脂肪乳劑對布比卡因藥代動力學(xué)的影響

脂肪乳劑對布比卡因藥代動力學(xué)的影響

布比卡中毒可導(dǎo)致心血管系統(tǒng)衰竭和心臟停止，并在臨床上無法恢復(fù)心臟活力。目前,動物實驗和臨床病例證實了脂肪乳劑能快速救治酰胺類局麻藥導(dǎo)致的心臟驟停,并對藥代動力學(xué)有影響1數(shù)據(jù)和方法1.1儀器、檢測設(shè)備主要儀器有:呼吸機(jī)(Evita4,Drager公司,德國)、監(jiān)護(hù)儀(HewletttPackardModel66S,惠普公司,美國)、高效液相色譜儀(LC-10,島津公司,日本)、離心機(jī)(上海精密儀器有限公司)、血氣分析儀(Premier3000,通用公司,美國)、色譜工作站(CLASS-VP6.2,島津公司,日本)、pH計(320pH,瑞士梅特勒一托利多上海有限公司)、微量泵(WZ-50C,浙江醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器廠)、色譜柱(DimaC18200mm×4.6mmI.D./5μm,迪馬公司,美國)、動脈壓力傳感器(貝朗醫(yī)療有限公司,德國)、自制動物實驗手術(shù)包等。主要試劑有:布比卡因標(biāo)準(zhǔn)品(批號:S20061002,上海三維制藥有限公司)、0.75%布比卡因(批號:6H04004,上海禾豐制藥有限公司)、20%英脫利匹特(無錫華瑞制藥有限公司)、維庫溴銨(浙江仙居制藥有限公司)、甲醇(J.T.Baker公司,美國)、叔甲醚(J.T.Baker公司,美國)、三乙胺(Tedia公司,美國)、磷酸(Tedia公司,美國)、生理鹽水(上海旭東海普藥業(yè)有限公司)、正己烷(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、氫氧化鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)等。1.2實驗方法1.2.1lectroctoriogh監(jiān)測無目的飼養(yǎng)新西蘭大白兔16只緩慢靜脈給予20%烏拉坦1.0~1.2g/kg麻醉,連續(xù)三導(dǎo)聯(lián)心電圖(electrocardiograph,ECG)監(jiān)測。氣管T形切開后進(jìn)行氣管內(nèi)插管,然后連接呼吸機(jī)行控制性機(jī)械通氣,設(shè)定吸入氧濃度為100%,容量模式,潮氣量15~18ml/kg,呼吸頻率40次/min。根據(jù)呼氣末二氧化碳分壓(endialcarbondioxidepartialpressure,P1.2.2兩組恒速輸注后血清控制指標(biāo)麻醉后新西蘭大白兔隨機(jī)分為對照組和實驗組,每組7只。為減少麻醉對實驗的影響,兩組動物均在給予烏拉坦后60min時,靜脈緩慢勻速推注0.1%布比卡因2mg/kg,持續(xù)時間3min內(nèi),然后在7min內(nèi),分別給予以下處理:對照組靜脈恒速輸注生理鹽水15ml/kg,而實驗組恒速輸注20%英脫利匹特15ml/kg。兩組動物均在布比卡因開始輸注后的第3min(即布比卡因輸注完畢時)、10min、20min、30min、40min、50min和60min時,動脈抽血測定血漿布比卡因濃度。布比卡因開始輸注后的第65min時開胸后取左心室心肌,測定心臟組織布比卡因濃度。1.2.4待去線產(chǎn)物的測定200μl血漿加入100μl4%NaOH,先渦旋30s后,然后再加入3ml萃取液渦旋3min,以3000r/min離心,持續(xù)10min。抽取有機(jī)相2ml,35℃水浴下持續(xù)氮氣吹干,試管殘留物加入100μl流動相后渦旋30秒,以12000r/min離心,持續(xù)10min。抽取上層液75μl加入容積250μl的管形瓶中,高效液相色譜法(high-performanceliquidchromatography,HPLC)系統(tǒng)每次抽取上層液25μl自動檢測。心臟組織布比卡因濃度測定過程:心肌組織標(biāo)本解凍后,先用濾紙吸干標(biāo)本表面液體,再取0.5g組織加入2ml的50%甲醇勻漿,取200μl的勻漿液進(jìn)行分析,操作方法同血漿分析過程。根據(jù)各時間點的布比卡因圖譜面積計算各時間點血漿布比卡因濃度,并使用Winlonin軟件計算給予布比卡因10min后的藥代動力學(xué)參數(shù)。1.2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制抽取無實驗?zāi)康恼Ｍ醚獫{0.5ml,分別加入各種濃度的布比卡因標(biāo)準(zhǔn)液,濃度范圍在20~5000ng/ml(取8個濃度點,分別是20、50、100、200、500、1000、2000和5000ng/ml),然后采用以上血漿布比卡因濃度測定的處理方法進(jìn)行高效液相測定,以布比卡因的濃度對布比卡因峰面積值行線性回歸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.3方法的線性范圍、回歸方程采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ue0af±s)表示。兩組平均動脈壓(meanarterialpressure,MAP)、心率(heartrate,HR)的比較采用重復(fù)測量數(shù)據(jù)方差分析;兩組相同時間點血漿布比卡因濃度、藥代動力學(xué)參數(shù)和心肌布比卡因濃度的組間比較采用獨立樣本t檢驗;采用Excel2003計算線性回歸方程。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1過性改變、10min內(nèi)恢復(fù)布比卡因輸注過程中偶有室性早搏,QRS增寬,但均為一過性改變,10min內(nèi)均恢復(fù)正常。布比卡因開始輸注后第0~60min期間的MAP和HR,2組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。2.2高效液相圖譜鋒面積的線性回歸分析新西蘭大白兔血漿布比卡因濃度區(qū)間在20~5000ng/ml時,其和高效液相圖譜鋒面積成良好線性相關(guān),相關(guān)系數(shù)顯示線性回歸方程為:Y=58.84X+395,R2.3血漿布比卡因濃度實驗組與對照組血漿布比卡因濃度分布布比卡因開始輸注后第3min時,實驗組和對照組血漿布比卡因濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而在其它相同時間點的血漿布比卡因濃度,實驗組均顯著高于對照組(P<0.01),見表2。對照組心肌布比卡因濃度為(304±61)ng/g,顯著高于實驗組[(176±50)ng/g,P<0.01]。2.4藥房動態(tài)參數(shù)對照組房室參數(shù)t3布比卡因的用量臨床麻醉管理水平的提高和新型局麻藥的應(yīng)用,大大降低了局麻藥中毒的發(fā)生率,硬膜外麻醉局麻藥中毒的發(fā)生率約為4/10000,外周神經(jīng)阻滯約為7.5/10000~20/10000目前脂肪乳劑快速逆轉(zhuǎn)局麻藥中毒的動物實驗和臨床報道逐漸增多,還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)脂肪乳劑對其它脂溶性藥物的中毒具有治療作用實驗中選擇布比卡因和英脫利匹特的劑量選擇考慮多個方面。選擇2mg/kg布比卡因的原因如下:作者早期計劃給予大劑量10mg/kg布比卡因致兔心臟停搏,檢測整個中毒和復(fù)蘇過程中的布比卡因藥代動力學(xué)變化,但作者發(fā)現(xiàn)各組動物的復(fù)蘇結(jié)果和復(fù)蘇成功的時間不同,復(fù)蘇過程中的血流動力學(xué)也不同,這些對藥代動力學(xué)都有很大影響,不能準(zhǔn)確反映藥代動力學(xué)變化。預(yù)實驗發(fā)現(xiàn)2mg/kg布比卡因雖然可致一過性偶發(fā)室性早搏,但對新西蘭大白兔血流動力學(xué)無顯著影響,給予脂肪乳劑可準(zhǔn)確反映其對布比卡因藥代動力學(xué)的影響。選擇20%英脫利匹特15ml/kg對布比卡因藥代動力學(xué)的影響有以下原因:20%脂肪乳劑在大鼠的LD作者在先前的研究中發(fā)現(xiàn),使用脂肪乳劑或生理鹽水預(yù)處理后,給予布比卡因?qū)е滦呐K驟停時的心肌布比卡因濃度兩組沒有統(tǒng)計學(xué)差異1.2.3流動相v/v回收反應(yīng)血漿和心肌布比卡因濃度測定采用高效液相技術(shù),使用液-液萃取方法。萃取液為正己烷和叔甲醚,容積比例1∶1(v/v),預(yù)