化學(xué)檢驗原理課件

化學(xué)檢驗原理1、舟遙遙以輕飏，風(fēng)飄飄而吹衣。2、秋菊有佳色，裛露掇其英。3、日月擲人去，有志不獲騁。4、未言心相醉，不再接杯酒。5、黃發(fā)垂髫，并怡然自樂?；瘜W(xué)檢驗原理化學(xué)檢驗原理1、舟遙遙以輕飏，風(fēng)飄飄而吹衣。2、秋菊有佳色，裛露掇其英。3、日月擲人去，有志不獲騁。4、未言心相醉，不再接杯酒。5、黃發(fā)垂髫，并怡然自樂。臨床化學(xué)檢驗原理臨床生化實驗技術(shù)臨床生化實驗技術(shù)是臨床生化檢驗工作的重要基礎(chǔ)，是臨床生化檢驗工作能夠順利進(jìn)行的技術(shù)保障。臨床生化實驗室技術(shù)較多，本章主要介紹光譜檢驗技術(shù)、色譜檢驗技術(shù)、電泳技術(shù)、免疫學(xué)檢驗技術(shù)、電化學(xué)分析技術(shù)、生物傳感技術(shù)等在臨床生物化學(xué)中的應(yīng)用及有關(guān)的注意事項。其目的在于鞏固基礎(chǔ)，加強新技術(shù)的學(xué)習(xí)，提高基礎(chǔ)水平。為進(jìn)一步做好臨床生化檢驗工作打好基礎(chǔ)?；瘜W(xué)檢驗原理1、舟遙遙以輕飏，風(fēng)飄飄而吹衣?；瘜W(xué)檢驗原理化學(xué)1臨床化學(xué)檢驗原理臨床化學(xué)檢驗原理2臨床生化實驗技術(shù)臨床生化實驗技術(shù)是臨床生化檢驗工作的重要基礎(chǔ)，是臨床生化檢驗工作能夠順利進(jìn)行的技術(shù)保障。臨床生化實驗室技術(shù)較多，本章主要介紹光譜檢驗技術(shù)、色譜檢驗技術(shù)、電泳技術(shù)、免疫學(xué)檢驗技術(shù)、電化學(xué)分析技術(shù)、生物傳感技術(shù)等在臨床生物化學(xué)中的應(yīng)用及有關(guān)的注意事項。其目的在于鞏固基礎(chǔ)，加強新技術(shù)的學(xué)習(xí)，提高基礎(chǔ)水平。為進(jìn)一步做好臨床生化檢驗工作打好基礎(chǔ)。臨床生化實驗技術(shù)臨床生化實驗技術(shù)是臨床生3光譜檢驗技術(shù)光譜檢驗技術(shù)利用各種化學(xué)物質(zhì)具有發(fā)射、吸收或散射光譜譜系的特征，以此來確定物質(zhì)性質(zhì)、結(jié)構(gòu)或含量的技術(shù)。根據(jù)物質(zhì)對光譜響應(yīng)特征的不同，可把光譜檢驗技術(shù)分為發(fā)射光譜分析技術(shù)、吸收光譜分析技術(shù)和散射光譜分析技術(shù)三大類。在臨床生化檢驗中，光譜分析是一類十分重要的技術(shù)，應(yīng)用極為廣泛。它既可以研究物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，也可以對特定物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。吸收光譜分析法發(fā)射光譜分析法散射光譜分析法

光譜檢驗技術(shù)光譜檢驗技術(shù)利用各種化學(xué)物4吸收光譜分析法

吸收光譜是指波長連續(xù)分布的光透過物質(zhì)時，某些波長的光被物質(zhì)吸收而產(chǎn)生的暗線或暗帶組成的光譜。利用吸收光譜對物質(zhì)進(jìn)行定量的技術(shù)稱為吸收光譜分析法，是實驗室最常用的分析技術(shù)之一。它操作簡便、快速，線性范圍較寬，應(yīng)用廣泛。目前最常應(yīng)用的技術(shù)有可見－紫外分光光度法和原子吸收分光光度法?？梢姡贤夥止夤舛确ㄔ游辗止夤舛确?/p>

吸收光譜分析法吸收光譜是指波長連續(xù)分5可見－紫外分光光度法檢測原理和方法可見－紫外分光光度法的理論基礎(chǔ)基于朗伯－比爾定律?？梢姡贤夤鈪^(qū)一般是指波長從200nm至760nm范圍內(nèi)的光，其中小于400nm的是紫外光，該分析是根據(jù)物質(zhì)的分子對光的吸收特性進(jìn)行成分分析或分子結(jié)構(gòu)分析的方法。在可見－紫外分光光度法中，通常在測定未知樣品濃度的同時，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物作比較，可以利用公式As=KCsL，Ax=KCxL來計算結(jié)果，即比較法。其中A為吸光度，C為溶液的濃度，其下標(biāo)s、x分別表示屬標(biāo)準(zhǔn)物、待測物，k為常數(shù)，L為比色杯的光徑?；?qū)⒁幌盗袧舛炔煌臉?biāo)準(zhǔn)溶液按照一定操作過程顯色后，分別測吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線找出相對應(yīng)的待測?？梢姡贤夥止夤舛确z測原理和方法6原子吸收分光光度法基于光源輻射出具有待測元素特征譜線的光，通過原子化器，被其中待測元素的基態(tài)原子所吸收，根據(jù)吸收而導(dǎo)致輻射特征譜線光被減弱的程度來測定待測元素的含量。與其它分析方法比較，它具有靈敏、準(zhǔn)確、操作簡便、分析速度快、干擾少、無需化學(xué)反應(yīng)和測量元素含量范圍較廣等優(yōu)點，由于其檢測靈敏度較高，操作也比較復(fù)雜，而且每種元素需要一種光源，因此在臨床實驗室一般應(yīng)用較少，主要用于測定鈣、鎂、銅、鉛、鋅等機體微量元素，是目前這些元素測得的參考方法。在原子吸收分光光度法中，定量分析常用的方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、直接比較法和標(biāo)準(zhǔn)加入法。其基本原理都是利用吸光度與濃度之間的線性函數(shù)關(guān)系，由已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液求得樣品的濃度。原子吸收分光光度法基于光源輻射出具有待測元素特征譜線的7發(fā)射光譜分析法臨床生物化學(xué)檢驗常用的有熒光分析法（fluorometry）和火焰光譜法。由于火焰光譜法操作麻煩，影響因素多，現(xiàn)已被簡便可靠的離子選擇電極法所取代，故這里主要介紹熒光分析法。發(fā)射光譜分析法臨床生物化學(xué)檢驗常用的有熒光分析法（fl8散射光譜分析法散射光譜分析法主要測定的是光線通過溶液混懸顆粒后的吸光度或光散射程度的一類定量方法。常用的方法有透射比濁法和散射比濁法兩種。目前，在臨床生化檢驗中主要用于免疫比濁法散射免疫比濁分析透射免疫比濁分析散射光譜分析法散射光譜分析法主要測定的是9透射免疫比濁分析

透射比濁法（turbidimetry）的基本原理是測定一定體積的溶液通過的光線量（光通量），當(dāng)光線通過時，由于溶液中存在抗原一抗體復(fù)合物粒子對光線的反射和吸收，引起透射光的減少，測定的光通量和抗原抗體復(fù)合物的量成反比。在透射比濁中，測量的是透過不溶性復(fù)合物到達(dá)探測器而未被散射或吸收的光線，測定角度與正前方夾角為0°。該方法的測定原理：試驗中設(shè)計檢測抗體過量，待測樣品中的Ig在反應(yīng)介質(zhì)中與相應(yīng)的檢測抗體發(fā)生抗原一抗體反應(yīng)，形成可溶性復(fù)合物，在聚乙二醇（PEG）的作用下，加速抗原一抗體復(fù)合物的形成和穩(wěn)定性，使反應(yīng)介質(zhì)的濁度發(fā)生改變，利用分光光度計測定光線被吸收的量，待測樣本的抗原含量與吸光度成正比，光通量與抗原含量成反比。利用標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，待測樣本的濁度變化可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出來。透射免疫比濁分析透射比濁法（turb10免疫比濁分析的臨床應(yīng)用

臨床主要用于檢測血漿、體液中的特定蛋白系列，如免疫球蛋白IgG、lgA、IgM反應(yīng)抗體的體液免疫功能；k、L用于M蛋白病的診斷；補體C3、C4反應(yīng)補體的消耗情況；前白蛋白可作為營養(yǎng)不良和肝功能不全的指標(biāo)；α1－抗胰蛋白酶缺乏者可發(fā)生年青人肺氣腫、新生兒和成人肝損害；轉(zhuǎn)鐵蛋白用于貧血的鑒別診斷；炎性反應(yīng)蛋白SAA、C-反應(yīng)蛋白、載脂蛋白、尿微量蛋白系列和一些小分子量的治療性藥物濃度等。這些特定蛋白成分的定量檢測，可為臨床診斷與治療提供有效的病理生理指標(biāo)，而且是臨床診斷，判斷治療效果，分析預(yù)后的依據(jù)。因此，散射比濁分析保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的同時，應(yīng)對一些指標(biāo)的臨床應(yīng)用價值，與疾病發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系，標(biāo)本采集時可能影響正確檢測的因素等有較全面的了解，才能更好的利用這些病理生理指標(biāo)，為疾病診斷和協(xié)助治療提供更好的服務(wù)。免疫比濁分析的臨床應(yīng)用臨床主要11

透射免疫比濁法

（transmissionturbidimetry原理抗原與抗體在一定緩沖液中形成IC，當(dāng)光線透過反應(yīng)溶液時，由于溶液內(nèi)IC粒子對光線的反射和吸收，引起透射光減少，IC越多透射光越少，可用吸光度表示。透射免疫比濁法

（transmissiont12透射免疫比濁法溶液中形成的復(fù)合物分子應(yīng)足夠大(35-100nm)溶液中形成的復(fù)合物分子要足夠多，控制抗原抗體反應(yīng)的溫度和時間，加增敏劑，提高復(fù)合物形成速度，縮短檢測時間，應(yīng)選擇親和力好、效價高的抗體，保證抗體過量，將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至少5個濃度測定，以吸光度值(A)為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，在半對數(shù)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。反應(yīng)要求透射免疫比濁法溶液中形成的復(fù)合物分子應(yīng)足夠大(35-13透射免疫比濁法【缺陷】靈敏度較低。要求抗原－抗體復(fù)合物分子應(yīng)足夠大、足夠多，分子太小則入射光直接通過。加增敏劑。直線光路，靈敏度有先天缺陷。設(shè)計散射比濁透射比濁是依據(jù)透射光減弱的原理來定量的，因此只能測定抗原－抗體反應(yīng)的第二階段，檢測仍需抗原－抗體溫育反應(yīng)時間，檢測時間較長。透射免疫比濁法【缺陷】14謝謝大家??！end謝謝大家?。nd15謝謝你的閱讀知識就是財富豐富你的人生71、既然我已經(jīng)踏上這條道路，那么，任何東西都不應(yīng)