-mediatedrejection,AMR），并對(duì)移植物功能的丟失甚至移植失敗產(chǎn)生重要影響1rr的發(fā)生機(jī)制1.1體人類(lèi)細(xì)胞抗體根據(jù)移植前后存在的時(shí)間點(diǎn)DSA可以分為2種：預(yù)存DSA和新生DSA。前者多見(jiàn)于多次妊娠、多次輸血、人工血液透析或感染過(guò)與供體人類(lèi)淋巴細(xì)胞抗原（humanlymphocyteantigen,HLA）有交叉反應(yīng)的細(xì)菌或病毒的患者，這些患者移植術(shù)后容易發(fā)生超急性AMR非HLA抗體在移植中一般指的是自身反應(yīng)性抗體和同種異體反應(yīng)性抗體，其特異性針對(duì)HLA以外的靶點(diǎn)。動(dòng)物模型研究和臨床數(shù)據(jù)表明，炎癥環(huán)境、抗原表達(dá)的增加及通過(guò)翻譯后修飾形成的新抗原有助于非HLA抗體的形成，隨后對(duì)移植物造成損傷1.2抗原受體的t細(xì)胞超氧化物理特性AMR主要由B淋巴細(xì)胞參與，B細(xì)胞識(shí)別的抗原包括T細(xì)胞依賴(lài)抗原（Tcelldependentantigen,TD-Ag）和T細(xì)胞非依賴(lài)抗原（Tcell-independentantigen,TI-Ag）。B細(xì)胞抗原受體（Bcellreceptor,BCR）主要包括膜結(jié)合型IgM和膜結(jié)合型IgD，由2條重鏈和2條輕鏈連接而成。BCR可直接識(shí)別TI-Ag，如天然的蛋白質(zhì)抗原、多糖或脂類(lèi)抗原。事實(shí)上在器官移植中抗原多為T(mén)D-Ag,B細(xì)胞對(duì)TD-Ag的應(yīng)答還需要Th細(xì)胞等因素的輔助1.3補(bǔ)體分級(jí)形成膜AMR對(duì)移植器官的影響主要通過(guò)2種途徑：補(bǔ)體依賴(lài)途徑和非補(bǔ)體依賴(lài)途徑。在第一種情況下，通過(guò)一系列蛋白水解步驟激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞表面由抗凝狀態(tài)變?yōu)榇倌隣顟B(tài)，并形成膜攻擊復(fù)合物（membraneattackcomplex,MAC)抗體也可以通過(guò)不依賴(lài)于補(bǔ)體的途徑直接導(dǎo)致組織損傷，如抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)2ri的檢測(cè)和診斷2.1dsa的檢測(cè)原理HLA抗體的檢測(cè)是診斷AMR的主要指標(biāo)之一，抗HLA抗體檢測(cè)經(jīng)歷了補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)（complement-dependentcytotoxicity,CDC）、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)交叉配型（flowcytometrycrossmatch,FCXM）和免疫磁珠液相芯片技術(shù)的發(fā)展。多年來(lái)CDC一直是檢測(cè)HLA抗體的經(jīng)典方法，受體血清中存在的抗體與淋巴細(xì)胞表面表達(dá)的HLA抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，加入補(bǔ)體后導(dǎo)致細(xì)胞裂解。裂解的細(xì)胞被熒光活性染料染色，然后用群體反應(yīng)性抗體（panelreactiveantibody,PRA）水平體現(xiàn)受體免疫情況ELISA法由于操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)等原因已被大多數(shù)移植免疫中心棄用。Luminex技術(shù)是一種從流式技術(shù)發(fā)展而來(lái)、基于高通量平臺(tái)對(duì)DSA進(jìn)行檢測(cè)的微球分析法。在腎臟和心臟移植中，通過(guò)Luminex技術(shù)對(duì)DSA的研究使排斥反應(yīng)檢測(cè)甚至抗排斥治療效果的監(jiān)測(cè)成為可能2.2記憶性b細(xì)胞的檢測(cè)對(duì)DSA的單獨(dú)評(píng)估不能完全說(shuō)明在不同器官移植環(huán)境中發(fā)生的完整的體液免疫反應(yīng)，且DSA種類(lèi)繁多，抗體檢測(cè)難以做到滴水不漏。由于記憶性B細(xì)胞在AMR中發(fā)揮著重要作用，因此追蹤和檢測(cè)記憶性B細(xì)胞也逐漸成為研究焦點(diǎn)一種基于酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)的定量檢測(cè)記憶性B細(xì)胞的方法也逐漸被采用，此方法可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)出產(chǎn)生HLA抗體的B細(xì)胞，但在處理低濃度的抗體免疫反應(yīng)時(shí)存在局限性新一代高通量測(cè)序的出現(xiàn)為大規(guī)模的抗體鑒定和檢測(cè)提供了可能，該技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于疫苗學(xué)、自身免疫、感染和癌癥等領(lǐng)域2.3dsa、記憶性b細(xì)胞、移植器官的診斷與amr的結(jié)合病理學(xué)穿刺檢查和C4d沉積仍然在AMR診斷中占據(jù)重要位置。1993年，F(xiàn)eucht等目前臨床上一般將DSA、記憶性B細(xì)胞的檢測(cè)及移植器官穿刺標(biāo)本的病理學(xué)特征等結(jié)合起來(lái)對(duì)AMR進(jìn)行綜合判斷，以提高診斷的正確率。3抗體不良反應(yīng)AMR防治方法主要包括去除已經(jīng)存在或新生的抗體、清除或抑制抗體生成細(xì)胞、延遲或抑制抗體依賴(lài)的補(bǔ)體損傷。多種藥物或治療方法的組合已被廣泛用于臨床AMR的治療，但是治療效果仍有待進(jìn)一步研究。3.1血漿置換和dsaAMR治療的主要目的是去除預(yù)存或新生的抗體并抑制其再發(fā)展和損害。靜脈注射Ig和血漿置換以減少循環(huán)中的DSA仍是目前主要的治療手段，Ig可以中和、消耗受體血液中的DSA，是最常用的治療方法；血漿置換可以快速去除血漿中的抗體及免疫復(fù)合物，此外還可去除一些其他的體液因子如補(bǔ)體和細(xì)胞因子等，但不能阻止這些物質(zhì)的再生3.2抗cd20治療b細(xì)胞的相關(guān)研究B細(xì)胞在AMR和慢性移植物功能障礙中的復(fù)雜作用及其潛在的生物學(xué)過(guò)程為AMR的治療提供了新思路，如抗CD20藥物利妥昔單抗可用于減少B細(xì)胞3.3pacscb的活性酶抑制劑抑制補(bǔ)體活性的藥物也引起了很高的關(guān)注，如依庫(kù)珠單抗（eculizumab）是一種C5補(bǔ)體抑制劑，可以抑制C5被C4bC2aC3b（經(jīng)典途徑）或C3bBbC3b（替代途徑）分解并形成活性酶形式：C5a和C5b。在一項(xiàng)針對(duì)腎移植受者的隨機(jī)設(shè)計(jì)的研究中，依庫(kù)珠單抗在預(yù)防AMR發(fā)生和治療上顯示出較好的效果4移植器官的治療近年來(lái)，隨著器官移植的快速發(fā)展，人們對(duì)AMR的研究和認(rèn)識(shí)有了很大的提高，尤其在AMR檢測(cè)和診斷方面取得了較大進(jìn)展，但在治療方面進(jìn)展緩慢。AMR的治療效果總體上不甚理想，尤其是在慢性AMR治療方面，可能是因?yàn)橐浦财鞴僖呀?jīng)發(fā)生了不可逆的組織損傷，導(dǎo)致移植物存活率大大降低；AMR還存在諸多基礎(chǔ)問(wèn)題亟待解決，比如復(fù)雜的體液免疫機(jī)制及其與細(xì)胞免疫之間的關(guān)系仍然沒(méi)有完全闡明。在今后的研究中，如何早期檢測(cè)和監(jiān)測(cè)DSA、尋找AMR的治療藥物或方法仍是研究的主要方向。新興的生物和分子治療方法在治療AMR方面有很好的前景，未來(lái)需要大規(guī)