硫代糖苷類sgl2抑制劑的合成及降糖作用研究

硫代糖苷類sgl2抑制劑的合成及降糖作用研究

糖尿病是由人體的胰島素抵抗和分泌缺陷引起的代謝疾病，主要是由于血液中葡萄糖的增加?，F(xiàn)在，它主要是一種2型糖尿病，占患者的90%左右。鈉-葡萄糖同向轉(zhuǎn)運體(SGLT)是一種僅在腎小管和腸道基底外側膜表達的蛋白由圖1可以看出,這些抑制劑分子中帶有2或3個芳香環(huán),并通過一個氧原子連接一個D-吡喃葡萄糖或6-O-乙?；?D-吡喃葡萄糖,而Dapagliflozin則直接與一個D-吡喃葡萄糖相連.我們前期已經(jīng)設計并合成了一系列5-(取代芐基)-1,3,4-噻二唑-2-基-硫代-β-D-吡喃糖苷并且測試了它們的降血糖活性1實驗部分1.1傅立葉變換紅外光譜熔點儀采用X-4型數(shù)字顯示顯微熔點測定儀,溫度計未校正;紅外光譜儀采用ThermoNicoletAvtarFT370型傅立葉變換紅外光譜儀,KBr壓片;核磁共振氫譜和核磁共振碳譜用BrukerAV400型或BrukerAV300型核磁共振儀測定,DMSO-d1.2目標化合物9a9bk的合成1.2.1化合物7b將2.69g(10mmol)5a和15mL水加入到容量為100mL的單頸燒瓶中,室溫攪拌10min,然后放入0.5g(12.5mmol)固體NaOH,接著加入溶有6.17g(15mmol)乙酰化溴代葡萄糖6A的15mL三氯甲烷溶液,混合攪拌5min,然后加入適量芐基三乙基溴化銨(BnEt5-(4-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Aa):白色晶體4.79g,產(chǎn)率80%.m.p.156~158℃;5-(4-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Ba):白色固體5.11g,產(chǎn)率85%.m.p.141~142℃;5-(2-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ab):白色固體4.19g,產(chǎn)率77%.m.p.140~141℃;5-(2-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bb):白色泡沫狀物質(zhì)4.86g,產(chǎn)率81%.m.p.77~78℃;5-(4-溴苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ac):白色固體4.99g,產(chǎn)率79%.m.p.160~161℃;5-(4-溴苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bc):白色固體5.19g,產(chǎn)率82%.m.p.98~99℃;5-(4-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ad):白色固體4.71g,產(chǎn)率80%.m.p.128~129℃;5-(4-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bd):白色晶體4.59g,產(chǎn)率78%.m.p.79~80℃;5-(2-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ae):白色固體4.24g,產(chǎn)率72%.m.p.106~107℃;5-(2-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Be):淡黃色泡沫狀物質(zhì)4.54g,產(chǎn)率77%.5-(2,4-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Af):白色固體4.74g,產(chǎn)率76%.m.p.131~132℃;5-(2,4-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bf):白色固體5.05g,產(chǎn)率81%.m.p.107~108℃;5-(2,6-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ag):白色泡沫狀物質(zhì)4.80g,產(chǎn)率77%.5-(2,6-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bg):白色固體4.98g,產(chǎn)率80%.m.p.105~106℃;5-(4-甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ah):白色固體4.72g,產(chǎn)率83%.m.p.167~168℃;5-(4-甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bh):白色固體4.32g,產(chǎn)率76%,m.p.117~118℃;1HNMR(DMSO-d5-(2,4-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Ai):白色固體,m.p.143~144℃;產(chǎn)率72%.5-(2,4-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bi):淡黃色油狀物4.37g,產(chǎn)率75%.5-(2,6-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(7Aj):白色固體4.95g,產(chǎn)率85%.m.p.171~172℃;5-(2,6-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(7Bj):白色泡沫狀物質(zhì)4.78g,產(chǎn)率82%.m.p.68~69℃;此外,我們通過鈀碳氫氣還原法制備出5-(對氨基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃糖苷8Ak或8Bk:100mL的單頸燒瓶中加入30mL四氫呋喃,3.00g(5mmol)化合物7Aa或7Ba,0.2g鈀碳,攪拌下通入氮氣,以出去體系中的氧氣,而后在氫氣的氛圍中加熱回流10h.冷卻至室溫,抽濾,濾液經(jīng)柱色譜純化得到白色固體,真空干燥即得8Ak或8Bk.5-(4-氨基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(8Ak):白色固體4.67g,產(chǎn)率82%.m.p.168~169℃;5-(4-氨基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-2,3,4,6-四-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(8Bk):白色固體4.33g,產(chǎn)率76%.m.p.141~142℃;1.2.2化合物結構鑒定500mL的圓底燒瓶中加入120mL無水甲醇,0.085g(3.7mmol)金屬鈉,攪拌至金屬鈉完全溶解,然后加入5.99g(10mmol)化合物7Aa,室溫下攪拌,TLC跟蹤反應至7Aa完全脫去乙?；?接著分批加入適量干燥的732型強酸性陽離子交換樹脂,pH試紙檢測直到溶液呈現(xiàn)中性,此時有白色固體析出,而后加入THF至固體全溶解.抽濾除去離子樹脂,并用無水甲醇洗滌樹脂,濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到白色固體,真空干燥得到化合物9Aa.同樣的方法制得9Ab~9Bk.5-(4-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Aa):白色固體3.49g,產(chǎn)率81%.m.p.178~180℃;5-(4-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ba):白色固體3.37g,產(chǎn)率78%.m.p.168~169℃;5-(2-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ab):白色固體3.45g,產(chǎn)率80%.m.p.102~103℃;5-(2-硝基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bb):白色固體3.54g,產(chǎn)率82%.m.p.172~173℃;5-(4-溴苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ac):白色固體3.77g,產(chǎn)率81%.m.p.181~182℃;5-(4-溴苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bc):白色固體3.86g,產(chǎn)率83%.m.p.158~159℃;5-(4-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ad):白色固體3.33g,產(chǎn)率79%.m.p.128~129℃;5-(4-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-d-吡喃半乳糖苷(9Bd):白色固體3.37g,產(chǎn)率80%.m.p.164~165℃;5-(2-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ae):白色固體3.58g,產(chǎn)率85%.m.p.128~129℃;5-(2-氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Be):白色固體3.45g,產(chǎn)率82%.m.p.147~148℃;5-(2,6-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Af):白色固體3.69g,產(chǎn)率81%.m.p.145~146℃;5-(2,4-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bf):白色固體3.51g,產(chǎn)率77%.m.p.138~139℃;5-(2,6-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ag):白色固體3.64g,產(chǎn)率80%.m.p.134~135℃;5-(2,6-二氯苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bg):白色固體3.73g,產(chǎn)率82%.m.p.151~152℃;5-(4-甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ah):白色固體3.32g,產(chǎn)率83%.m.p.176~177℃;5-(4-甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Bh):白色固體3.40g,產(chǎn)率85%.m.p.171~172℃;5-(2,4-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ai):白色固體3.32g,產(chǎn)率80%.m.p.162~163℃;5-(2,4-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bi):白色固體3.39g,產(chǎn)率82%.m.p.170~171℃;5-(2,6-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Aj):白色固體3.32g,產(chǎn)率80%.m.p.155~156℃;5-(2,6-二甲基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bj):白色固體3.23g,產(chǎn)率78%.m.p.133~134℃;5-(4-氨基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷(9Ak):白色固體3.17g,產(chǎn)率79%.m.p.100~102℃;5-(4-氨基苯氧甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(9Bk):白色固體3.29,產(chǎn)率82%.m.p.173~174℃;1.3體內(nèi)降糖活性測定化合物的降糖活性測試采用小鼠口服葡萄糖耐受量實驗(OGTT)法.樣品以1%羧甲基纖維素鈉配制成5mg/mL濃度的混懸液,給藥容量為0.4mL/20g體質(zhì)量,相當于100mg/kg的劑量.健康ICR小鼠,雌雄各半,體質(zhì)量20~24g,符合一級標準.實驗小鼠禁食16h,而后分別給小鼠口服待測化合物,給藥后90min腹腔注射2g/kg的葡萄糖鹽水溶液,兩小時后再次注射葡萄糖,以給小鼠陽性對照藥格列齊特(gliclazide)為對照實驗(給藥后1h注射葡萄糖),于造模后0.25,0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5和4h分別用毛細管從小鼠眼球后靜脈叢取血,然后離心分離血清,采用葡萄糖氧化酶法測定各時間點血清中葡萄糖的含量.化合物的降血糖活性通過抑制率(Inhibitoryrate,%)來衡量.抑制率={1-[AUC(9Aa~9Bk)/AUC(模型)]}×100%,其中,AUC為“血糖濃度-時間”曲線的曲線下面積(AreaUnderCarve).化合物降糖活性測試結果見表1.2結果與討論2.1-[2-苯基苯基雙環(huán)[4-2-2e-5-吡啶氫-4-基苯基吡喃糖的合成參照文獻[14]方法經(jīng)四步制備出噻二唑化合物5a~5j,見Scheme1,而后分別與α-溴代四乙酰基吡喃糖6A~6B在室溫下反應生成中間