免疫增殖病的檢驗(yàn)

免疫增殖病的檢驗(yàn)第一節(jié)免疫增殖病的分類一、定義免疫增殖?。╥mmunoproliferativedisease）是指免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞（包括淋巴細(xì)胞和單核—巨噬細(xì)胞）異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病。這類疾病的表現(xiàn)有免疫功能異常及免疫球蛋白質(zhì)和量的變化。二、免疫增殖病的分類增殖細(xì)胞疾病T細(xì)胞ALL、淋巴母細(xì)胞瘤、部分非霍奇金淋巴瘤等。B細(xì)胞CLL、MM、傳單、原發(fā)性巨球蛋白血癥、淋巴瘤等組織-單核細(xì)胞急單、急性組織細(xì)胞增多癥等其它毛細(xì)胞白血病、其他霍奇金病等對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的起源觀察表明，骨髓瘤細(xì)胞起源于骨髓中的前B細(xì)胞進(jìn)入淋巴細(xì)胞階段，當(dāng)受到抗原刺激后，其增殖產(chǎn)生記憶的B細(xì)胞，B細(xì)胞在淋巴結(jié)中完成免疫球蛋白類別轉(zhuǎn)換，可變成為漿細(xì)胞的瘤細(xì)胞并移至骨髓定居并增殖。在通常情況下IL-6是支持漿細(xì)胞增殖分化的關(guān)鍵因子，所以漿細(xì)胞的瘤細(xì)胞的持續(xù)增殖當(dāng)有IL-6的持續(xù)高水平存在。而臨床檢測(cè)表明骨髓瘤患者血清IL-6確有異常升高。因此，高水平的IL-6是漿細(xì)胞瘤的原因之一。二、正常體液免疫抑制正常的體液免疫是B細(xì)胞的增殖分化產(chǎn)生效應(yīng)的過程，一系列細(xì)胞因子將有序地啟動(dòng)上述過程，IL-4可啟動(dòng)休止期的B細(xì)胞進(jìn)入DNA合成期；IL-5促進(jìn)B細(xì)胞繼續(xù)增殖；IL-6促使B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，正常條件下IL-6可以反饋抑制IL-4控制B細(xì)胞的增殖分化過程，上述過程構(gòu)成了一個(gè)生物信息調(diào)節(jié)回路，恰到好處地控制體液免疫應(yīng)答過程的有序進(jìn)行。

三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理?yè)p傷漿細(xì)胞異常增生的后果是產(chǎn)生大量的單克隆型免疫球蛋白或其片段，這類免疫球蛋白或片段無正常的免疫功能。多為一種類型或?yàn)橹劓溁蜉p鏈，其含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常的免疫球蛋白。這些惡性增殖的免疫球蛋白可以沉積于組織，造成組織變性和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，導(dǎo)致相應(yīng)器官的功能障礙，因其血漿濃度過高而導(dǎo)致血液粘稠度增加，產(chǎn)生一系列直接或間接的病理?yè)p害。第三節(jié)常見免疫球蛋白增殖病單克隆免疫球蛋白增殖病是指患者體內(nèi)存在異常增多的單克隆免疫球蛋白的一類疾病。免疫球蛋白電泳位置在丙種球蛋白區(qū)域，故又稱丙種球蛋白增殖病，由于單克隆細(xì)胞增生，所以其產(chǎn)生的免疫球蛋白理化性質(zhì)高度均一，但無抗體及其它免疫活性，所以這類免疫球蛋白亦叫副蛋白或M蛋白。M蛋白可通過腎小球從尿中排出，即本-周蛋白。(二)、臨床表現(xiàn)和病理變化1、早期：無特殊癥狀，僅表現(xiàn)為ESR增快，血中檢出M蛋白、蛋白尿、漿細(xì)胞增多。2、典型病人癥狀及病理變化：(1)骨髓瘤細(xì)胞增生，浸潤(rùn)和破壞骨組織，造成骨質(zhì)疏松和溶骨性病變，導(dǎo)致骨痛和不同部位的骨折；(2)、惡性增殖的骨髓瘤細(xì)胞代替了骨髓中的正常成分，引起貧血、粒細(xì)胞、血小板減少，由于M蛋白增高，引起血粘增加，或沉積于腎小管中，造成腎小管上皮細(xì)胞淀粉樣變性，發(fā)生腎病綜合征，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致腎衰。血粘增高可引起神經(jīng)功能障礙。(3)、骨髓瘤細(xì)胞浸潤(rùn)其它組織時(shí)，可引起其相關(guān)組織或器官的病變。(三)、分類根據(jù)M蛋白的類別不同可分為：IgG型：約占50~60%IgA型：約占20~25%IgD型約：占1~2%IgE型約：罕見根據(jù)漿細(xì)胞合成功能不全分類可分為：輕鏈病和重鏈病二、原發(fā)性巨球蛋白血癥是一種伴有血清IgM增加的B細(xì)胞增殖病。病因不明。臨床癥狀：主要表現(xiàn)為IgM過多所致的血液高粘性綜合征，另外貧血、肝脾、淋巴結(jié)腫大、反復(fù)感染也常見。三、重鏈病由于漿細(xì)胞發(fā)生突變并異常增殖，合成功能障礙，只產(chǎn)生免疫球蛋白的重鏈或有缺陷的重鏈，不能與輕鏈組成完整的免疫球蛋白分子，致使血清中和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的重鏈，稱為重鏈病。四、良性單克隆丙種球蛋白病是指血清中出現(xiàn)M蛋白，而不伴有漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。本病一般無癥狀，往往因其它疾病就診時(shí)發(fā)現(xiàn)血中有M蛋白。如果尿中出現(xiàn)本-周氏蛋白則是危險(xiǎn)信號(hào)。一、血清蛋白區(qū)帶電泳蛋白質(zhì)區(qū)帶電泳是血清蛋白的經(jīng)典分析方法，血清(或尿液)標(biāo)本中不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)可明顯分開形成不同的區(qū)帶，通過正常的電泳圖譜進(jìn)行比較分析，可發(fā)現(xiàn)患者電泳圖譜有一狹窄而濃縮的集中帶，即M區(qū)帶。如下圖二、免疫球蛋白定量測(cè)定常用單向擴(kuò)散法和免疫濁度法。惡性單克隆丙種球蛋白病呈現(xiàn)某一類丙種球蛋白的顯著增高(>30mg/ml)。良性單克隆丙種球蛋白病增高不顯著，一般在20mg/ml以下。三、免疫球蛋白的分類鑒定(一)、免疫電泳免疫電泳是將區(qū)帶電泳和免疫擴(kuò)散結(jié)合起來的一種免疫學(xué)分析法。血清標(biāo)本先經(jīng)區(qū)帶電泳將各種蛋白成分分開，繼而用各種特異性抗血清進(jìn)行免疫擴(kuò)散，根據(jù)M蛋白在免疫電泳中所形成的特殊沉淀弧，觀察其電泳遷移位置與抗原特異性，可將M蛋白的免疫球蛋白類型和其輕鏈型加以鑒定。圖26-31、如果待測(cè)標(biāo)本與某型球蛋白重鏈及輕鏈抗血清產(chǎn)生相同遷移度的特殊沉淀弧，提示存在單克隆丙種球蛋白(M蛋白)，此現(xiàn)象多見于IgG、IgA、IgM型多發(fā)性骨髓瘤或原發(fā)性巨蛋白血癥。2、在同一抗輕鏈血清的反應(yīng)中，同時(shí)出現(xiàn)兩條相鄰的特殊沉淀弧，則可能是除M蛋白外還存在游離輕，偶爾也可見兩種M蛋白，此時(shí)應(yīng)進(jìn)一歩測(cè)定尿中的本-周蛋白。(1)伴有腎功能不全的輕鏈病，游離輕鏈較少?gòu)哪蛑信懦龆鴾粲谘褐校?2)存在輕鏈的四分子多聚體，分子量大，不易從尿中排出而存于血液中；(3)尚未發(fā)現(xiàn)的新重鏈的免疫球蛋白。4、若患者血清只與IgG、IgA或IgM中的一種抗重血清產(chǎn)生特殊沉淀弧，但在兩抗輕鏈抗血清中無沉淀弧，提示可能存在重鏈病。5、非分泌型骨髓瘤血清標(biāo)本在免疫電泳中均不出現(xiàn)特殊沉淀弧。(二)免疫選擇電泳將含抗k或r血清的瓊脂制成薄層瓊脂板，打孔后加入待測(cè)血清進(jìn)行火箭電泳，與標(biāo)本相應(yīng)的免疫球蛋白形成火箭樣沉淀峰。然后于孔的兩側(cè)各挖一槽，加入某型免疫球蛋白的抗血清或另一型輕抗血，溫育擴(kuò)散后，按沉淀弧形成的情況，進(jìn)行鑒定。(三)免疫固定電泳將待測(cè)血清或其它標(biāo)本在瓊脂平板上作區(qū)帶電泳，分離后于其上覆蓋含抗k或r輕鏈或各類重鏈的抗血清濾紙，當(dāng)抗體與某區(qū)帶中的單克隆免疫球蛋白結(jié)合后，便形成復(fù)合物而沉淀下來，再通過漂洗與染