實(shí)體腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其EMT分型臨床研究進(jìn)展

/10.12677/a實(shí)體腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其EMT分型臨床研究進(jìn)展1青海大學(xué)研究生院，青海西寧2青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，青海西寧收稿日期：2022年3月22日；錄用日期：2022年4月16日；發(fā)布日期：2022年4月25日進(jìn)入人體外周血的腫瘤細(xì)胞稱為循環(huán)腫瘤細(xì)胞，循環(huán)腫瘤細(xì)胞CTC可引起新的轉(zhuǎn)移病灶。既往相關(guān)檢測(cè)方法缺乏靈敏度及時(shí)效性，循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)檢測(cè)技術(shù)作為近年興起的液態(tài)活檢技術(shù)，具有實(shí)時(shí)、方便、準(zhǔn)確、微創(chuàng)的特點(diǎn)，對(duì)腫瘤診斷、臨床分期、方案制定、療效及預(yù)后評(píng)價(jià)均具有重要意義；同時(shí)，外周血中CTC檢測(cè)，有助于更準(zhǔn)確評(píng)估患者病情及分期，為腫瘤診斷提供證據(jù)，判斷患者預(yù)后，評(píng)估治療反應(yīng)的有效性，在患者出現(xiàn)耐藥時(shí)及時(shí)反饋信息，有助于及時(shí)改變治療策略，做到腫瘤的精準(zhǔn)醫(yī)療；可真實(shí)反映腫瘤負(fù)荷和特征，動(dòng)態(tài)反映腫瘤基因組學(xué)信息和基因表達(dá)譜變化，因此CTC不僅目前批準(zhǔn)用于腫瘤篩查和診斷，也在腫瘤治療和預(yù)后評(píng)估中具有重要作用。循環(huán)腫瘤細(xì)胞，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，實(shí)體腫瘤，液體活檢AdvancesinClinicalResearchonSolidTumorCirculatingTumorCellsandTheirEMTTypingWeizhongSun1,ZhiboLiu21GraduateSchoolofQinghaiUniversity,XiningQinghai2DepartmentofOncology,AffiliatedHospitalofQinghaiUniversity,XiningQinghaiReceived:Mar.22nd,2022;accepted:Apr.16th,2022;published:Apr.25th,2022AbstractTumorcellsenteringhumanperipheralbloodarecalledcirculatingtumorcells,andcirculating文章引用:孫維忠,劉志波.實(shí)體腫瘤循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其EMT分型臨床研究進(jìn)展[J].臨床醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2022,12(4):3198-3205.DOI:10.12677/acm.2022.124461DOI:10.12677/acm.2022.124461tumorcellCTCcancausenewmetastaticlesions.Previousdetectionmethodslacksensitivityandtimeliness.Circulatingtumorcell(CTC)detectiontechnology,asaliquidbiopsytechnologyemerginginrecentyears,isreal-time,convenient,accurateandminimallyinvasive,whichisofgreatsignificancefortumordiagnosis,clinicalstaging,protocolformulation,efficacyandprogno-sisevaluation.Atthesametime,thedetectionofCTCinperipheralbloodcanhelptomoreaccu-ratelyevaluatethepatient'sconditionandstage,provideevidencefortumordiagnosis,judgethepatient'sprognosis,evaluatetheeffectivenessoftreatmentresponse,andprovidetimelyfeedbackinthecaseofdrugresistanceinpatients,whichisconducivetotimelychangeoftreatmentstrate-gyandachieveaccuratecancermedicine.CTCcantrulyreflecttumorloadandcharacteristics,anddynamicallyreflectchangesintumorgenomicinformationandgeneexpressionprofile.Therefore,CTCisnotonlycurrentlyapprovedfortumorscreeninganddiagnosis,butalsoplaysanimportantroleintumortreatmentandprognosisevaluation.CirculatingTumorCell,EpithelialMesenchymalTransformation,SolidTumors,TheLiquidBiopsyCopyright?2022byauthor(s)andHansPublishersInc.ThisworkislicensedundertheCreativeCommonsAttributionInternationalLicense(CCBY4.0)./licenses/by/4.0/OpenAccessCTC即“循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CirculatingTumorCell)”，是由腫瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶脫落進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)的腫瘤細(xì)胞。CTC檢測(cè)是直接從血液中檢測(cè)腫瘤細(xì)胞，即利用先進(jìn)的循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)，可以將人體外周循環(huán)血液中的腫瘤細(xì)胞捕獲并檢測(cè)計(jì)數(shù)。CTC檢測(cè)彌補(bǔ)了腫瘤組織難以獲取的局限，且能重復(fù)取樣，具有實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)功能，目前已在各大腫瘤中心廣泛應(yīng)用。CTC的檢測(cè)對(duì)肺癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌、肝癌、胃癌、宮頸癌、胰腺癌等實(shí)體腫瘤的診斷、病情進(jìn)展監(jiān)測(cè)有著至關(guān)重要的臨床意義；本文就循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其EMT分型在實(shí)體腫瘤中的臨床研究進(jìn)展進(jìn)行闡述。CTC也稱循環(huán)腫瘤上皮細(xì)胞。是由澳大利亞一位內(nèi)科醫(yī)生Ashworth[1]于1896年首次通過顯微鏡在一名死于轉(zhuǎn)移瘤患者體內(nèi)外周血中發(fā)現(xiàn)存在一種細(xì)胞與尸檢發(fā)現(xiàn)的腫瘤細(xì)胞極其相似，隨后，首次提出了“循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)”這一新概念；然而當(dāng)時(shí)由于這些細(xì)胞在血液中的極度稀有性以及相關(guān)技術(shù)的條件有限，CTC的研究相對(duì)較少，然而時(shí)代在進(jìn)步，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷提高以及CTC研究的逐漸深入，對(duì)其生物學(xué)特性的研究同時(shí)也取得了較大程度的進(jìn)展。CTC來源于原發(fā)惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移腫瘤[2]，當(dāng)其獲得脫離基底膜能力之后通過侵入組織基質(zhì)進(jìn)而進(jìn)入血管的腫瘤細(xì)胞；目前CTC最新定義為：從腫瘤原發(fā)部位或轉(zhuǎn)移灶脫落后進(jìn)入血液循環(huán)的細(xì)胞[3]，它能夠反映惡性腫瘤組織的生物學(xué)情況；進(jìn)入血液循環(huán)的CTC細(xì)胞可以錨定在血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面，通過受體–配體結(jié)合的方式使CTC發(fā)生外滲，進(jìn)而產(chǎn)生遠(yuǎn)處錨定，使腫瘤細(xì)胞形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。所不同的是：?jiǎn)蝹€(gè)CTC細(xì)胞可通過毛細(xì)血管向外遷移，而CTC簇可逆性重組為單排鏈，再橫向穿過毛細(xì)血管[4]，CTC表面的整聯(lián)蛋白通過與內(nèi)皮細(xì)胞或血管細(xì)胞表面的黏附分子結(jié)合，為CTC突破血管壁細(xì)胞外基質(zhì)提供動(dòng)力，CTC產(chǎn)生的趨化因子配體因各自受體表達(dá)情況不同，最終決定遠(yuǎn)處的歸巢靶向器官，這些進(jìn)入血管的腫瘤細(xì)胞被稱為CTC。而大部分CTC會(huì)被人體免疫系統(tǒng)所清除，僅有少數(shù)存活下來的CTC會(huì)隨血液循環(huán)到達(dá)體內(nèi)其他部位，形成腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。實(shí)體DOI:10.12677/acm.2022.124461腫瘤每天都有大量腫瘤細(xì)胞進(jìn)入到血液循環(huán)中，CTC在血液循環(huán)中面臨著免疫監(jiān)視、血流剪切力、氧化應(yīng)激等多方面的存活因素壓力[5]，只有未被免疫系統(tǒng)清除的CTC才有可能進(jìn)行播散定植并形成轉(zhuǎn)移灶；其中單獨(dú)一個(gè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞很容易被機(jī)體免疫系統(tǒng)中免疫細(xì)胞清除，發(fā)生凋亡，進(jìn)而死亡。而由多個(gè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞組成的循環(huán)腫瘤細(xì)胞團(tuán)或循環(huán)腫瘤微栓(CTM)[6]，即細(xì)胞團(tuán)形式的CTC，能更大程度上發(fā)生CTC可預(yù)示疾病的進(jìn)展及預(yù)后，是多種實(shí)體腫瘤有意義的腫瘤標(biāo)志物[8]。1)稀有性：實(shí)體腫瘤中每天有大量腫瘤細(xì)胞脫落進(jìn)入到血液循環(huán)池，但只有極少數(shù)循環(huán)腫瘤細(xì)胞能存活，每105~107個(gè)有核細(xì)胞中才有一個(gè)CTC。2)異質(zhì)性：腫瘤在轉(zhuǎn)移過程中會(huì)發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，在這個(gè)過程中細(xì)胞中上皮標(biāo)記物表達(dá)量(EpCAM、E-cadherin、CK)下調(diào)，間質(zhì)標(biāo)記物表達(dá)量(Vimentin、N-cadherin)上調(diào)，從而使惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲性以及轉(zhuǎn)移性增強(qiáng)[9]；不同實(shí)體瘤來源的CTC、不同患者CTC表面抗原表達(dá)，分布也存在差異。3)非典型形態(tài)：CTC入血后隨血液循環(huán)快速流動(dòng)，與其他細(xì)胞相碰撞，繼而CTC受到血管壁的擠壓，受機(jī)體免疫系統(tǒng)以及藥物的攻擊等產(chǎn)生一系列效應(yīng)后將會(huì)導(dǎo)致CTC形態(tài)有別于腫瘤組織，細(xì)胞大小、形態(tài)以及表型發(fā)生改變[10]。與正常血細(xì)胞比較，CTC普遍具有細(xì)胞體積大、密度小、剛性低和膜電容高等的特性。4)增殖活性：CTC平均半衰期較短，在體內(nèi)循環(huán)的CTC大多處于休眠狀態(tài)[11]，期間還可能發(fā)生凋亡，最終只有極少量CTC形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶。了解血液中CTC休眠/活化[12]所占比例，則能更好地決策治療方案，特別是化學(xué)治療方案，使抗惡性腫瘤化學(xué)治療更為精準(zhǔn)。4.CTC檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)因?yàn)镃TC攜帶了腫瘤細(xì)胞特異性的DNA信息，所以也被稱為“液體活檢”樣本。在1974年Sorrells首次提出來“液態(tài)活檢”這一概念，當(dāng)時(shí)主要是利用關(guān)節(jié)腔中的滑液來分析診斷滑膜性疾病，目前這項(xiàng)技術(shù)經(jīng)過不斷實(shí)踐、發(fā)展，被應(yīng)用到當(dāng)前臨床實(shí)踐中，服務(wù)于臨床。液態(tài)活檢的標(biāo)本來源主要為以血液為主，血液在臨床上是很容易獲取的臨床檢驗(yàn)樣本，而液態(tài)活檢的一個(gè)主要研究對(duì)象就是CTC。由于臨床抽取外周血對(duì)患者損傷很小，因此可以根據(jù)需要隨時(shí)進(jìn)行CTC抽取外周血檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)惡性腫瘤動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。一次診斷不能指導(dǎo)后續(xù)的所有治療，因?yàn)椴∏槭亲兓?；腫瘤的治療極其復(fù)雜，即使相同分期和病理類型的腫瘤患者接受同樣的治療方案，其療效也有可能截然不同，因此，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)病情和治療效果，才可能在惡性腫瘤臨床治療中先發(fā)制瘤，及時(shí)調(diào)整治療策略、方案，以期獲得最大臨床治療效果。CTC檢測(cè)相比較CT可提前監(jiān)測(cè)到腫瘤轉(zhuǎn)移趨勢(shì)，便于及時(shí)治療；CTC檢測(cè)可更早地提示治療效果，根據(jù)需要及時(shí)調(diào)整治療方案，讓腫瘤治療效果臨床最大化；在腫瘤個(gè)體化治療上可在腫瘤用藥或者換抗腫瘤治療方案之前，CTC的基因特征能清楚的指導(dǎo)患者下一步的藥物選擇，提高治療效果；其次，CTC檢測(cè)靈敏度高，可以在轉(zhuǎn)移灶形成前就檢測(cè)到CTC異常，比CT檢查更早提示腫瘤變化趨勢(shì)?？傊珻TC檢查具有微創(chuàng)、便捷、高靈敏度，臨床可行性高等優(yōu)點(diǎn)。5.循環(huán)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)腫瘤細(xì)胞EMT是指上皮腫瘤細(xì)胞在受到內(nèi)界以及外界環(huán)境刺激后會(huì)向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化時(shí)上皮鈣黏素下調(diào)、細(xì)胞骨架改變、腫瘤細(xì)胞從細(xì)胞間黏附脫離，其增殖分裂、侵襲轉(zhuǎn)移、修復(fù)和抗藥能力都將大大增加；激活上皮鈣黏素時(shí)可以產(chǎn)生上皮間質(zhì)的逆轉(zhuǎn)化，它可以引起EMT[13]，轉(zhuǎn)換后的CTC下調(diào)DOI:10.12677/acm.2022.124461了上皮細(xì)胞標(biāo)志物的同時(shí)上調(diào)了間皮細(xì)胞標(biāo)志。上皮標(biāo)志物表達(dá)水平降低后，CTC的檢測(cè)呈現(xiàn)假陰性；因此，檢測(cè)EMT標(biāo)志物可作為上皮標(biāo)志物的重要補(bǔ)充，在CTC的檢測(cè)中發(fā)揮重要作用。CTC可分為上皮型(E-CTC)、上皮間質(zhì)型(E/M-CTC)、間質(zhì)型(M-CTC)；其中，間質(zhì)型CTC的惡性程度最高，一般情況下，如果病情緩解或者治療效果顯著，患者血液中檢出的間質(zhì)型CTC比例會(huì)下降，間質(zhì)型CTC的存在與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。6.CTC在實(shí)體腫瘤中的研究進(jìn)展6.1.CTC在非小細(xì)胞肺癌中的臨床研究進(jìn)展CTC能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)非小細(xì)胞肺癌在抗腫瘤過程中的動(dòng)態(tài)變化。對(duì)此，陸軍醫(yī)科大學(xué)西南醫(yī)院[14]采集并分析了非小細(xì)胞肺癌和良性肺疾病中的CTC。得出的結(jié)論是：良性肺疾病患者的E-CTC、E/M-CTC和總CTC顯著低于NSCLC患者；非小細(xì)胞肺癌M-CTC略高于良性肺疾?。挥纱丝梢?，CTC陽(yáng)性可以很好地預(yù)測(cè)非小細(xì)胞肺癌的復(fù)發(fā)，對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者與良性肺疾病患者的鑒別有較大的臨床價(jià)值，即非小細(xì)胞肺癌患者CTC陽(yáng)性率較良性肺疾病患者高；E-CTC、E/M-CTC和CTC總數(shù)在非小細(xì)胞肺癌患者與良性肺疾病患者的鑒別上也有比較大的臨床價(jià)值，即非小細(xì)胞肺癌患者E-CTC、E/M-CTC和CTC總數(shù)較良性肺疾病患者高；那非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者CTC的EMT表型與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移之間有什么關(guān)系？在臨床研究以及癌癥患者中CTC與癌癥的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；然而，哪種類型的CTC在癌癥轉(zhuǎn)移中發(fā)揮關(guān)鍵作用目前還不明確，對(duì)此，浙江大學(xué)附屬醫(yī)院第一醫(yī)院[15]一項(xiàng)研究采集CTC進(jìn)行基于EMT標(biāo)志物的分子分型檢測(cè)，結(jié)果表明，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者外周血中CTC的EMT表型中M-CTC陽(yáng)性率最6.2.CTC在局限性前列腺癌中的臨床研究進(jìn)展CTC已被批準(zhǔn)用于晚期前列腺癌病情監(jiān)測(cè)，但是CTC在局限性前列腺癌的臨床價(jià)值尚不明確。對(duì)此，上海交通大學(xué)新華醫(yī)院泌尿外科一項(xiàng)研究[16]納入80例新確診的局限性前列腺癌患者，進(jìn)行CTC與局限性前列腺癌的臨床相關(guān)性分析，這項(xiàng)臨床觀察型研究目的在于檢測(cè)、分析不同EMT轉(zhuǎn)化表型的CTC與局限性前列腺癌的臨床相關(guān)性，此次實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是CTC檢測(cè)陽(yáng)性率為55%；其中，混合型CTC最具臨床價(jià)值并且與局限性前列腺癌的PSA水平、病理分期等因素密切相關(guān)。間質(zhì)型CTC在局限性前列腺癌中的陽(yáng)性率較低，但與精囊侵犯有關(guān)；上皮型CTC的臨床價(jià)值有限。由此可見，混合型CTC在局限性前列腺癌的臨床價(jià)值是不言而喻的，局限性前列腺癌患者混合型CTC以及總CTC數(shù)目均是高陽(yáng)性率；其次，間質(zhì)型CTC精囊侵犯有一定的相關(guān)性。至此，我們還可知混合型CTC與局限性前列腺癌的臨床病理變量密切相關(guān)，并且能夠在術(shù)前預(yù)測(cè)患者術(shù)后病理分期。6.3.CTC在晚期結(jié)直腸癌中的臨床研究進(jìn)展首先可以肯定的是：CTC檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌有臨床應(yīng)用價(jià)值。北京大學(xué)深圳醫(yī)院[17]分析了晚期結(jié)直腸癌患者血樣本中CTC計(jì)數(shù)與期結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的相關(guān)性。通過此次實(shí)驗(yàn)探討循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)EMT分型對(duì)大腸癌(CRC)的診斷價(jià)值。結(jié)果顯示M-CTC計(jì)數(shù)與晚期結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性。6.4.CTC在肝細(xì)胞癌中有的臨床進(jìn)展6.4.1.肝切除術(shù)是HCC的一線治療方法肝切除術(shù)作為HCC的一線治療方法，是否進(jìn)行解剖或非解剖切除，臨床目前對(duì)此處于模糊的狀態(tài)。DOI:10.12677/acm.2022.124461對(duì)此可根據(jù)循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)的數(shù)量和分型比較兩種手術(shù)方式治療肝細(xì)胞癌的臨床效果。廣西醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽外科一項(xiàng)研究[18]搜集了2015年~2017年接受R0切除治療的136例肝細(xì)胞癌患者，根據(jù)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表型對(duì)CTC進(jìn)行富集和分類；此項(xiàng)研究的結(jié)果顯示是總患者中CTC陽(yáng)性率為91.91%，說明CTC陽(yáng)性率與HCC呈高度正相關(guān)。然而，在CTC計(jì)數(shù)較低組、M-CTC和E/M-CTC陰性的患者中，TFS(無治療生存期)顯著增高，也就是說，在CTC計(jì)數(shù)較低高、M-CTC和E/M-CTC陽(yáng)性的患者中，TFS(無治療生存期)顯著降低。復(fù)發(fā)的發(fā)生率和類型，肝切除前CTC計(jì)數(shù)較高組和M-CTC和E/M-CTC陽(yáng)性與肝外和多發(fā)性肝內(nèi)復(fù)發(fā)呈現(xiàn)顯著相關(guān)性。接受解剖性肝切除治療的患者肝衰竭和腹水的發(fā)病率較高。由此可見，解剖性肝切除可能比非解剖性肝切除僅在低CTC計(jì)數(shù)和M-CTC和E/M-CTC陰性的患者中更獲益。對(duì)于CTC計(jì)數(shù)高的患者，手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后獲益之間的平衡比采用的切除方法更重要；但需要注意的是：1)解剖性切除可提高HCC患者的生存，但只適用于那些CTC計(jì)數(shù)低且M-CTC和E/M-CTC陰性的患者。2)術(shù)前CTC分析可更好地指導(dǎo)HCC切除方法的選擇。6.4.2.循環(huán)腫瘤細(xì)胞表型與肝細(xì)胞癌(HCC)術(shù)后預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系CTC可能是惡性腫瘤有前景的預(yù)后標(biāo)志物。然而，關(guān)于其在肝細(xì)胞癌(HCC)中的價(jià)值卻鮮有報(bào)道。對(duì)此，南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院肝膽外科一項(xiàng)研究[19]采集了大量肝癌根治術(shù)前外周血樣本，分析CTC表型與HCC患者臨床病理因素及復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。結(jié)果顯示165例HCC患者中CTC檢測(cè)陽(yáng)性率為70.9%。較高甲胎蛋白(AFP)水平、多發(fā)腫瘤、TNM及存在栓子或微栓子的患者CTC數(shù)目增加更為常見。用EMT標(biāo)志物檢測(cè)CTC的異質(zhì)性。M-CTC與高AFP水平、多發(fā)腫瘤、晚期TNM、栓子或微栓子的存在及早期復(fù)發(fā)密切相關(guān)。M-CTC的存在預(yù)測(cè)無復(fù)發(fā)生存期最短，其次為E/M-CTC，最后是E-CTC。由此可見，肝細(xì)胞癌(HCC)術(shù)后患者CTC總數(shù)與肝細(xì)胞癌(HCC)術(shù)后患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，相應(yīng)的，各型CTC中M-CTC與肝細(xì)胞癌(HCC)術(shù)后患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)性最高，其次是E/M-CTC，與肝細(xì)胞癌(HCC)術(shù)后患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)性最低的是E-CTC；因此，CTC表型可作為HCC患者預(yù)后指標(biāo)[20]。6.5.CTC在晚期胃癌中的臨床研究進(jìn)展胃癌(GC)具有較高的整體發(fā)病率和較高的死亡率，并且由于晚期胃癌具有高度侵襲性和異質(zhì)性，現(xiàn)有的預(yù)后方法具有局限性，因此需要一種新的判斷預(yù)后指標(biāo)。進(jìn)入血液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)檢測(cè)被認(rèn)為用于腫瘤的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及腫瘤治療療效評(píng)估。臨床研究表明程序性死亡受體1(PD-1)免疫療法對(duì)部分晚期胃癌患者有效。對(duì)此，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院腫瘤中心一項(xiàng)研究[21]納入32位晚期胃癌患者，此項(xiàng)研究結(jié)果顯示是CTC計(jì)數(shù)與臨床病理參數(shù)之間存在顯著相關(guān)性，與傳統(tǒng)方法相比，監(jiān)測(cè)CTC亞型評(píng)估疾病狀態(tài)具有更高的敏感性。E-CTC的計(jì)數(shù)及其在總CTC中的相對(duì)豐度與臨床療效高度相關(guān)。更可喜的是CTC亞型對(duì)疾病狀態(tài)的評(píng)估具有更高的敏感性，可以更簡(jiǎn)單有效地檢測(cè)晚期胃癌患者的疾病狀態(tài)；其次，需要注意的是本次研究還發(fā)現(xiàn)上皮型CTC的計(jì)數(shù)晚期胃癌臨床療效呈高度相關(guān)6.6.CTC在早期宮頸癌中的臨床研究進(jìn)展四川省腫瘤醫(yī)院一項(xiàng)研究[22]收集了90例早期宮頸癌患者外周血樣本，分析了CTC數(shù)目、CTC表型與患者臨床病理特征的相關(guān)性。此項(xiàng)研究的結(jié)果顯示I~IIA期宮頸癌患者CTC陽(yáng)性率為90%。在FIGO1II期、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴管受累的患者中，發(fā)現(xiàn)CTC數(shù)量增加。上皮型CTC占38.89%，間質(zhì)型CTC占23.33%，混合表型CTC占14.44%，其中間質(zhì)型CTC多見于FIGOI期、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管受累及深層間質(zhì)浸潤(rùn)患者。由此可見，間質(zhì)型的CTC與I~IA期宮頸癌的盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴管浸潤(rùn)有高度相關(guān)性。循環(huán)腫瘤細(xì)胞表型的檢測(cè)有助于宮頸癌微轉(zhuǎn)移的早期診斷和疾病狀態(tài)的評(píng)估。DOI:10.12677/acm.2022.1244616.7.CTC在胰腺導(dǎo)管腺癌中的臨床研究進(jìn)展胰腺癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞EMT標(biāo)志物的分子檢測(cè)有哪些臨床潛在價(jià)值？中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院一項(xiàng)研究[23]納入107例PDAC患者進(jìn)行CTC檢測(cè)，用以評(píng)估胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)三個(gè)亞型(EMT)的臨床特點(diǎn)。研究結(jié)果顯示：78.5%的PDAC患者檢測(cè)到CTC，分析顯示，與CTC總數(shù)小于6的胰腺癌患者相比，CTC總數(shù)26的胰腺癌患者OS和PFS顯著降低。間質(zhì)型CTC(M-CTC)的存在與TNM分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。此外，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)和中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)在CTC陰性和每一種CTC亞型陽(yáng)性的患者中有顯著差異。由此可知，CTC總數(shù)高低狀態(tài)于與胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)患者總生存率和無進(jìn)展生存期呈負(fù)相關(guān)；M-CTC的總數(shù)狀態(tài)與TNM分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)；因此，EMT標(biāo)志物對(duì)CTC進(jìn)行分型有助于識(shí)別更具侵襲性的CTC亞群，并為確定適合的臨床路徑提供有力依據(jù)。6.8.CTC在食管鱗癌中的臨床研究進(jìn)展眾所周知，食管癌在我國(guó)是發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤之一，其早期能發(fā)現(xiàn)的臨床癥狀不太典型，患者就診時(shí)已屬于中晚期，生存率較低，預(yù)后較差?？赏ㄟ^CTC的檢測(cè)可動(dòng)態(tài)反映腫瘤的狀態(tài)，較早發(fā)現(xiàn)，較早治療。對(duì)此，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院瑞金醫(yī)院胸外科一項(xiàng)研究[24]回顧性收集21例ESCC患者血樣，來探討循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)EMT狀態(tài)與食管鱗癌(ESCC)的相關(guān)性。結(jié)果顯示共檢測(cè)到129個(gè)CTC，其中E-CTC11個(gè)，E/M-CTC76個(gè)，M-CTC42個(gè)。每個(gè)患者的CTC平均數(shù)為6.1±7.1個(gè)，其中E-CTC0.5±0.9個(gè)，E/M-CTC3.6±5.2個(gè)，M-CTC2.0+2.7個(gè)；CTC總數(shù)與E/M-CTC及M-CTC數(shù)量呈相關(guān)性，而與E-CTC數(shù)量無關(guān)；CTC數(shù)量與N分期和TNM分期相關(guān)。由此可見，CTC總數(shù)、M-CTC及E/M-CTC與食管鱗癌的發(fā)生呈正相關(guān)性。E/M-CTC和M-CTC可能在ESCC進(jìn)展中發(fā)揮重要作用；CTC數(shù)量可能是ESCC預(yù)后預(yù)測(cè)的潛在因素。綜合以上幾種實(shí)體瘤患者CTC檢測(cè)研究：1)證實(shí)實(shí)體瘤患者外周血CTC的存在以及EMT分型在腫瘤轉(zhuǎn)移的診斷分期和預(yù)后預(yù)測(cè)等方面具有重要的臨床意義；2)腫瘤患者外周血間質(zhì)性CTC與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈高度正相關(guān)；3)腫瘤患者外周血CTC總數(shù)與腫瘤預(yù)后呈負(fù)相關(guān)；4)循環(huán)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)分型中，間質(zhì)性CTC以及混合型CTC惡性程度較上皮型CTC高，具有最強(qiáng)的轉(zhuǎn)移侵襲能力；5)總的來說，間質(zhì)性CTC表現(xiàn)出的侵襲性最高，但是在以上闡述中可以看到，需要注意的是在局限性前列腺癌中，混合型CTC表現(xiàn)出的侵襲性最高。CTC分子分型可為全面評(píng)估腫瘤狀態(tài)和腫瘤精準(zhǔn)診療提供重要的實(shí)時(shí)信息；基于治療靶標(biāo)的CTC分型分析有助于提示藥物療效從而指導(dǎo)治療決策，如ARV7(前列腺癌內(nèi)分泌治療)、HER-2/EGFR/KRAS(靶向用藥)、PD-L1(免疫治療)等。CTC-EMT分型的臨床應(yīng)用價(jià)值在多種腫瘤類型研究中得到證實(shí)，結(jié)合CTC計(jì)數(shù)和EMT分型及其動(dòng)態(tài)變化可輔助腫瘤分期、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及預(yù)后預(yù)測(cè)；針對(duì)腫瘤細(xì)胞干性和代謝特征的CTC功能分型有助于反映CTC的生物學(xué)轉(zhuǎn)歸和疾病的發(fā)展，是未來泛癌種CTC分子分型發(fā)展的前沿方向。[1]Ahmed,W.,Mofed,D.,Zekri,A.R.,El-Sayed,N.,RahoumDOI:10.12677/acm.2022.124461toticInductionasMechanismsofActionofWithaniasomniCellLine.JournalofInternationalMedicalResearch,46,1358-1369./10.1177/0300060517752022[2]Ferreira,M.M.,Ramani,V.C.andJeffr374-394./10.1016/j.molonc.2016.01.007[4]Kulasinghe,A.,ClustersUsingStraightMicrofluidi/10.3390/cancers11010089[5]Nurwidya,F.,Zaini,J.,Putra,A.C.,Andarini,S.,HudoCellandCell-FreeCirculatingT/10.4068/cmj.2051[6]Fabisiewicz,A.andGrzybowska,E.(201734,ArticleNo.12./10.1007/s12032-016-0875-0[8]胡玉倩,謝圣高,鄭義,寧勇[9]Thiery,J.P.(2002)Epithelial-MesenchymalTransitionsinTumourProgression.NatureRe/10.1038/nrc822TumorCellsinBreastCancer:TherapyandLowProliferativeActivity.Clinical/10.1158/1078-0432.CCR-04-24[13]吳方,焦娟,楊家樹,劉杰.循[14]Li,J.,Liao,Y.,Ran,Y.,WantionofSensitivityandSpecificityofCanPatrol?TechnologyforDetectionofCirculatingTumorCellsinPatientswithNon-SmallCellLungCancer.BMCPulmonaryMedicine,20,ArticleNo.274./10.1186/s12890-020-01314-4i,L.,Li,J.,Zheng,J.,Zhang,S.andZfCirculatingTumorCellsIsAssociatedwithDistantMetastasisinPatientswithNSCLC.MolecularMedicineReports19,601-608./10.3892/mmr.2018.9684[16]Liu,H.,Ding,J.,Wu,Y.,Wu,D.andQi,J.(2020)ProspectiveStudyoftheClinicalchymalCirculatingTumorCellsinLocalizedProstateCancer.CancerManagementandResearch,12,/10.2147/CMAR.S253997[17]Hou,J.,Guo,C.andLyu,G.(2020)ClinicalSignificanceofEpithelial-MesenchymaTumou