種子活力測定-生理生化測定方法

種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)電導率測定程序一、預備試驗

1、校正電極

電導儀開始使用之前應對電極進行校正?！秶H種子檢驗規(guī)程》的豌豆種子浸出液電導率測定規(guī)定電導儀精密度至少達到0.1μScm-1

g-1。2、檢查對照種子批的電導率

對于豌豆種子的電導率測定，對照種子批的電導率應是25~29μScm-1g-1。一、預備試驗3、檢查儀器清潔度

隨機從使用的每10個燒杯中選取2個，加入已知電導率的250ml去離子水或蒸餾水，在20℃下測定并記錄電導率。4、檢查溫度

發(fā)芽箱、培養(yǎng)箱的溫度控制在（20±1）℃。二、測定每一種子批的程序1、檢查種子水分

對于水分低于10%或高于14％的種子批，應在浸種前將其水分調(diào)至10％~14％。二、測定每一種子批的程序2、準備燒杯準確量取

250ml去離子水或燕餾水，放人500ml的燒杯中。每種子批測定4個燒杯。含水的所有燒杯應用鋁箔或薄膜蓋子蓋好，以防止污染。在盛放種子前，先在

20℃下平衡24h

。為了控制水的質(zhì)量，每次測定準備兩個只含去離子水或蒸餾水的對照杯。二、測定每一種子批的程序

3、準備試樣和浸種

（1）隨機數(shù)取每個各為50粒的四個次級樣品，稱重至0.0lg。（2）試樣分別放入已盛有250ml去離子水的500ml的燒杯中，輕輕搖晃，確保所有種子完全浸沒。（3）所有燒杯均用鋁箔或薄膜蓋好，在（20±1）℃放置24h。

在同一時間內(nèi)測定的燒杯數(shù)量不能超過10~12個，一批測定一般不超過15min

。二、測定每一種子批的程序

4、準備電導儀

試驗前先啟動電導儀至少

15min。每次測定同時用去離子水或蒸餾水填滿容器杯400~600ml沖洗電極，沖洗水（去離子水）電導率不應超過2uScm-1或燕餾水不超過5uScm-1。二、測定每一種子批的程序

5、測定溶液電導率

浸種結(jié)束后，應馬上測定溶液的電導率。

輕微搖晃盛有種子的燒杯10~15s，把電極插入溶液（注意不要把電極放在種子上）。

測定一個重復后，用去離子水或蒸餾水沖洗電極兩次，用濾紙吸干，再測定下一個重復。

如果在測定期間觀察到硬實，測定電導率后應將其除去，記數(shù)，干燥表面，稱量，并從50粒種子樣品重量中減去其重量。二、測定每一種子批的程序

6、測定試驗用水的電導率

在（20±1）℃測定對照杯的去離子水或燕餾水的電導率。每一重復的電導率等于種子浸出液的電導率扣除試驗用水的電導率。二、測定每一種子批的程序7、結(jié)果計算與表示

四次重復間平均值為種子批的結(jié)果。四次重復間容許差距為

5μScm-1g-1（最低和最高的差），如超過，應重做四次重復。二、測定每一種子批的程序8、結(jié)果填報用電導率測定方法測定種子活力的結(jié)果填報下列結(jié)果：（1）用μScm-1g-1表示，修約至一位小數(shù)。（2）試驗前的種子水分

試驗前對種子水分進行了調(diào)節(jié)，則應填報調(diào)節(jié)前和調(diào)節(jié)后的水分。（3）填報測定相關信息，如浸泡時間和溫度。二、測定每一種子批的程序結(jié)果說明解釋根據(jù)電導率測定結(jié)果對種子批進行活力排列。英國已在豌豆上應用多年，經(jīng)驗如下。種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)電導率測定原理、儀器和用具一、適用范圍

《國際種子檢驗規(guī)程》所規(guī)范的電導率測定適用于豌豆種子。ISTA活力手冊指出該法也適用于許多其他種，如大粒豆科種子（特別是大豆、綠豆等）、棉花、玉米、番茄等種子。一、適用范圍

AOSA和ISTA活力測定委員會認為：菜豆和豌豆的電導率測定結(jié)果具有重演性，與田間出苗率有較大的相關性，該測定已被種子產(chǎn)業(yè)用來評定菜豆種子出售前的出苗率。二、原理高活力種子細胞膜完整性好，浸入水中后滲出的可溶性物質(zhì)或電解質(zhì)少，浸泡液的電導率低。電導率與田間出苗率成顯著的負相關，借此可用電導率的高低判別種子活力的高低。低活力種子批的滲漏會造成二次感染，種子滲漏的營養(yǎng)液加速土壤微生物活動和二次感染。種子中滲出的碳水化合物的數(shù)量也與細菌生長呈正相關。三、儀器和用具1、電導儀

可用直流電或交流電直接讀數(shù)的電導儀，電極常數(shù)必須達到1.0。三、儀器和用具

2、水

最好使用去離子水，也可使用蒸餾水。凡使用的水必須進行電導率測定。在20℃下，去離子水電導率不超過2μScm-1

；蒸餾水電導率不超過5μScm-1

。使用前水應保持在(20±1)℃。三、儀器和用具3、燒杯為了保證有適宜的水浸沒種子和電極，燒杯和容器的容量為500ml，基部寬80mm±5mm。容器使用前必須沖洗干凈并用去離子水或蒸餾水沖洗兩次。三、儀器和用具4、發(fā)芽箱、培養(yǎng)箱或發(fā)芽室三、儀器和用具5、烘箱

滿足溫度達到130℃或103℃。三、儀器和用具6、天平

感量達到0.01g。7、鋁盒

供種子水分測定用。種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)伸長胚根計數(shù)測定一、適用范圍適用于普通玉米種子的田間出苗測定。列入ISTA種子檢驗規(guī)程。二、原理發(fā)芽初期玉米種子的胚根伸長數(shù)量能準確反映出其發(fā)芽速率，并與發(fā)芽速率的其它指標密切相關。伸長胚根的種子數(shù)量多，則表明種子發(fā)芽速率快、活力高；反之，則表明種子活力低。三、試驗溫度（20±1）℃或（13±1）℃溫度是伸長胚根計數(shù)試驗中最關鍵的潛在變異因素。監(jiān)控培養(yǎng)箱中紙巾卷的放置范圍，每24h監(jiān)測一次溫度并翻轉(zhuǎn)紙巾卷。四、計數(shù)時間胚根伸長計數(shù)時間取決于試驗溫度。例如，在20℃下，培養(yǎng)66h±15min后計數(shù)；在13℃下，培養(yǎng)（144±1）h后計數(shù)。五、方法設8個重復，每一重復25粒種子，用紙巾卷進行正常發(fā)芽試驗。每重復的種子擺成兩排，一排12粒，另一排13粒，種子的胚根部位朝向紙巾底部。將紙巾卷好垂直向上置于塑料袋中，在規(guī)定溫度下培養(yǎng)。五、方法六、判斷標準出現(xiàn)清晰和明顯的伸長胚根作為評定依據(jù)，肉眼判定長度達到2mm以上的種子為有活力種子，并進行計數(shù)。七、結(jié)果計算與表示

按照GB/T3543.4的方法，合并4個重復25粒種子為一個100粒的重復。

如果兩個100粒的重復間的胚根計數(shù)百分率的差異超過表1中的容許差距，應重新試驗。如果重新試驗結(jié)果