瑞替加濱的降解動力學研究

瑞替加濱的降解動力學研究

氨基乙醇-4-（4-氟丙烯酸-4-）-1-乙酰氯基苯）是一種新型抗癲癇藥物。在臨床研究中發(fā)現(xiàn),瑞替加濱具有神經保護作用,并且沒有嚴重的副作用,從安全性和有效性兩方面考慮,瑞替加濱是一種具有良好前景的抗癲癇藥物。目前對于瑞替加濱的研究大都是基于它的體內降解行為展開的在我們的實驗過程中發(fā)現(xiàn),瑞替加濱原料藥在溶液狀態(tài)下極不穩(wěn)定,室溫下放置即會產生降解,為此我們測定了它在不同溫度和pH值下的降解速率,繪出了不同條件下的降解速率曲線,以期為完善質量控制方法和開發(fā)穩(wěn)定性良好的制劑提供依據。根據瑞替加濱的溶解度實驗我們發(fā)現(xiàn),瑞替加濱在丙酮和乙腈中易溶,在甲醇中溶解,在乙醇和0.1mol/L的HCl溶液中略溶,在甲醇和水為1∶1的溶劑中微溶,而幾乎不溶于水,所以在實驗中配備瑞替加濱溶液時加入一定量的甲醇助溶。1實驗部分1.1微生物水凈化系統(tǒng)瑞替加濱原料藥;色譜甲醇、磷酸二氫鈉、磷酸、鹽酸、氫氧化鈉均為分析純;高純水是由Milli-Q微孔水凈化系統(tǒng)制得的。Agilent1200型高效液相色譜儀(配備真空脫氣機、四元泵、自動進樣器、柱溫箱和可變波長的紫外檢測器);VersionB.03.01的安捷倫化學工作站;W201型恒溫浴鍋;PHM210型pH計。1.2溶液制備1.2.1瑞替加濱溶液精密稱取瑞替加濱原料藥150mg于50mL的容量瓶中,加入甲醇溶解,并稀釋至刻度,配制成含瑞替加濱3mg/mL的儲備溶液。1.2.2流動相a緩沖液精密稱定磷酸二氫鈉1.2g于1000mL的燒杯中,加入990mL的高純水,溶解,用磷酸調節(jié)溶液的pH至2.5,加高純水稀釋至1000mL,混合均勻,配制成磷酸緩沖液,作為流動相A。1.2.3ph值的確定精密稱定磷酸二氫鈉12mg分別置于10mL的容量瓶中,加入9mL的高純水溶解,用稀鹽酸和氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值分別為0.2,0.3,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,11.0,12.0,13.0,13.5,13.7和13.8。然后加高純水稀釋至刻度,混勻。1.3條件1色譜柱BaselineC1.4標準曲線及方法將瑞替加濱儲備溶液逐級稀釋至濃度分別為1,5,10,50,100,200,500,1000,1500,2000μg/mL的工作溶液,按濃度從低到高進樣,進行HPLC分析,記錄不同濃度所對應的峰面積。連續(xù)3d重復上述實驗。1.5u3000溶液量取瑞替加濱儲備溶液2mL于不同的棕色密閉反應瓶中,加入2mL高純水稀釋,振蕩混勻。分別置于溫度為25,40,50,60,70℃的恒溫浴鍋中加熱,于不同的時間點取樣進行HPLC分析,進樣前向溶液中加入2mL的高純水稀釋,振蕩混勻。1.6緩沖溶液的配制量取瑞替加濱儲備溶液2mL于不同的棕色密閉反應瓶中,加入2mLpH值分別為0.2,0.3,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,11.0,12.0和13.0的磷酸二氫鈉的緩沖溶液。置于70℃的恒溫浴鍋中加熱,于不同的時間點取樣,用對應的溶液進行中和,然后進行HPLC分析,記錄對應的峰面積。1.7級降解速率常數假設瑞替加濱在溶液中的降解為一級降解,那么它的降解速率常數就為一級降解速率常數,用k其中,C應用這一方程對瑞替加濱在不同降解條件下的降解動力學進行研究。2結果與討論2.1圖1:“小樣本”圖2瑞替加濱原料藥和降解溶液的HPLC分析結果,見圖1。由圖1可知,瑞替加濱約在12min時出峰,主藥與雜質、雜質與雜質之間具有較好的分離度,說明這一方法具有較好的專屬性。2.2建立線性回歸模型對每一天的實驗數據分別進行線性回歸,以濃度C為橫坐標,峰面積A為縱坐標作圖,得到線性回歸方程,方程的斜率、截距和線性相關系數(R由表1可知,R2.3溶液穩(wěn)定性的影響在瑞替加濱樣品的研究過程中,我們發(fā)現(xiàn)瑞替加濱在溶液狀態(tài)下極不穩(wěn)定,很容易發(fā)生降解,它的降解速率受到多種因素的影響。本文對瑞替加濱原料藥在不同溫度和pH值下的降解動力學進行了考察。2.3.1溫度對降解速率的影響用外標法計算剩余瑞替加濱的濃度。以降解時間為橫坐標,ln(C由圖2可知,隨著溫度的升高,降解速率常數(k我們可以用阿倫尼烏斯方程表示溫度對降解速率的影響:其中,A為頻率因子,E根據降解動力學曲線計算出不同溫度下瑞替加濱的降解速率常數,以絕對溫度的倒數(1/T)為橫坐標,降解速率常數的對數值(lnk2.3.2ph值對降解速率的影響以外標法計算剩余瑞替加濱的濃度,以降解時間為橫坐標,ln(C為了更加明確的表述pH值與降解速率常數的關系,我們以pH值為橫坐標,以不同pH值對應的降解速率常數為縱坐標作圖,得pH-速率曲線,見圖4。由圖4可知,在pH為3時,降解速率常數最小,這個時候瑞替加濱最為穩(wěn)定。當溶液的pH>3時,隨著pH值的增大,瑞替加濱在溶液中的降解速率逐漸增大;在pH值3~8的區(qū)間內降解速率的增加較為平緩;當pH值>8時,瑞替加濱的降解速率迅速增加。當溶液的pH值<3時,瑞替加濱在溶液中的降解速率隨著pH值的減小迅速增加,可知瑞替加濱在酸性溶液中相對于堿性溶液中穩(wěn)定。3溫度和ph值對降解的影響