潔凈區(qū)環(huán)境控制及微生物知識(shí)培訓(xùn)課件

潔凈區(qū)環(huán)境控制及微生物

知識(shí)培訓(xùn)

zwx

2013.10潔凈區(qū)環(huán)境控制及微生物

知識(shí)培訓(xùn)

zwx

2013.制藥生產(chǎn)潔凈控制主要:（一）人員控制系統(tǒng)（二）公用工程控制系統(tǒng)（三）設(shè)備控制系統(tǒng)（四）物料控制系統(tǒng)（五）生產(chǎn)過(guò)程控制系統(tǒng)（六）質(zhì)量檢測(cè)控制系統(tǒng)制藥生產(chǎn)潔凈控制相關(guān)術(shù)語(yǔ)潔凈室(區(qū))：需要對(duì)塵粒及微生物含量進(jìn)行控制的房間(區(qū)域)。懸浮粒子：潔凈室內(nèi)懸浮在空氣約在0.1μm至5μm之間的固體和液體粒子，用于空氣潔凈度分級(jí)。潔凈度：按單位容積空氣中某種粒子的數(shù)量來(lái)區(qū)分的潔凈程度。相關(guān)術(shù)語(yǔ)潔凈室(區(qū))：需要對(duì)塵粒及微生物含量進(jìn)行控制的房間(相關(guān)術(shù)語(yǔ)空氣凈化：去除空氣中的污染物質(zhì)，使空氣潔凈的行為.靜態(tài)測(cè)試：指潔凈廠房（區(qū)）的凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)，生產(chǎn)工藝設(shè)備已安裝，沒(méi)有生產(chǎn)活動(dòng)且除了測(cè)試人員（不得超過(guò)2人）無(wú)操作人員在場(chǎng)的狀態(tài)，測(cè)試記錄和報(bào)告中應(yīng)注明所測(cè)試的狀態(tài)。動(dòng)態(tài)測(cè)試：指潔凈室已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)下進(jìn)行的測(cè)試。相關(guān)術(shù)語(yǔ)常見(jiàn)微生物的存在環(huán)境G+球菌：人G+芽胞桿菌：不正確的清潔、空氣G-桿菌：水、不良衛(wèi)生、耐藥菌株酵母菌：食物、不良衛(wèi)生、空氣霉菌；木料、食物常見(jiàn)微生物的存在環(huán)境G+球菌：人細(xì)菌的形態(tài)●球菌φ一般在1.0um（如四鏈球菌、八聯(lián)球菌、葡萄球菌）；

●桿菌長(zhǎng)1~3um、寬0.3~0.5um（大腸桿菌、芽孢桿菌）；●病毒個(gè)體最小，多數(shù)0.1um左右。●內(nèi)毒素：革蘭氏陰性菌死亡解體后，才顯示出一系列的內(nèi)毒素生物活性（耐熱、可過(guò)濾、易吸附等）細(xì)菌的形態(tài)●球菌φ一般在1.0um（如四鏈球菌、八聯(lián)球菌、粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征

沙門(mén)氏菌的菌落特征

銅綠假單孢菌的菌落特征

紅酵母的菌落粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征沙門(mén)氏菌的菌落特征銅綠假單潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法塵埃粒子數(shù)微生物數(shù)靜壓差溫、濕度風(fēng)量照度噪聲潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法塵埃粒子數(shù)潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法靜態(tài)測(cè)試：指潔凈廠房（區(qū)）的凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)，生產(chǎn)工藝設(shè)備已安裝，沒(méi)有生產(chǎn)活動(dòng)且除了測(cè)試人員（不得超過(guò)2人）無(wú)操作人員在場(chǎng)的狀態(tài)，測(cè)試記錄和報(bào)告中應(yīng)注明所測(cè)試的狀態(tài)。動(dòng)態(tài)測(cè)試：指潔凈廠房（區(qū)）的凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)，生產(chǎn)設(shè)備按預(yù)約的工藝模式運(yùn)行并有規(guī)定數(shù)量的操作人員在現(xiàn)場(chǎng)操作的狀態(tài)。

潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法靜態(tài)測(cè)試：確定關(guān)鍵點(diǎn)靠近產(chǎn)品的地方；與產(chǎn)品接觸的表面；與產(chǎn)品接觸的物品周?chē)谋砻?；氣流流型；活?dòng)頻繁的地方；確定關(guān)鍵點(diǎn)靠近產(chǎn)品的地方；潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法測(cè)試狀態(tài)：對(duì)于單向流，測(cè)試空氣凈化系統(tǒng)至少運(yùn)行10分鐘后進(jìn)行。對(duì)于非單向流系統(tǒng)，至少運(yùn)行30分鐘后進(jìn)行潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法測(cè)試狀態(tài)：潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法塵埃粒子數(shù)測(cè)定：每次生產(chǎn)前及一定的生產(chǎn)周期后須對(duì)清潔后的潔凈室進(jìn)行塵埃粒子數(shù)的檢測(cè)，以評(píng)價(jià)和掌握潔凈室塵埃粒子的含量。監(jiān)測(cè)與產(chǎn)品接觸的壓縮空氣和其他氣體如氮?dú)獾?潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)及方法塵埃粒子數(shù)測(cè)定：潔凈區(qū)塵埃粒子數(shù)標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別測(cè)試狀態(tài)≥0.5μm粒子數(shù)測(cè)試狀態(tài)標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限A級(jí)靜態(tài)352035202800000動(dòng)態(tài)352035202800000B級(jí)靜態(tài)352035202800000動(dòng)態(tài)352000352000280000200020001600C級(jí)靜態(tài)352000352000280000200020001600動(dòng)態(tài)352000035200002800000200002000016000D級(jí)靜態(tài)、動(dòng)態(tài)352000035200002800000200002000016000潔凈區(qū)塵埃粒子數(shù)標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別測(cè)試狀態(tài)≥0.5μm粒子數(shù)測(cè)試狀塵埃粒子監(jiān)測(cè)周期及采樣量潔凈度級(jí)別采樣量，L/次采樣周期取采樣次數(shù)A級(jí)5.661次/周每點(diǎn)取3次B級(jí)5.661次/周C級(jí)2.831次/周每點(diǎn)取3次D級(jí)2.831次/月每點(diǎn)取3次塵埃粒子監(jiān)測(cè)周期及采樣量潔凈度級(jí)別采樣量，L/次采樣周期取潔凈區(qū)微生物監(jiān)測(cè)方法微生物測(cè)定：有兩種方法，沉降菌測(cè)定和浮游菌測(cè)定。沉降菌測(cè)定：采用沉降法，即通過(guò)自然沉降的原理收集在空氣中的生物性粒子于培養(yǎng)基平皿上，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來(lái)判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度等級(jí)。潔凈區(qū)微生物監(jiān)測(cè)方法微生物測(cè)定：有兩種方法，沉降菌測(cè)定和浮游潔凈區(qū)微生物監(jiān)測(cè)方法空氣微生物監(jiān)測(cè)---浮游菌和沉降菌孰優(yōu)孰劣？

沉降菌測(cè)試屬于被動(dòng)式取樣法，對(duì)空氣環(huán)境破壞小放置時(shí)間長(zhǎng)，可以做時(shí)間段的環(huán)境監(jiān)控取樣方法并不能給出定量的數(shù)據(jù)

空氣浮游菌測(cè)試主動(dòng)式采樣法，定量且對(duì)微生物無(wú)選擇性時(shí)間“點(diǎn)”的采樣潔凈區(qū)微生物監(jiān)測(cè)方法空氣微生物監(jiān)測(cè)---浮游菌和沉降菌孰優(yōu)孰沉降菌的監(jiān)測(cè)方法步驟：在皿底標(biāo)記取樣點(diǎn)號(hào)、取樣日期、時(shí)間，在取樣點(diǎn)打開(kāi)皿蓋，皿底放在平面上，將皿蓋斜靠在皿底邊緣，保證皿蓋不掉下來(lái)且盡可能少的覆蓋培養(yǎng)基表面。測(cè)試結(jié)束后，小心蓋上培養(yǎng)皿，傳出潔凈區(qū)。30-35℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天。沉降菌的監(jiān)測(cè)方法步驟：在皿底標(biāo)記取樣點(diǎn)號(hào)、取樣日期、時(shí)間，在沉降菌的監(jiān)測(cè)方法沉降菌監(jiān)測(cè)的注意點(diǎn)：

擺放位置和高度（抑制物質(zhì)的引入）采樣本身引入的污染（外表清潔，培養(yǎng)基質(zhì)量，擺放位置和人員）培養(yǎng)基的脫水問(wèn)題（新鮮培養(yǎng)基和擺放時(shí)間）沉降菌的監(jiān)測(cè)方法沉降菌監(jiān)測(cè)的注意點(diǎn)：沉降菌（CFU）標(biāo)準(zhǔn)潔凈度測(cè)試狀態(tài)CFU/皿.0.5h測(cè)試狀態(tài)CFU/皿.4h合格標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限合格標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限A級(jí)靜態(tài)≤1﹤1/動(dòng)態(tài)﹤1﹤1/B級(jí)≤1﹤1/553C級(jí)332505030D級(jí)1010810010080沉降菌（CFU）標(biāo)準(zhǔn)潔凈度測(cè)試CFU/皿.0.5h測(cè)試CFU浮游菌的監(jiān)測(cè)方法步驟：

檢測(cè)設(shè)備：浮游菌采樣器。采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門(mén)的培養(yǎng)基中，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判斷潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度等級(jí)。浮游菌的監(jiān)測(cè)方法步驟：浮游菌的監(jiān)測(cè)方法監(jiān)測(cè)方法空氣浮游菌取樣器采樣的位置和高度培養(yǎng)基的脫水問(wèn)題采樣操作對(duì)于生產(chǎn)環(huán)境的污染顆粒捕獲率的變化Feller校驗(yàn)的重要性浮游菌的監(jiān)測(cè)方法監(jiān)測(cè)方法浮游菌的監(jiān)測(cè)方法步驟:（同沉降菌)30-35℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天。浮游菌的監(jiān)測(cè)方法浮游菌標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別測(cè)試狀態(tài)浮游菌CFU/m3測(cè)試狀態(tài)浮游菌CFU/m3合格標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限采樣體積合格標(biāo)準(zhǔn)糾偏限警戒限采樣體積A級(jí)靜態(tài)﹤1﹤1/600L動(dòng)態(tài)﹤1﹤1/1000LB級(jí)552600L101051000LC級(jí)808060400L10010080500LD級(jí)10010080100L200200160100L浮游菌標(biāo)準(zhǔn)浮游菌CFU/m3浮游菌CFU/m3合格標(biāo)準(zhǔn)糾偏限潔凈室環(huán)境控制當(dāng)空氣潔凈度要求為C級(jí)、D級(jí)時(shí)，采用非單向流，換氣次數(shù)分別大于25次/小時(shí)和15次/小時(shí).潔凈室環(huán)境控制當(dāng)空氣潔凈度要求為C級(jí)、D級(jí)時(shí)，采用非單向流，監(jiān)測(cè)表面的微生物擦拭法：如棉簽法、擦拭面積25cm2接觸平皿法監(jiān)測(cè)表面的微生物擦拭法：如棉簽法、擦拭面積25cm2監(jiān)測(cè)方法表面微生物監(jiān)測(cè)和人員衛(wèi)生監(jiān)測(cè)接觸碟取樣適用于平整的規(guī)則性表面取樣方法屬于定量檢測(cè)方法棉簽取樣適用于不規(guī)則表面取樣方法屬于定量檢測(cè)方法監(jiān)測(cè)表面的微生物監(jiān)測(cè)方法監(jiān)測(cè)表面的微生物潔凈區(qū)表面微生物標(biāo)準(zhǔn)潔凈級(jí)別設(shè)備、墻壁表面菌落數(shù)（CFU/皿）人員衛(wèi)生（CFU/皿）潔凈服與用具菌落數(shù)（CFU/皿）糾偏限警戒限糾偏限警戒限糾偏限警戒限A級(jí)1＜11＜11＜1B級(jí)113131C級(jí)533131D級(jí)108----潔凈區(qū)表面微生物標(biāo)準(zhǔn)潔凈設(shè)備、墻壁表面菌落數(shù)人員衛(wèi)生（CFU潔凈室環(huán)境控制壓差的控制：潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同級(jí)別潔凈區(qū)之間的壓差應(yīng)當(dāng)不低于10帕斯卡。必要時(shí)，相同潔凈度級(jí)別的不同功能區(qū)域（操作間）之間也應(yīng)保持適當(dāng)?shù)膲翰钐荻取貪穸鹊目刂疲簾o(wú)特殊要求時(shí)，生產(chǎn)中潔凈室內(nèi)溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在18～26℃、相對(duì)濕度控制在45%～65%。潔凈室環(huán)境控制壓差的控制：潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同級(jí)別潔凈潔凈室環(huán)境控制壓差測(cè)定：在不同級(jí)別相鄰的兩個(gè)房間安裝壓差表，每天進(jìn)行記錄溫濕度測(cè)定：在潔凈間內(nèi)放置溫濕度計(jì)，每天進(jìn)行記錄。風(fēng)量的測(cè)試：采用風(fēng)速儀對(duì)送風(fēng)口的風(fēng)速進(jìn)行測(cè)試，通過(guò)風(fēng)速和送風(fēng)口的截面積計(jì)算出風(fēng)量。通過(guò)風(fēng)量就可以換算出房間的換氣次數(shù)。另外潔凈室環(huán)境評(píng)價(jià)指標(biāo)還包括照度、噪聲的測(cè)試。潔凈室環(huán)境控制壓差測(cè)定：在不同級(jí)別相鄰的兩個(gè)房間安裝壓差表，潔凈室環(huán)境控制微生物的控制：

由于細(xì)菌依附在懸浮粒子上，微粒被過(guò)濾的同時(shí)，細(xì)菌也能被很好的濾掉。

1、空氣凈化系統(tǒng)良好的運(yùn)轉(zhuǎn)，控制潔凈室環(huán)境中的微生物。2、采取有效的環(huán)境消毒措施。潔凈室環(huán)境控制微生物的控制：潔凈環(huán)境的控制空氣過(guò)濾：潔凈度的控制靠良好的空氣凈化設(shè)施，一般采用三級(jí)過(guò)濾。初效過(guò)濾器用于新風(fēng)過(guò)濾中效過(guò)濾器用于高效過(guò)濾器之前高效過(guò)濾器主要對(duì)象是﹤

1.0μm的塵埃對(duì)細(xì)菌的穿透率為0.0001%，對(duì)病毒的穿透率為0.0036%，所以，通過(guò)高效過(guò)濾器的空氣可視為無(wú)菌。潔凈環(huán)境的控制空氣過(guò)濾：潔凈度的控制靠良好的空氣凈化設(shè)施，一潔凈室環(huán)境控制日常消毒：

每天生產(chǎn)結(jié)束后，用75%乙醇或1.5‰新潔爾滅溶液等消毒劑擦拭設(shè)備、桌面、門(mén)窗、墻壁等。消毒劑及更換周期：

石炭酸、75％乙醇和新潔爾滅（0.15％）。75％乙醇和新潔爾滅（0.15％），每1個(gè)月交替更換使用。潔凈室環(huán)境控制日常消毒：潔凈區(qū)環(huán)境控制與評(píng)價(jià)原則制定和實(shí)施系統(tǒng)的環(huán)境監(jiān)測(cè)方案?監(jiān)控項(xiàng)目?取樣位置和計(jì)劃?現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)方法和結(jié)果記錄?微生物鑒別?偏差調(diào)查與糾偏措施?人員培訓(xùn)潔凈區(qū)環(huán)境控制與評(píng)價(jià)原則制定和實(shí)施系統(tǒng)的環(huán)境監(jiān)測(cè)方案潔凈環(huán)境的控制減少潔凈區(qū)操作人員對(duì)環(huán)境的影響：在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，人是最大的污染源，人的因素對(duì)保證產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要重要。因此控制潔凈區(qū)人員的多少、操作動(dòng)作的幅度、工作服的式樣、質(zhì)地及穿戴等對(duì)微粒和細(xì)菌的含量都有明顯的影響。潔凈環(huán)境的控制減少潔凈區(qū)操作人員對(duì)環(huán)境的影響：潔凈環(huán)境的控制維護(hù)好潔凈區(qū)的環(huán)境，是我們進(jìn)入潔凈區(qū)每個(gè)人員必須要堅(jiān)持的，要嚴(yán)格控制潔凈工作服的穿戴、清洗和滅菌周期；嚴(yán)格控制操作人員數(shù)量、約束人員的行為，保證潔凈區(qū)的凈化級(jí)別。養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣。不光是環(huán)境衛(wèi)生還包括個(gè)人衛(wèi)生和工藝衛(wèi)生。潔凈環(huán)境的控制維護(hù)好潔凈區(qū)的環(huán)境，是我們進(jìn)入潔凈區(qū)每個(gè)人員必進(jìn)入潔凈區(qū)人員要求新進(jìn)人員在崗人員患病健康檢查上崗離崗治療或限定工作崗位每年一次合格潔凈區(qū)內(nèi)個(gè)人衛(wèi)生管理規(guī)程包裝區(qū)內(nèi)個(gè)人衛(wèi)生管理規(guī)程工作服清洗消毒管理規(guī)程所有健康檢查患病及治療史均存入健康檔案上崗前不合格進(jìn)入潔凈區(qū)人員要求新進(jìn)人員在崗人員患病健康檢查上崗潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程

藥品生產(chǎn)車(chē)間、工序、崗位均應(yīng)按生產(chǎn)和空氣潔凈度級(jí)別的要求制定清潔規(guī)程，內(nèi)容包括：清潔方法、清潔程序、清潔的周期、使用的清潔劑或消毒劑、清潔工具的清潔方法和存放地點(diǎn)。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程 藥品生產(chǎn)車(chē)間、工序、崗位均應(yīng)按生產(chǎn)和空氣潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程除符合一般生產(chǎn)區(qū)要求外，還應(yīng)做到每天全面擦試工作場(chǎng)所墻面、頂棚、照明、排風(fēng)口及其他附屬裝置，定期對(duì)室內(nèi)進(jìn)行消毒，按SOP規(guī)定要求對(duì)環(huán)境檢測(cè)塵埃粒子、沉降菌、浮游菌數(shù)，并有相關(guān)記錄。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程除符合一般生產(chǎn)區(qū)要求潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程為有效地防止和避免因設(shè)備功能不正?；蛟O(shè)備容器未經(jīng)清潔、保養(yǎng)而對(duì)藥品生產(chǎn)和質(zhì)量的造成污染，所有設(shè)備應(yīng)建立書(shū)面的設(shè)備維護(hù)和清潔規(guī)程、與藥品直接接觸的設(shè)備表面應(yīng)光滑、平整、易清洗消毒、耐腐蝕，不與藥品發(fā)生化學(xué)變化或吸附藥品。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程為有效地防止和避免因設(shè)備功能不正常或設(shè)備容潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程人是藥品生產(chǎn)的最大污染源之一，進(jìn)出潔凈區(qū)的人員必須嚴(yán)格按工藝要求的凈化程序進(jìn)出。傳染病患者、健康的傳染病病毒攜帶者、體表有傷口者、皮膚病患者及藥物過(guò)敏者不得從事直接接觸藥品的生產(chǎn)操作；有呼吸道感染、腸炎和皮膚病的人員不得進(jìn)入潔凈。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程人是藥品生產(chǎn)的最大污染源之一，進(jìn)出潔凈區(qū)的潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程進(jìn)入潔凈區(qū)的人員不得不得化妝，不得涂抹手及腳指甲油，不得接種假睫毛，頭發(fā)不得留過(guò)肩。潔凈區(qū)操作人員不得佩戴飾物、手表，不得將手機(jī)、鑰匙及一切與生產(chǎn)無(wú)關(guān)的物品帶入到潔凈區(qū)。D級(jí)潔凈區(qū)崗位人員不得穿潔凈衣服到一般生產(chǎn)區(qū)。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程進(jìn)入潔凈區(qū)的人員不得不得化妝，不得涂抹手及潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程潔凈區(qū)的人數(shù)應(yīng)按要求控制（標(biāo)示牌），操作和行動(dòng)等要進(jìn)行自我約束。非本崗位人員進(jìn)入潔凈區(qū)（包括維修、輔助人員）應(yīng)定期進(jìn)行衛(wèi)生和微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)、潔凈作業(yè)等方面的培訓(xùn)及考核。非本崗位人員進(jìn)入潔凈區(qū)要嚴(yán)格按規(guī)定程序進(jìn)出、作業(yè)，并有登記記錄。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程潔凈區(qū)的人數(shù)應(yīng)按要求控制（標(biāo)示牌），操作和潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程

工作服應(yīng)制定清洗周期，工作服包括服裝和一切用于包裹頭、臉、手臂等的遮護(hù)用品。不同空氣潔凈度級(jí)別使用的工作服應(yīng)分別清洗、整理，必要時(shí)消毒或滅菌。工作服洗滌、滅菌時(shí)不應(yīng)帶入附加的顆粒物質(zhì)和纖維毛。潔凈工作服的質(zhì)地應(yīng)光滑、不產(chǎn)生靜電、不脫落纖維和顆粒物質(zhì)。無(wú)菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程工作服應(yīng)制定清洗周期，工潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程

D級(jí)潔凈區(qū)工作服每?jī)商烨逑匆淮?；A級(jí)、B級(jí)及C級(jí)潔凈區(qū)工作服每班清洗并滅菌，超過(guò)48小時(shí)后重新滅菌；

A級(jí)、B級(jí)及萬(wàn)級(jí)潔凈區(qū)的工作服只能使用一次，下次使用必須重新洗消滅菌。潔凈區(qū)衛(wèi)生管理規(guī)程D級(jí)潔凈區(qū)工作服每?jī)商烨逑匆淮螡崈羰仪鍧嵢瓌t潔凈室清潔三原則潔凈室清潔三原則原則一：用滅菌的純化水或注射用水和新鮮過(guò)濾得清潔劑：所有過(guò)濾的清潔劑必須盛裝在清潔并滅過(guò)菌的容器中，并正確貼簽；把預(yù)先過(guò)濾的清潔劑存放在潔凈室中可減小污染的風(fēng)險(xiǎn)。潔凈室清潔三原則原則一：用滅菌的純化水或注射用水和新鮮過(guò)濾得潔凈室清潔三原則原則二：使用清潔的工具和物料以避免將污染物帶入潔凈室：不銹鋼表面較好，塑料表面易劃痕并滯留塵粒和微生物；不要使用帶木柄的清潔工具，因其易脫落塵粒；毛刷易斷且滯留微生物，不宜使用；拖布和抹布應(yīng)用與潔凈室相適應(yīng)并不易產(chǎn)生脫落纖維的物料制成；抹布應(yīng)粘附塵土和細(xì)菌，且只使用一次；潔凈室使用的真空吸塵器應(yīng)安裝HEPA過(guò)濾器并定期測(cè)試。潔凈室清潔三原則原則二：使用清潔的工具和物料以避免將污染物帶潔凈室清潔三原則原則三：清潔過(guò)程中不得增加潔凈室的污染物：正確的清潔順序；正確的行為。潔凈室清潔三原則原則三：清潔過(guò)程中不得增加潔凈室的污染物：潔凈區(qū)清潔頻率取決于對(duì)潔凈室塵粒和微生物監(jiān)測(cè)的結(jié)果（空氣、表面）；符合GMP要求；分裝區(qū)域每一批分裝后都應(yīng)及時(shí)進(jìn)行清潔；所有清潔區(qū)域的地面、桌面、設(shè)備表面每天至少清潔一次.潔凈區(qū)清潔頻率取決于對(duì)潔凈室塵粒和微生物監(jiān)測(cè)的結(jié)果（空氣、表常用的滅菌方法2015版：最終滅菌法：濕熱滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法。

非最終滅菌法：過(guò)濾除菌法、無(wú)菌生產(chǎn)工藝。常用的滅菌方法2015版：常用的滅菌方法一、濕熱滅菌法：本法系指物質(zhì)在滅菌器內(nèi)利用高壓蒸汽或其他熱力學(xué)滅菌手段殺滅細(xì)菌，滅菌能力甚強(qiáng)，為熱力學(xué)滅菌中最有效及用途最廣的方法。藥品、藥品的溶液、玻璃器械、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、敷料以及其他遇高溫與濕熱不發(fā)生變化或損壞的物質(zhì)，均可用本法滅菌。用于濕熱滅菌法的生物指示劑：嗜熱脂肪芽孢桿菌、生孢梭菌,培養(yǎng):56℃/48h.滅菌效果驗(yàn)證應(yīng)進(jìn)行滿載熱分布/熱穿透、細(xì)菌挑戰(zhàn)性、空載試驗(yàn)、熱穿透F0值。常用的滅菌方法一、濕熱滅菌法：本法系指物質(zhì)在滅菌器內(nèi)利用高常用的滅菌方法二、干熱滅菌法：本法系指物質(zhì)在干燥空氣中加熱達(dá)到殺滅細(xì)菌的方法。160～170℃2小時(shí)以上，

170～180℃1小時(shí)以上，

250℃45分鐘以上（除熱源）。用于干熱滅菌法的生物指示劑：枯草芽孢桿菌孢子

三、除菌濾過(guò)法：本法系利用細(xì)菌不能通過(guò)致密具孔濾材的原理，除去對(duì)熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體物質(zhì)中的細(xì)菌從而達(dá)到無(wú)菌要求。過(guò)濾器材通常有濾柱、濾膜等。

用于濾過(guò)滅菌法的生物指示劑：黏質(zhì)沙雷菌、缺陷假單孢菌常用的滅菌方法二、干熱滅菌法：本法系指物質(zhì)在干燥空氣中加熱常用的滅菌方法四、輻射滅菌法：

本法系通過(guò)將最終產(chǎn)品的容器和包裝暴露在由適宜放射源（通常用Co60

）輻射的γ射線或適宜的電子加速器發(fā)生的射線中，達(dá)到殺滅細(xì)菌的目的。

用于輻射滅菌法的生物指示劑：短小芽孢桿菌孢子五、環(huán)氧乙烷滅菌法：本法系將產(chǎn)品暴露在充有環(huán)氧乙烷的環(huán)境中，使之達(dá)到滅菌的目的。本方法適用于氣體中穩(wěn)定的物質(zhì)。用于環(huán)氧乙烷滅菌法的生物指示劑：枯草芽孢桿菌孢子常用的滅菌方法四、輻射滅菌法：常用菌種保藏方法1、傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、庖肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4~6℃冰箱內(nèi)保存。2、液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。常用菌種保藏方法1、傳代培養(yǎng)保藏法3、載體保藏法是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。4、冷凍保藏法可分低溫冰箱（－20~－30℃，－50~－80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約－70℃）和液氮（－196℃）等保藏法。5、冷凍干燥保藏法先使微生物在極低溫度（－70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。3、載體保藏法各類菌種保藏條件及時(shí)間菌種培養(yǎng)基保存溫度傳種時(shí)間細(xì)菌一般多用于營(yíng)養(yǎng)瓊脂或根據(jù)菌種規(guī)定選用培養(yǎng)基4~6℃芽孢桿菌3~6個(gè)月，其它細(xì)菌每個(gè)月酵母菌一般用麥芽汁瓊脂或麥芽汁酵母膏瓊脂4~6℃一般4~6個(gè)月絲狀真菌一般用PDA瓊脂、蔡氏瓊脂或麥芽汁瓊脂等4~6℃每4個(gè)月移植一次（每2個(gè)月移植一次）各類菌種保藏條件及時(shí)間菌種培養(yǎng)基保存溫度傳種菌種的傳代方法1：菌斜面菌斜面（保存）；方法2：菌斜面營(yíng)養(yǎng)肉湯分離平板菌斜面；常用分離平板：大腸埃希菌——EMB瓊脂平板；銅綠假單胞菌——溴化十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基；金黃色葡萄球菌——甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基；沙門(mén)菌——SS瓊脂平板。菌種的傳代方法1：菌斜面菌斜面（保存）；對(duì)照用菌液制備菌種

工作菌種培養(yǎng)基菌懸液對(duì)照菌液大腸桿菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面營(yíng)養(yǎng)肉湯0.9%氯化鈉溶液沙門(mén)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面營(yíng)養(yǎng)肉湯0.9%氯化鈉溶液金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面營(yíng)養(yǎng)肉湯0.9%氯化鈉溶液銅綠假單胞菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面營(yíng)養(yǎng)肉湯0.9%氯化鈉溶液生孢梭菌硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基0.9%氯化鈉溶液白色念珠菌真菌瓊脂斜面真菌培養(yǎng)基0.9%氯化鈉溶液