去甲長(zhǎng)春花堿抗腫瘤的研究進(jìn)展

去甲長(zhǎng)春花堿抗腫瘤的研究進(jìn)展

長(zhǎng)春堿（va）是雅豆科植物從長(zhǎng)春花中分離出來(lái)的一種抗癌活性物質(zhì)。在20世紀(jì)70年代，有幾種主要藥物，如長(zhǎng)春新堿（rcr）、長(zhǎng)春花堿（vlb）、近年來(lái)的長(zhǎng)春花堿性酰胺（vd）和長(zhǎng)春花堿（nvb）被廣泛使用。本文就此類藥物近幾年的文獻(xiàn)進(jìn)行了復(fù)習(xí)。一、vanvb誘導(dǎo)的微管解聚作用長(zhǎng)春堿類藥物的結(jié)構(gòu)相似,由碳-碳橋連結(jié)的二個(gè)復(fù)雜的多環(huán)系統(tǒng)構(gòu)成。多年的研究表明這類藥物的細(xì)胞毒性通過(guò)與微管蛋白的結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn),它們?cè)谖⒐艿鞍锥垠w上有共同的結(jié)合位點(diǎn)。由于藥物與微管蛋白二聚體的結(jié)合抑制微管聚合,使分裂的細(xì)胞不能形成紡錘體而使分裂停止于中期。Lobert等應(yīng)用了3種不同的模型再次證實(shí)了這一點(diǎn),幾種VA的衍生物中與微管蛋白結(jié)合力的大小為VCR>VDS>NVB,與臨床上VCR的劑量最低而NVB最高是一致的。為了進(jìn)一步驗(yàn)證此結(jié)果,他們還觀察了VA誘導(dǎo)產(chǎn)生聚合體的松解時(shí)間,VCR最長(zhǎng)而NVB最短,前者的時(shí)間比VDS或NVB誘導(dǎo)聚合體的松解時(shí)間長(zhǎng)20倍以上。新的VA類藥物NVB雖然也可通過(guò)粘合于微管、抑制微管聚合而產(chǎn)生抗腫瘤活性,但NVB的這種作用遠(yuǎn)遜于VCR和VLB,VCR幾乎可使所有微管解聚,而只有高濃度(40μmol/L)的NVB方可誘導(dǎo)大量微管蛋白解聚。從Binet等的研究中可以確定有絲分裂的抗微管活性與抗腫瘤活性有關(guān),而軸突的抗微管活性又與神經(jīng)毒性有關(guān)。與VCR和VLB比較,NVB在遠(yuǎn)低于使軸突解聚所需的濃度下即可導(dǎo)致有絲分裂微管的完全解聚,使其具有更大的治療指數(shù),同時(shí)也證明NVB的劑量限制性毒性是骨髓抑制而非神經(jīng)毒性。近年的體外研究證實(shí),長(zhǎng)春堿類藥物10-8mol/L濃度時(shí)可明顯抑制大鼠MTX乳腺癌細(xì)胞系和T24(HTB4)細(xì)胞系的增殖,Mary等在Hela細(xì)胞系中的研究也證實(shí)了這一點(diǎn)。長(zhǎng)春堿對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用是通過(guò)改變有絲分裂紡錘體兩端微管蛋白的加入和丟失動(dòng)力學(xué)實(shí)現(xiàn)的,而并非使微管解聚。每一種長(zhǎng)春堿的衍生物對(duì)Hela細(xì)胞增殖抑制的濃度與其導(dǎo)致50%的細(xì)胞聚集在中期的濃度基本一致,抑制細(xì)胞增殖并將細(xì)胞阻斷在中期的作用均在VA的最低有效濃度時(shí)出現(xiàn),同時(shí)無(wú)或少見(jiàn)微管的解聚或紡錘體的重組。臨床上,VA各種藥物的抗腫瘤活性和毒性是不相同的,且其抗腫瘤活性與其抑制微管聚集的能力并不是正相關(guān),因而或許存在其它新的機(jī)制。VA各衍生物的抗增殖活性各不相同,可能與其不同的抗腫瘤活性相關(guān)。二、持續(xù)靜脈滴注藥物的安全性靜脈注射VA的藥代動(dòng)力學(xué)通常為開(kāi)放的三室模型(表1),其特點(diǎn)為:①表觀分布容積大;②全身清除率高;③終末相T1/2長(zhǎng);④分子內(nèi)、個(gè)體內(nèi)及個(gè)體間的差異大。VCR、VLB、VDS、NVB代謝的初始相和中間相的T1/2基本相似,但終末相T1/2有顯著差異(分別為85小時(shí)、24小時(shí)、24小時(shí)、40小時(shí))。VCR的T1/2最長(zhǎng)、全身清除慢也可解釋其最大耐受劑量低于其它幾種藥物的現(xiàn)象。持續(xù)靜脈滴注的方法是基于VA是細(xì)胞周期特異性藥物、治療窗口窄的特點(diǎn)設(shè)計(jì)的。靜脈注射雖然初始濃度高,但此高濃度僅能維持?jǐn)?shù)秒且?guī)?lái)很大的毒性。持續(xù)靜脈滴注既可避免高濃度帶來(lái)的毒性又可延長(zhǎng)有效濃度藥物在血中的停留時(shí)間。研究顯示,血液系統(tǒng)腫瘤、乳腺癌或頭頸部腫瘤在靜脈注射VDS或VLB治療失敗后再持續(xù)靜脈滴注該藥仍可有較高的緩解率,持續(xù)靜脈滴注后VCR、VDS、VLB的清除率下降。由于NVB的分布容積大,與微管的作用強(qiáng),人們推測(cè)持續(xù)低濃度的NVB可能會(huì)提高療效?？诜﨨VB膠囊的生物利用度為24%,且不受食物的影響。當(dāng)每周重復(fù)使用50～180mg后,服藥1～2小時(shí)內(nèi)即可達(dá)到的峰濃度為0.07～0.8mg/L。口服后的藥代學(xué)特性與靜脈注射的相似。三、治療乳腺癌的nvb盡管VA的化學(xué)結(jié)構(gòu)非常相似,但抗瘤譜、劑量限制性毒性(VCR為神經(jīng)毒性,NVB為骨髓毒性)和最大耐受劑量(NVB的最大耐受劑量明顯高于其它各藥)相差很大。VCR、VLB及VDS已應(yīng)用多年,其特性已為人們所熟悉。NVB是近幾年開(kāi)始應(yīng)用的一個(gè)新的VA類藥物,體外研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)L1210白血病、P388白血病、B16黑色素瘤均有明顯的抗腫瘤活性。其它研究發(fā)現(xiàn)NVB與多種藥物如DDP、VP16、MMC等聯(lián)合應(yīng)用療效增強(qiáng)而毒性不變。由于NVB獨(dú)特的抗腫瘤作用,FDA已于1994年12月批準(zhǔn)將單制劑的NVB與DDP聯(lián)合應(yīng)用作為不可切除的晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者的一線治療藥物,這是20年中第一種被推薦用于NSCLC治療的新藥。關(guān)于這方面的研究在國(guó)內(nèi)外已有很多,本文著重探討NVB的一些新動(dòng)向。近年對(duì)NVB與紫杉醇的聯(lián)合應(yīng)用引起人們的極大興趣。NVB的作用是抑制微管聚合,而紫杉醇的作用則為促進(jìn)其聚合,抑制解聚。Hin等在體外研究了NVB與docetaxel合用對(duì)于PC-9人肺腺癌細(xì)胞系及B16黑色素瘤細(xì)胞系的作用,結(jié)果顯示,先用VA者二藥顯示協(xié)同作用,順序相反則顯示拮抗作用。進(jìn)一步的研究證明先用的VA細(xì)胞毒作用并不被后用的docetaxel作用所削弱。Louboutin等接著進(jìn)行的NVB與docetaxel治療28例晚期乳腺癌的I期臨床研究發(fā)現(xiàn)最常見(jiàn)的不良反應(yīng)是深鍵反射的減弱,占89%(25/28);另外39%(11/28)的患者出現(xiàn)輕度可逆的感覺(jué)異常,但發(fā)熱性的中性白細(xì)胞下降則是劑量限制性毒性。推薦用于Ⅱ期臨床研究的劑量為NVB20mg/m2第1、5天,docetaxel85mg/m2第1天。Weiseberg等進(jìn)行的NVB與Paclitaxel聯(lián)合用藥治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的I期臨床研究發(fā)現(xiàn)主要的劑量限制性毒性為中性白細(xì)胞下降,合用G-CSF后可進(jìn)一步增大劑量。其它不良反應(yīng)還有肌痛、疲乏等,均較輕且可逆?？稍u(píng)價(jià)的10例中2例完全緩解,1例部分緩解。復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的小細(xì)胞肺癌(SCLC)的治療一直是困擾人們的一個(gè)重要問(wèn)題,Furuse等在這方面進(jìn)行了有益的嘗試,24例治療后復(fù)發(fā)的SCLC接受了NVB25mg/m2重復(fù)4次或更多的單藥治療,結(jié)果12.5%(3/24)獲部分緩解,且有效的患者均是既往經(jīng)VA類藥物治療過(guò)的,說(shuō)明NVB對(duì)經(jīng)治復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的SCLC有一定的療效,對(duì)既往經(jīng)VA類藥物治療失敗者仍有較好的療效。Furuse等隨機(jī)研究了NVB與VDS對(duì)204例ⅢB或Ⅳ期初治NSCLC的療效。結(jié)果顯示NVB單藥組的緩解率為31.1%,VDS單藥組的緩解率為8.9%(P=0.0002);前者的中位緩解期為18.5(7.9～107.5)個(gè)月,后者的中位緩解期為11.7(6～35)個(gè)月。毒性方面,二者引起白細(xì)胞下降的作用相當(dāng),NVB組的神經(jīng)毒性略輕。四、新的動(dòng)態(tài)化合物1.對(duì)va耐藥人群的藥代動(dòng)力學(xué)研究S12363(vinfosiltine)是在O4-deacetyl-VLB的C23上添加了一個(gè)α-磷氨。體外研究顯示其細(xì)胞毒性分別為VCR和VLB的72倍和36倍,Alain等進(jìn)行的臨床前研究發(fā)現(xiàn)S12363對(duì)鼠的移植腫瘤P388白血病、L1210白血病、B16黑色素瘤、M5076肉瘤及結(jié)腸腺癌38均有顯著的抗腫瘤作用,但對(duì)Lewis肺癌無(wú)效。對(duì)人HT-29結(jié)腸癌、NCI-H460肺癌、HCI-H125肺癌等移植腫瘤均有明顯抑制作用。在體內(nèi)研究中對(duì)VA耐藥的P388白血病亦有效。I期藥代動(dòng)力學(xué)研究顯示靜脈用藥后成三相分布,終末相半衰期為49±16小時(shí),血漿清除率為每公斤0.14±0.4L/h,穩(wěn)態(tài)分布容積為5.0±2.8L/kg。在體內(nèi),其藥代與劑量在0.08～0.84mg/m2范圍內(nèi)成線性相關(guān),劑量限制性毒性為血液學(xué)毒性。Ⅱ期臨床研究在晚期乳腺癌中進(jìn)行,用法為0.3mg/m2,每周1次或0.6mg/m2每2周1次,結(jié)果不論是作為一線治療還是作為二線用藥均無(wú)效,神經(jīng)毒性為主要毒性。2.k-ras-nrk細(xì)胞Conophylline是從小葉狗牙花中提取出來(lái)的新的VA衍生物。在體外可使K-ras-NRK和K-ras-NIH細(xì)胞系出現(xiàn)正常