瑞替加濱的降解動力學(xué)研究

瑞替加濱的降解動力學(xué)研究

氨基乙醇-4-（4-氟丙烯酸-4-）-1-乙酰氯基苯）是一種新型抗癲癇藥物。在臨床研究中發(fā)現(xiàn),瑞替加濱具有神經(jīng)保護(hù)作用,并且沒有嚴(yán)重的副作用,從安全性和有效性兩方面考慮,瑞替加濱是一種具有良好前景的抗癲癇藥物。目前對于瑞替加濱的研究大都是基于它的體內(nèi)降解行為展開的在我們的實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn),瑞替加濱原料藥在溶液狀態(tài)下極不穩(wěn)定,室溫下放置即會產(chǎn)生降解,為此我們測定了它在不同溫度和pH值下的降解速率,繪出了不同條件下的降解速率曲線,以期為完善質(zhì)量控制方法和開發(fā)穩(wěn)定性良好的制劑提供依據(jù)。根據(jù)瑞替加濱的溶解度實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn),瑞替加濱在丙酮和乙腈中易溶,在甲醇中溶解,在乙醇和0.1mol/L的HCl溶液中略溶,在甲醇和水為1∶1的溶劑中微溶,而幾乎不溶于水,所以在實(shí)驗(yàn)中配備瑞替加濱溶液時加入一定量的甲醇助溶。1實(shí)驗(yàn)部分1.1微生物水凈化系統(tǒng)瑞替加濱原料藥;色譜甲醇、磷酸二氫鈉、磷酸、鹽酸、氫氧化鈉均為分析純;高純水是由Milli-Q微孔水凈化系統(tǒng)制得的。Agilent1200型高效液相色譜儀(配備真空脫氣機(jī)、四元泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱和可變波長的紫外檢測器);VersionB.03.01的安捷倫化學(xué)工作站;W201型恒溫浴鍋;PHM210型pH計。1.2溶液制備1.2.1瑞替加濱溶液精密稱取瑞替加濱原料藥150mg于50mL的容量瓶中,加入甲醇溶解,并稀釋至刻度,配制成含瑞替加濱3mg/mL的儲備溶液。1.2.2流動相a緩沖液精密稱定磷酸二氫鈉1.2g于1000mL的燒杯中,加入990mL的高純水,溶解,用磷酸調(diào)節(jié)溶液的pH至2.5,加高純水稀釋至1000mL,混合均勻,配制成磷酸緩沖液,作為流動相A。1.2.3ph值的確定精密稱定磷酸二氫鈉12mg分別置于10mL的容量瓶中,加入9mL的高純水溶解,用稀鹽酸和氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值分別為0.2,0.3,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,11.0,12.0,13.0,13.5,13.7和13.8。然后加高純水稀釋至刻度,混勻。1.3條件1色譜柱BaselineC1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線及方法將瑞替加濱儲備溶液逐級稀釋至濃度分別為1,5,10,50,100,200,500,1000,1500,2000μg/mL的工作溶液,按濃度從低到高進(jìn)樣,進(jìn)行HPLC分析,記錄不同濃度所對應(yīng)的峰面積。連續(xù)3d重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。1.5u3000溶液量取瑞替加濱儲備溶液2mL于不同的棕色密閉反應(yīng)瓶中,加入2mL高純水稀釋,振蕩混勻。分別置于溫度為25,40,50,60,70℃的恒溫浴鍋中加熱,于不同的時間點(diǎn)取樣進(jìn)行HPLC分析,進(jìn)樣前向溶液中加入2mL的高純水稀釋,振蕩混勻。1.6緩沖溶液的配制量取瑞替加濱儲備溶液2mL于不同的棕色密閉反應(yīng)瓶中,加入2mLpH值分別為0.2,0.3,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,11.0,12.0和13.0的磷酸二氫鈉的緩沖溶液。置于70℃的恒溫浴鍋中加熱,于不同的時間點(diǎn)取樣,用對應(yīng)的溶液進(jìn)行中和,然后進(jìn)行HPLC分析,記錄對應(yīng)的峰面積。1.7級降解速率常數(shù)假設(shè)瑞替加濱在溶液中的降解為一級降解,那么它的降解速率常數(shù)就為一級降解速率常數(shù),用k其中,C應(yīng)用這一方程對瑞替加濱在不同降解條件下的降解動力學(xué)進(jìn)行研究。2結(jié)果與討論2.1圖1:“小樣本”圖2瑞替加濱原料藥和降解溶液的HPLC分析結(jié)果,見圖1。由圖1可知,瑞替加濱約在12min時出峰,主藥與雜質(zhì)、雜質(zhì)與雜質(zhì)之間具有較好的分離度,說明這一方法具有較好的專屬性。2.2建立線性回歸模型對每一天的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行線性回歸,以濃度C為橫坐標(biāo),峰面積A為縱坐標(biāo)作圖,得到線性回歸方程,方程的斜率、截距和線性相關(guān)系數(shù)(R由表1可知,R2.3溶液穩(wěn)定性的影響在瑞替加濱樣品的研究過程中,我們發(fā)現(xiàn)瑞替加濱在溶液狀態(tài)下極不穩(wěn)定,很容易發(fā)生降解,它的降解速率受到多種因素的影響。本文對瑞替加濱原料藥在不同溫度和pH值下的降解動力學(xué)進(jìn)行了考察。2.3.1溫度對降解速率的影響用外標(biāo)法計算剩余瑞替加濱的濃度。以降解時間為橫坐標(biāo),ln(C由圖2可知,隨著溫度的升高,降解速率常數(shù)(k我們可以用阿倫尼烏斯方程表示溫度對降解速率的影響:其中,A為頻率因子,E根據(jù)降解動力學(xué)曲線計算出不同溫度下瑞替加濱的降解速率常數(shù),以絕對溫度的倒數(shù)(1/T)為橫坐標(biāo),降解速率常數(shù)的對數(shù)值(lnk2.3.2ph值對降解速率的影響以外標(biāo)法計算剩余瑞替加濱的濃度,以降解時間為橫坐標(biāo),ln(C為了更加明確的表述pH值與降解速率常數(shù)的關(guān)系,我們以pH值為橫坐標(biāo),以不同pH值對應(yīng)的降解速率常數(shù)為縱坐標(biāo)作圖,得pH-速率曲線,見圖4。由圖4可知,在pH為3時,降解速率常數(shù)最小,這個時候瑞替加濱最為穩(wěn)定。當(dāng)溶液的pH>3時,隨著pH值的增大,瑞替加濱在溶液中的降解速率逐漸增大;在pH值3~8的區(qū)間內(nèi)降解速率的增加較為平緩;當(dāng)pH值>8時,瑞替加濱的降解速率迅速增加。當(dāng)溶液的pH值<3時,瑞替加濱在溶液中的降解速率隨著pH值的減小迅速增加,可知瑞替加濱在酸性溶液中相對于堿性溶液中穩(wěn)定。3溫度和ph值對降解的影響