代謝組學(xué)技術(shù)及在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用

代謝組學(xué)技術(shù)及在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用摘要：代謝組學(xué)是定性和定量分析某一生物或細(xì)胞所有低分子量代謝產(chǎn)物，從而監(jiān)測(cè)機(jī)體或活細(xì)胞中化學(xué)變化的一門科學(xué)，是系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分。作為系統(tǒng)生物學(xué)重要組成部分的“代謝組學(xué)”，通過考察機(jī)體受毒物刺激后體液或組織中代謝物的整體動(dòng)態(tài)變化軌跡，結(jié)合模式識(shí)別的多元分析方法，快速篩選毒性相關(guān)的分子標(biāo)志物，進(jìn)而更系統(tǒng)、更全面的揭示毒物作用于機(jī)體的典型特征，為相關(guān)毒性作用模型建立、環(huán)境或藥物中毒性化學(xué)物的快速高通量篩選以及相關(guān)疾病的預(yù)防與治療提供重要的科學(xué)依據(jù)。本文將從代謝組學(xué)的概況、代謝組學(xué)在毒理學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)行綜述。關(guān)鍵詞：代謝組學(xué)；毒理學(xué)；應(yīng)用“代謝組學(xué)”（metabonomics）是指對(duì)機(jī)體因環(huán)境因素刺激、病理生理擾動(dòng)或遺傳修飾等引起的多種代謝指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化的系統(tǒng)性定量檢測(cè)新方法，該技術(shù)廣泛用于植物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、遺傳學(xué)等學(xué)科領(lǐng)域?！按x組學(xué)”最早是在1999年由英國(guó)的JeremyNicholson提出的，是在利用核磁共振技術(shù)檢測(cè)生物體液組成成分的基礎(chǔ)上結(jié)合模式識(shí)別的分析方法發(fā)展而來，主要是通過考察生物體系受環(huán)境刺激或病理生理擾動(dòng)后的代謝產(chǎn)物動(dòng)態(tài)變化，分析代謝產(chǎn)物整體的變化軌跡，以此闡述某種病理（生理）過程中所發(fā)生的一系列生物學(xué)事件及機(jī)制。毒理學(xué)是研究毒物與機(jī)體交互作用的一門學(xué)科，一方面探討毒物對(duì)機(jī)體各種組織細(xì)胞、分子、特別是生物大分子作用及損害的機(jī)制，闡明毒物分子結(jié)構(gòu)與其毒作用之間的關(guān)系；另一方面，也研究毒物的體內(nèi)過程（吸收、分布、代謝轉(zhuǎn)化、排泄）及機(jī)體防御體系對(duì)毒物作用的影響?！按x組學(xué)”一經(jīng)提出，其嶄新的研究思路和無(wú)損傷的整體研究方法在包括藥物開發(fā)、毒性評(píng)價(jià)及預(yù)測(cè)、營(yíng)養(yǎng)和食物安全性評(píng)價(jià)等在內(nèi)的眾多領(lǐng)域得到日益廣泛的重視和應(yīng)用。代謝組學(xué)的概況1.1代謝組學(xué)的定義及發(fā)展[1]代謝組學(xué)是以組群指標(biāo)分析為基礎(chǔ)，以高通量檢測(cè)和數(shù)據(jù)處理為手段，以信息建模與系統(tǒng)整合為目標(biāo)的系統(tǒng)生物學(xué)的一個(gè)分支，是繼基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)后系統(tǒng)生物學(xué)的另一重要研究領(lǐng)域，它是研究生物體系受外部刺激所產(chǎn)生的所有代謝產(chǎn)物變化的科學(xué)，所關(guān)注的是代謝循環(huán)中分子量小于1000的小分子代謝物的變化，反映的是外界刺激或遺傳修飾的細(xì)胞或組織的代謝應(yīng)答變化。代謝組學(xué)的概念最早來源于代謝輪廓分析。Nicholson研究小組于1999年提出了代謝組學(xué)的概念，并在疾病診斷、藥物篩選等方面做了大量的卓有成效的工作。Fiehn等提出了metabolomics的概念，第一次把代謝產(chǎn)物和生物基因的功能聯(lián)系起來，之后很多植物化學(xué)家開展了植物代謝組學(xué)的研究，使得代謝組學(xué)得到了極大的充實(shí)，同時(shí)也形成了當(dāng)前代謝組學(xué)的兩大主流領(lǐng)域:metabolomics和metabonomics。經(jīng)過不斷發(fā)展，F(xiàn)iehn、Allen、Nielsen、Villas-Boas等確定了代謝組學(xué)一些相關(guān)層次的定義，已被學(xué)術(shù)界廣泛接受。第一個(gè)層次為靶標(biāo)分析，目標(biāo)是定量分析一個(gè)靶蛋白的底物和/或產(chǎn)物；第二個(gè)層次為代謝輪廓分析，采用針對(duì)性的分析技術(shù)，對(duì)特定代謝過程中的結(jié)構(gòu)或性質(zhì)相關(guān)的預(yù)設(shè)代謝物系列進(jìn)行定量測(cè)定；第三個(gè)層次為代謝指紋/足印，定性并半定量分析細(xì)胞外/細(xì)胞內(nèi)全部代謝物；第四個(gè)層次為代謝組學(xué)，定量分析一個(gè)生物系統(tǒng)全部代謝物，但目前還難以實(shí)現(xiàn)。作為應(yīng)用驅(qū)動(dòng)的新興科學(xué)，代謝組學(xué)已在藥物毒性和機(jī)理研究、微生物和植物研究、疾病診斷和動(dòng)物模型、基因功能的闡明等領(lǐng)域獲得了較廣泛地應(yīng)用。近來，代謝組學(xué)又在中藥成分的安全性評(píng)價(jià)、藥物代謝的分析、毒性基因組學(xué)、營(yíng)養(yǎng)基因組、藥理代謝組學(xué)、整合藥物代謝和系統(tǒng)毒理學(xué)等研究方面取得了新的突破和進(jìn)展。完整的代謝組學(xué)分析的流程包括樣品的制備、數(shù)據(jù)的采集和數(shù)據(jù)的分析及解釋。樣品的制備包括樣品的提取、預(yù)處理和化合物的分離。代謝物通常用水或有機(jī)溶劑(甲醇、己烷等)提取。分析之前，常先用固相微萃取、固相萃取、親和色譜等方法進(jìn)行預(yù)處理，用氣相色譜、液相色譜、毛細(xì)管電泳等方法進(jìn)行化合物的分離。預(yù)處理后，樣品中的代謝產(chǎn)物需要通過合適的方法進(jìn)行測(cè)定。色譜、質(zhì)譜、磁共振、紅外光譜、庫(kù)侖分析、紫外吸收、熒光散射、放射性檢測(cè)、光散射等分離分析手段及其組合都在代謝組學(xué)的研究中得到應(yīng)用。其中，核磁共振(NMR)技術(shù)特別是氫譜以其對(duì)含氫代謝產(chǎn)物的普適性，色譜以其高分離度、高通量，質(zhì)譜(MS)以其普適性、高靈敏性和特異性而成為最主要的分析工具。代謝組學(xué)研究的后期需借助于生物信息學(xué)平臺(tái)進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析和解釋，解讀數(shù)據(jù)中蘊(yùn)藏的生物學(xué)意義。最常用的是主成分分析(PCA)法和偏最小二乘(PLS)法。代謝組的規(guī)模與物種有關(guān)，差異很大。細(xì)菌代謝組規(guī)模相對(duì)較小，一般認(rèn)為大約不到1500種，例如Frster等重建了啤酒酵母的代謝通路圖，其中包含1175個(gè)代謝反應(yīng)和584種代謝產(chǎn)物。Karp等對(duì)大腸桿菌的研究證實(shí)其包含904個(gè)代謝反應(yīng)和886個(gè)小分子代謝物和376個(gè)大分子代謝物。植物代謝組通?？蛇_(dá)數(shù)千種，例如擬南芥有約5000種代謝物，而整個(gè)植物界的代謝物種類估計(jì)高達(dá)20萬(wàn)，高等動(dòng)物代謝組的規(guī)?？赡芨?。但在研究的幾個(gè)步驟中，代謝組學(xué)還存在一些不足。例如，分析手段存在局限性；全部定量分析難以實(shí)現(xiàn)，準(zhǔn)確性不足；定性過程復(fù)雜。針對(duì)這些問題，現(xiàn)在的研究者們?cè)谘芯坎呗院头椒ㄉ献鲋e極的探索和改進(jìn)。代謝組學(xué)研究工作的主要流程[2]根據(jù)生物學(xué)問題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案一收集樣品一制備分析樣品一數(shù)據(jù)獲得一原始數(shù)據(jù)差異峰列表!!一數(shù)據(jù)處理一數(shù)據(jù)分析一生物標(biāo)志物一從生物學(xué)角度解釋代謝組學(xué)的研究方法[3]一個(gè)完整的代謝組學(xué)流程從要研究的科學(xué)問題開始，通過合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，采集和制備生物樣本，使用適當(dāng)?shù)姆治龌瘜W(xué)技術(shù)獲取代謝物的時(shí)空分布信息；經(jīng)過數(shù)據(jù)整合與挖掘，發(fā)現(xiàn)和鑒定生物標(biāo)志物并將多維信息投影到代謝網(wǎng)絡(luò)中，回答生物學(xué)問題并提煉新的科學(xué)構(gòu)想，然后設(shè)計(jì)新的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證猜想或修正代謝網(wǎng)絡(luò)(圖1)。

血樣尿樣組織I空間LC-MSGC-MS時(shí)間小時(shí)天月NMRCE-MS數(shù)據(jù)整合與挖掘全組分分析靶標(biāo)分析代謝輪廓PCAHCAPLS-DASIMCA多維表征生物標(biāo)志物?血樣尿樣組織I空間LC-MSGC-MS時(shí)間小時(shí)天月NMRCE-MS數(shù)據(jù)整合與挖掘全組分分析靶標(biāo)分析代謝輪廓PCAHCAPLS-DASIMCA多維表征生物標(biāo)志物?新的科學(xué)猜想生物信息學(xué)代謝網(wǎng)絡(luò)修正圖1代謝組學(xué)研究方法代謝組學(xué)研究中的優(yōu)勢(shì)及存在的問題2.1代謝組學(xué)研究中的優(yōu)勢(shì)[4]代謝組學(xué)與轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn):①基因和蛋白表達(dá)的微小變化在代謝物上得到放大，從而更易檢測(cè)；②代謝組學(xué)技術(shù)無(wú)需建立全基因組測(cè)序和大量表達(dá)序列標(biāo)簽的數(shù)據(jù)庫(kù)；③代謝物質(zhì)種類遠(yuǎn)少于基因和蛋白質(zhì)的種類；④代謝組學(xué)的研究標(biāo)本容易獲得。2.2代謝組學(xué)研究中存在的問題[5]代謝組學(xué)在廣泛應(yīng)用的同時(shí)，也存在著明顯的不足。具體為：①對(duì)某一物種、某個(gè)組織或其細(xì)胞中所有的代謝途徑中的所有代謝產(chǎn)物同時(shí)進(jìn)行全面的高通量的定性和定量分析，在理論上行得通，但沒有任何一種分析技術(shù)能夠同時(shí)對(duì)代謝組中的所有化合物進(jìn)行分析；②代謝組學(xué)可得到大量信息，如何處理、分析及解釋這些信息是一個(gè)艱巨的技術(shù)難題；③如何把代謝組學(xué)數(shù)據(jù)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、遺傳學(xué)、酶學(xué)、代謝途徑和表現(xiàn)型分析的數(shù)據(jù)整合在一起，并給出生物學(xué)功能的解釋，將是最大的挑戰(zhàn)；④各種生理因素，如飲食、健康狀態(tài)、年齡、晝夜節(jié)律、壓力、遺傳變異和動(dòng)物品系均可影響生物標(biāo)本的代謝成分，如何準(zhǔn)確區(qū)分代謝圖譜的改變是生理學(xué)影響還是病理學(xué)改變也是一個(gè)難題；⑤當(dāng)機(jī)體的生理和藥理效應(yīng)超敏時(shí)）受試物即使沒有相關(guān)毒性，也可能引起明顯的代謝變化，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。代謝組學(xué)在毒理學(xué)中的實(shí)際應(yīng)用3.1在毒性機(jī)制研究中的應(yīng)用[6]通過體液或組織中代謝物的變化，能夠追溯到藥物所影響的代謝通路，從而給研究者關(guān)于毒性機(jī)制的大量信息。Mortishire-Smith等研究發(fā)現(xiàn)肝臟毒性與趨化因子受體5有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)尿中三羧酸循環(huán)中間產(chǎn)物減少，而且出現(xiàn)了異常物質(zhì)一中鏈二羥酸，就推測(cè)該藥物誘導(dǎo)了脂肪酸代謝紊亂。隨后通過3H同位素標(biāo)記軟脂酸發(fā)現(xiàn)其0-氧化呈劑量依賴性的減少，就進(jìn)一步證實(shí)了以上推測(cè)。Ming-yangLiao等對(duì)抗乙型肝炎病毒的化合物Bay41-4109的肝臟毒性進(jìn)行了研究。他們研究了不同劑量Bay41-4109處理的大鼠尿液、血清、肝臟的水性提取物和肝臟的脂性提取物的代謝物1HNMR圖譜的變化情況，發(fā)現(xiàn)3-羥（基）丁酸、乳酸、2-羥（基）丙酮醇、肌酐、乙醇、甘露醇、D-葡萄糖、馬尿酸等濃度有明顯變化，提示此藥物引起的肝毒性的機(jī)制與脂代謝紊亂和線粒體抑制有關(guān)。有研究者應(yīng)用代謝組學(xué)的方法對(duì)muraglitazar,—種能夠在雄性大鼠中引起結(jié)晶尿、膀胱乳突狀瘤以及中間細(xì)胞癌的PPAR雙激動(dòng)劑進(jìn)行了危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)尿液中二價(jià)陽(yáng)離子、枸櫞酸鹽減少，并由此推測(cè)，以上疾病的發(fā)生發(fā)病原因?yàn)椋核幬锬芤鹉蛞褐锈}的磷酸鹽結(jié)晶，該結(jié)晶物能夠造成膀胱慢性組織損傷。隨后的研究證實(shí)該藥對(duì)膀胱的致癌效應(yīng)是通過尿路結(jié)石造成的泌尿上皮損傷及其代償性增生介導(dǎo)的⑺。Flint，O.P等用代謝組學(xué)的方法研究了市場(chǎng)上HIV蛋白酶抑制劑（PI）的副作用。分別選擇導(dǎo)致脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙、胰島素抵抗、脂肪重動(dòng)員的蛋白酶抑制劑以及陰性對(duì)照藥為研究對(duì)象來處理體外培養(yǎng)的3T3-L1脂肪細(xì)胞。研究顯示，確認(rèn)的193個(gè)代謝物中，一種或多種PI處理后有81個(gè)化合物減少。這些代謝物主要是葡萄糖、磷酸、氨基酸（包括所有的糖異生前體）、谷胱甘肽（由谷氨酸衍生而來）、脂肪酸、泛酸（脂肪酸合成所必須）、三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物以及酮類物質(zhì)。導(dǎo)致脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙的PI抑制了24?58個(gè)化合物，而與脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙無(wú)關(guān)的PI只改變了3個(gè)化合物。這些結(jié)果顯示PI導(dǎo)致脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙與糖異生或糖酵解增強(qiáng)而導(dǎo)致的脂類合成的中間產(chǎn)物減少有關(guān)。Paker，R.A等的研究結(jié)果顯示，脂肪營(yíng)養(yǎng)障礙發(fā)生的機(jī)制與PI抑制了脂肪細(xì)胞的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體GLUT4有關(guān)。一種PI-3激酶抑制劑在高劑量時(shí)能引起大鼠不明原因的死亡,RobertsonD.G等［8］用代謝組學(xué)的方法對(duì)其毒性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在早期就有0-羥丁酸的迅速增高，而且傳統(tǒng)的毒性研究并沒有檢測(cè)出來。代謝組學(xué)在毒理學(xué)評(píng)價(jià)中的應(yīng)用［9］由英國(guó)帝國(guó)理工學(xué)院牽頭，5家著名的制藥公司參與設(shè)立了“COMET”(ConsortiumforMetabonomicToxicology)計(jì)劃。該計(jì)劃由Nicholson等科學(xué)家參與，旨在建立代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)，為毒性預(yù)測(cè)建立計(jì)算機(jī)專家系統(tǒng)。在完成147種不同模式毒物的實(shí)驗(yàn)研究后，他們建立起第一個(gè)基于代謝組的實(shí)驗(yàn)室嚙齒動(dòng)物肝臟和腎臟毒性預(yù)測(cè)的計(jì)算機(jī)專家系統(tǒng)，目前許多藥物毒理學(xué)研究均受到該計(jì)劃資助。通過代謝組學(xué)技術(shù)可以研究毒性物質(zhì)造成的生化代謝的異常，追蹤毒性作用的靶器官和生物標(biāo)志物，還能對(duì)毒性效應(yīng)隨時(shí)間的發(fā)展進(jìn)行直觀描述。例如Constantinou等對(duì)大鼠慢性肝硬化的代謝組學(xué)分析表明，血清代謝組能提供生物標(biāo)志物信息，并能跟蹤病理變化的發(fā)展進(jìn)程，可能提供一種肝硬化患者病情診斷的手段。Parr等對(duì)土豆的代謝指研究發(fā)現(xiàn)其中存在青藤堿等多胺類物質(zhì)，而這些物質(zhì)在以前的研究中從未報(bào)道，這是由于代謝指紋研究并無(wú)特定目標(biāo)物質(zhì)。這也說明代謝指紋在植物毒理學(xué)研究領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用空間。Chen等用LC-MS研究了馬兜鈴酸的腎臟毒性，結(jié)果表明95%的大鼠能正確歸類到受試組和對(duì)照組，并且找到了相對(duì)應(yīng)的代謝通路變化，這種方法可以應(yīng)用于復(fù)雜成分下機(jī)體的毒理學(xué)反應(yīng)。Coen等［10］認(rèn)為基于代謝組學(xué)的分子毒理學(xué)在疾病診斷、外源物質(zhì)毒性評(píng)估、功能基因組學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等領(lǐng)域有著良好應(yīng)用前景，其非侵入性的特點(diǎn)也更容易被人接受。代謝組學(xué)在食品成分評(píng)價(jià)及溯源中的應(yīng)用由于代謝組學(xué)可以發(fā)現(xiàn)樣品間的細(xì)微差別，因此可以為食品溯源和成分評(píng)價(jià)提供定性和定量數(shù)據(jù)。Cavaliere等［M采用GC-MS的代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)不同產(chǎn)地的橄欖油進(jìn)行了評(píng)價(jià)，該方法能對(duì)鄰近地區(qū)生產(chǎn)的橄欖油進(jìn)行區(qū)分，并對(duì)決定橄欖油質(zhì)量分級(jí)的化合物進(jìn)行了鑒定。Pongsuwan等應(yīng)用基于GC-TOF-MS和正交信號(hào)校正(OSC)與偏最小二乘法(PLS)的代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)日本綠茶進(jìn)行分級(jí)，結(jié)果表明該方法能在沒有標(biāo)準(zhǔn)品的情況下對(duì)綠茶的等級(jí)進(jìn)行準(zhǔn)確分級(jí)。Woodcock等結(jié)合近紅外光譜和模式識(shí)別法對(duì)不同產(chǎn)地蜂蜜的聚類進(jìn)行了研究。上述這些研究說明代謝組學(xué)為食品成分研究及食品溯源提供了一種全面而強(qiáng)大的分析方法。展望代謝組學(xué)從誕生之日起就被賦予了串聯(lián)基因組、蛋白質(zhì)組和轉(zhuǎn)錄組的重任，但由于現(xiàn)有儀器手段的限制，這一組學(xué)手段還不能完全實(shí)現(xiàn)設(shè)想的全方位代謝物檢測(cè)。隨著NMR冷凍探頭和高頻譜儀的發(fā)展以及各種質(zhì)譜技術(shù)與NMR的在線連用，將能大大提高代謝組學(xué)研究能力，當(dāng)然降低儀器成本以及儀器的小型化也是這一技術(shù)不斷推廣的前提。代謝組是一個(gè)多維度多變量的海量數(shù)據(jù)庫(kù)，這就依賴于化學(xué)計(jì)量學(xué)的不斷發(fā)展為代謝組學(xué)研究提供強(qiáng)有力的數(shù)據(jù)挖掘手段。隨著代謝組學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展，將建立大規(guī)模的標(biāo)準(zhǔn)化代謝組學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)，包括代謝輪廓、代謝標(biāo)志物等豐富信息，而且這些數(shù)據(jù)庫(kù)應(yīng)該與基因組、蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組的數(shù)據(jù)庫(kù)相互銜接，形成系統(tǒng)生物學(xué)數(shù)據(jù)鏈，指導(dǎo)科研實(shí)踐。目前，國(guó)內(nèi)外許多研究者都在進(jìn)行代謝組學(xué)研究，代謝組學(xué)應(yīng)用的范圍和領(lǐng)域也在不斷擴(kuò)大。但這些研究依然存在了許多問題亟待解決。(1)在代謝全譜分析中缺乏量的概念。在這個(gè)問題上，我們通過這幾年對(duì)代謝組學(xué)進(jìn)行的研究，也提出了自己的一些策略和思想，首先是將代謝指紋譜與定量進(jìn)行了結(jié)合，稱之為定量代謝指紋譜技術(shù)。這個(gè)結(jié)合包含了兩個(gè)層次，一個(gè)是數(shù)據(jù)采集技術(shù)上的結(jié)合；一個(gè)是數(shù)據(jù)分析技術(shù)上的結(jié)合。這樣的結(jié)合能實(shí)現(xiàn)指紋譜與定量?jī)?yōu)勢(shì)互補(bǔ)，將更清晰、更全面、更準(zhǔn)確地反映研究對(duì)象的代謝情況。(2)雖然代謝組學(xué)強(qiáng)調(diào)無(wú)歧視分析，但對(duì)于任何一個(gè)體系，都按代謝組學(xué)常規(guī)步驟按部就班地進(jìn)行分析，往往最終都沒有得到有用的結(jié)果。針對(duì)這個(gè)問題，我們認(rèn)為要重視先驗(yàn)知識(shí)的重要性，了解哪些代謝循環(huán)、代謝物質(zhì)最可能與研究體系相關(guān)，利用這樣的先驗(yàn)知識(shí)指導(dǎo)代謝組學(xué)分離分析條件的優(yōu)化、潛在生物標(biāo)志物的鑒定，將大大提高代謝組學(xué)研究的效率，并能很好地避免研究重心偏離的情況。(3)生物標(biāo)志物的尋找單一而片面。特別是對(duì)于疾病的研究，以前不太重視代謝、蛋白、基因數(shù)據(jù)與臨床數(shù)據(jù)的結(jié)合，各個(gè)方面的研究者就在自己的研究數(shù)據(jù)中進(jìn)行挖掘，以此來尋找標(biāo)志物，探尋機(jī)理。但實(shí)踐證明，這樣得出的結(jié)果都會(huì)有片面性，缺乏說服力。在這個(gè)問題上，應(yīng)該強(qiáng)調(diào)代謝組學(xué)數(shù)據(jù)與其它數(shù)據(jù)的結(jié)合，特別是臨床相關(guān)數(shù)據(jù)，以此來發(fā)現(xiàn)包含了不同數(shù)據(jù)內(nèi)容的復(fù)合生物標(biāo)志物，這也是今后代謝組學(xué)發(fā)展的一個(gè)重要方面，同時(shí)，這也為生物代謝或臨床表型多樣性研究[12]提供更可靠的方法和工具。盡管存在許多的問題，但也看到了在研究策略上整合一體化、標(biāo)準(zhǔn)化、定量化的趨勢(shì)，并且看到了在問題導(dǎo)向下的新技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，這都將推動(dòng)代謝組學(xué)不斷持續(xù)發(fā)展。相信隨著關(guān)注度的提高、人力和物力的不斷投入及應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，代謝組學(xué)必將得到更為穩(wěn)健的發(fā)展。參考文獻(xiàn)：[1]夏建飛,梁瓊麟,胡坪,王義明,羅國(guó)安.代謝組學(xué)研究策略與方法的新進(jìn)展[J].分析化學(xué),2009,(01).[2]王世成，王顏紅,胡小燕，王姍姍.代謝組學(xué)技術(shù)以及在食品安全方面的應(yīng)用[J].食品科技,2009,(03).⑶汪江山,孔宏偉，路鑫，趙欣捷,許國(guó)旺.代謝組學(xué)中的分離分析科學(xué)[J].化學(xué)進(jìn)展,2009,(11).李民，李幼生.營(yíng)養(yǎng)代謝組學(xué)面臨的問題[J].腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng),2009,(02).陳立娟，彭雙清.代謝組學(xué)技術(shù)及其在毒理學(xué)研究領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].生物技術(shù)通訊,2007,(01)⑹王穆,讓蔚清?代謝組學(xué)在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2009,(05)[7]WaitesCR,DominickMA,SandersonTP,etal.Nonclinicalsafetyevaluationofmuraglitazar,anovelPPARalpha/gammaagonist[J].ToxicolSci,2007,100(1):248-258.[8]Robe