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組織學與胚胎學的學習同學們好!9/13/20231醫(yī)學課件歡迎同學們參加
組織學與胚胎學的學習同學們好!8/1/202
緒論histologyandembryology河北醫(yī)大組胚教研室:李陳莉9/13/20232醫(yī)學課件緒論histologyandembry一、組織學的研究內(nèi)容組織學(Histology)定義:是研究正常機體的細微結(jié)構(gòu)及與其機能的關(guān)系的學科,包括細胞、組織和器官系統(tǒng)3部分。9/13/20233醫(yī)學課件一、組織學的研究內(nèi)容組織學(Histology)8/1/20研究內(nèi)容:包括細胞、組織、器官系統(tǒng)細胞是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本單位,是一切生物體新陳代謝、生長發(fā)育、繁殖分化的形態(tài)學基礎(chǔ)。特點:形態(tài)各異、大小不等:人體具有許多形態(tài)各異、大小不同的細胞,參與機體的各種機能活動。各種細胞在機體內(nèi)相互調(diào)節(jié)、相互協(xié)同,以維持級機體的生命活動。9/13/20234醫(yī)學課件研究內(nèi)容:包括細胞、組織、器官系統(tǒng)細胞是人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本單組織(tissue)組成:由一些形態(tài)相似、功能相近的細胞
和細胞外基質(zhì)所組成。分類:上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織。9/13/20235醫(yī)學課件組織(tissue)組成:由一些形態(tài)相似、功能相近的細胞基本組織—上皮組織—結(jié)締組織—肌組織—神經(jīng)組織9/13/20236醫(yī)學課件基本組織—上皮組織—結(jié)締組織—肌組織—神經(jīng)組織8/1/202器官和系統(tǒng)(organandsystem)器官:由4大基本組織有機地組合形成器官。系統(tǒng):多個器官協(xié)調(diào)配合完成一定的生理功能形成系統(tǒng)。如:口腔、食道、胃、腸均由不同的組織發(fā)育、分化和結(jié)合而成,具有不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點,但卻執(zhí)行著共同的功能-消化食物、吸收營養(yǎng)、排出糟粕。9/13/20237醫(yī)學課件器官和系統(tǒng)(organandsystem)器官:由4大基
胚胎學(embryology)定義:是研究人體發(fā)生和生長規(guī)律的學科。研究內(nèi)容:包括生殖細胞發(fā)生、受精、胚胎發(fā)育、胚胎與母體關(guān)系、先天性畸形等。9/13/20238醫(yī)學課件胚胎學(embryology)定義:是研究人體發(fā)生和生長規(guī)在醫(yī)學中的地位組織學與胚胎學是一門醫(yī)學基礎(chǔ)學科,與基礎(chǔ)各個學科和臨床各科都有一定聯(lián)系。尤其與解剖學、病理學、生理學、生物化學、免疫學均有密切的聯(lián)系。胚胎學為婦產(chǎn)科學、男性學、生殖工程學、兒科學等臨床學科提供必要的基礎(chǔ)知識,也是計劃生育與優(yōu)生學賴以發(fā)展的學科之一。9/13/20239醫(yī)學課件在醫(yī)學中的地位組織學與胚胎學是一門醫(yī)學基礎(chǔ)學科,與基礎(chǔ)各個學二、組織學與胚胎學的研究方法(一)常用顯微鏡光學顯微鏡(lightmicroscope,LM):光源為普通光線熒光顯微鏡(fluorescencemicroscope)光源為紫外光或藍紫光激光共聚焦掃描顯微鏡(confocalscanningmicroscope)光源為激光電子顯微鏡(electronmicroscope,EM):光源為電子束,電磁場作為透鏡。電子顯微鏡透射電子顯微鏡TEM掃描電子顯微鏡SEM9/13/202310醫(yī)學課件二、組織學與胚胎學的研究方法(一)常用顯微鏡8/1/2023光學顯微鏡基本結(jié)構(gòu):1.照明燈(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.載物臺和切片夾(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推進器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物鏡(Objectives)6.粗細螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目鏡(Oculars)8.照相機等接口(Connectiontocamera,etc.)9/13/202311醫(yī)學課件光學顯微鏡基本結(jié)構(gòu):8/1/202311醫(yī)學課件
是一種高光敏度、高分辯率的新型生物學儀器。主要由激光光源、共聚焦成像掃描系統(tǒng)、光學系統(tǒng)和微機圖像分析系統(tǒng)四部分組成。可以檢測、識別組織或細胞內(nèi)微細結(jié)構(gòu)及其變化,細胞的受體移動,膜電位變化,酶活性以及物質(zhì)轉(zhuǎn)運,并以激光對細胞及染色體進行切割、分離、篩選等。(二)激光共焦掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscope)9/13/202312醫(yī)學課件 是一種高光敏度、高分辯率的新型生物學儀器。主要由激光光激光共聚焦掃描顯微鏡9/13/202313醫(yī)學課件激光共聚焦掃描顯微鏡8/1/202313醫(yī)學課件透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope)
TEM9/13/202314醫(yī)學課件透射電子顯微鏡(transmissionelectron透射電鏡照片9/13/202315醫(yī)學課件透射電鏡照片8/1/202315醫(yī)學課件掃描電子顯微鏡(scanningelectronmicroscope)SEM9/13/202316醫(yī)學課件掃描電子顯微鏡(scanningelectronmicr9/13/202317醫(yī)學課件8/1/202317醫(yī)學課件9/13/202318醫(yī)學課件8/1/202318醫(yī)學課件普通組織標本制備技術(shù)(石蠟切片)標本的制作組織學的標本制作比較復雜,基本包括以下幾個步驟:取材、固定、脫水、包埋、切片、染色等。(二)常用標本的制備技術(shù)9/13/202319醫(yī)學課件普通組織標本制備技術(shù)(石蠟切片)(二)常用標本的制備技術(shù)8/取材、固定:為了盡可能使所獲材料的形態(tài)結(jié)構(gòu)接近活體狀態(tài),故取材要迅速、準確,得到材料后應及時用固定液固定(fixation)。常用固定液為甲醛、乙醇等,它們可以使蛋白質(zhì)迅速凝固,防止其分解和變性。脫水、包埋、切片:為使組織與包埋劑相融合,所獲得材料需經(jīng)乙醇或丙酮脫水;為便于將材料切成薄片,需將其包埋在石蠟或火棉膠內(nèi),然后再用切片機將其切成厚約5~10μm的薄片。9/13/202320醫(yī)學課件取材、固定:8/1/202320醫(yī)學課件9/13/202321醫(yī)學課件8/1/202321醫(yī)學課件染色:切片需經(jīng)染色后方可在顯微鏡下觀察。染色與封片:染色的目的是使組織內(nèi)不同的結(jié)構(gòu)染上不同的顏色,以增加結(jié)構(gòu)間的反差。染色后在載玻片上滴加樹膠,蓋上蓋玻片,密封保存。9/13/202322醫(yī)學課件染色:8/1/202322醫(yī)學課件蘇木精、伊紅染色常規(guī)染色-蘇木精(hematoxylin)、伊紅(eosin)染色(簡稱HE染色)技術(shù)蘇木精:是藍色的堿性染料,可將細胞核和細胞內(nèi)的某些酸性物質(zhì)染成藍紫色;伊紅:是紅色的酸性染料,可將細胞質(zhì)染成粉紅色。9/13/202323醫(yī)學課件蘇木精、伊紅染色常規(guī)染色-蘇木精(hematoxylin)、嗜酸性(acidophilia):與酸性染料親和力強的性質(zhì);嗜堿性(basophilia):與堿性染料親和力強的性質(zhì);嗜中性(neutrophilia):對兩種染料親和力都不強。9/13/202324醫(yī)學課件嗜酸性(acidophilia):與酸性染料親和力強的HE染色標本嗜堿性嗜酸性9/13/202325醫(yī)學課件HE染色標本嗜堿性嗜酸性8/1/202325醫(yī)學課件甲苯胺藍染色技術(shù)是藍色的堿性染料。將細胞內(nèi)、外的某些物質(zhì)染成紫紅色,這種染色現(xiàn)象稱異染性(metachromasia)。9/13/202326醫(yī)學課件甲苯胺藍染色技術(shù)8/1/202326醫(yī)學課件肥大細胞的顆粒被甲苯銨藍(一種藍色染料)染成紫紅色9/13/202327醫(yī)學課件肥大細胞的顆粒被甲苯銨藍(一種藍色染料)染成紫紅色8/1/2硝酸銀、氯化金染色技術(shù)
硝酸銀、氯化金顆??筛街诩毎Y(jié)構(gòu)的表面而呈棕黑色或棕黃色,常用于顯示神經(jīng)組織。親銀性(argentaffin):銀染中,有些組織結(jié)構(gòu)可直接使硝酸銀還原而顯色。嗜銀性(argyrophilia):有些組織結(jié)構(gòu)不能直接使硝酸銀還原,必須加入還原劑方能顯色。9/13/202328醫(yī)學課件硝酸銀、氯化金染色技術(shù)硝酸銀、氯化金顆??筛街诩毎Y(jié)構(gòu)銀染標本嗜銀細胞9/13/202329醫(yī)學課件銀染標本嗜銀細胞8/1/202329醫(yī)學課件冷凍切片技術(shù)(frozensectionmethod)目的:避免細胞、組織內(nèi)某些物質(zhì)被固定液所破壞,同時使組織變硬,快速得到切片。方法:將新鮮組織投入液氮(-196℃)或固態(tài)二氧化碳(干冰,-70℃)內(nèi)快速凍結(jié),恒冷箱切片機(cryostat)制成冷凍切片。優(yōu)點:制片迅速,細胞內(nèi)酶活性和脂類保存較好,常用于酶組織化學染色、免疫組織化學染色。缺點:光鏡下質(zhì)量較差。9/13/202330醫(yī)學課件冷凍切片技術(shù)(frozensectionmethod)目冷凍切片箱9/13/202331醫(yī)學課件冷凍切片箱8/1/202331醫(yī)學課件其他技術(shù)涂片:血細胞、分離細胞或脫落細胞等可直接涂在玻片上;鋪片:疏松結(jié)締組織可撕成薄片鋪在玻片上;磨片:牙和骨等堅硬組織可磨成薄片;以上標本再經(jīng)固定染色后顯微鏡下觀察。9/13/202332醫(yī)學課件其他技術(shù)涂片:血細胞、分離細胞或脫落細胞等可直接涂在玻片上;(三)電子顯微鏡技術(shù)根據(jù)分辨率、放大倍數(shù)以及功能等不同可分為兩種:透射電子顯微鏡,又稱透射電鏡或電鏡;掃描電子顯微鏡,又稱掃描電鏡。9/13/202333醫(yī)學課件(三)電子顯微鏡技術(shù)根據(jù)分辨率、放大倍數(shù)以及功能等不同可分為透射電子顯微鏡技術(shù)
光源:電子束。透鏡:電磁透鏡(線圈)。固定液:戍二醛、鋨酸。染色:電子染色,醋酸鈾或檸檬酸鉛等重金屬鹽。切片:50-80nm的超薄切片。原理:電子束通過電磁透鏡打到樣品上,產(chǎn)生透射電子,透射電子打到熒光屏上,產(chǎn)生黑白像。9/13/202334醫(yī)學課件透射電子顯微鏡技術(shù)
光源:電子束。8/1/202334醫(yī)學課掃描電子顯微鏡技術(shù)
掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察的組織表面形貌,不需制成切片。固定后的標本,在其表面噴鍍金,在熒光屏上即可顯示細胞或組織表面的立體結(jié)構(gòu),如細胞表面的突起、微絨毛、纖毛等。9/13/202335醫(yī)學課件掃描電子顯微鏡技術(shù)
掃描電子顯微鏡技術(shù)要觀察的組織表面形貌,(三)組織化學與細胞化學(histochemistrycytochemistry)是利用化學試劑與組織細胞內(nèi)的某些物質(zhì)呈現(xiàn)化學反應,反應終產(chǎn)物在組織原位形成有色沉淀物或重金屬鹽沉淀,通過顯微鏡進行觀察。間接觀察組織細胞內(nèi)的化學成分進行定位、定性和定量研究。例如過碘酸希夫反應,簡稱為PAS反應(periodacidSchiffreaction)該方法是顯示細胞內(nèi)糖原或多糖的一種方法。如用PAS反應顯示肝細胞內(nèi)的糖原。9/13/202336醫(yī)學課件(三)組織化學與細胞化學(histochemistrycy9/13/202337醫(yī)學課件8/1/202337醫(yī)學課件(四)免疫組織化學或免疫細胞化學(immunohistochemistry/cytochemistry)利用抗原、抗體特異性結(jié)合的原理,檢測組織和細胞內(nèi)多肽和蛋白質(zhì)的分布。該方法先將蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,注入某種動物體內(nèi),使其體內(nèi)產(chǎn)生與所注入抗原相應的抗體;而后自其血清中提取該抗體,并以熒光染料或鐵蛋白或辣根過氧化物酶等標記;顯色的地方就是抗原所在。優(yōu)點:特異性強、靈敏度高。9/13/202338醫(yī)學課件(四)免疫組織化學或免疫細胞化學(immunohistoch9/13/202339醫(yī)學課件8/1/202339醫(yī)學課件(五)原位雜交技術(shù)即核酸(DNA、RNA)的分子雜交組織化學技術(shù),是在轉(zhuǎn)錄水平檢測基因的活性(mRNA)和基因(DNA片斷)的有無。原理:
用帶有標記物的已知堿基順序的核酸探針,與細胞內(nèi)待測的核酸按堿基配對的原則,進行特異性原位結(jié)合,通過對標記物的顯示和檢測而獲得待測核酸的有無及相對含量。9/13
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